薄层色谱方法总结ppt课件

1、尺薄层色谱法总结1，1 .方法原理，a .流动相利用毛细管力带样品通过固定相。 b .样品与固定相的相互作用是指在迁移过程中，成分由于偶极- (诱导) -取向力、氢键和范德瓦尔斯力的作用，会产生不同程度的延迟、吸附、分散、络离子交换和络合等分离反应历程。 2，2 .溶剂，使用的溶剂应为“分析纯”或“色谱纯”，溶剂组成为体积比(例如正丁醇-冰冰乙酸-水=4:1:1，V/V/V )，或绝对其总量为TLC/HPTLC板的浸入深度约5mm 展开剂需要新鲜配方，不要反复使用多次。 如果需要阶层化，请根据需要进行阶层化，然后取所需的一相(上层或下层)作为备用。 3、一、溶剂选择规则、4、5、2、展开剂的选

2、择条件、1 .对必要的成分有良好的溶解性2 .能够分离成分间3 .被测定成分的Rf在0.2-0.8之间，定量测定在0.3-0.5之间4.3、溶剂极性残奥表、环已烷：-0.2 石油精(类，6090 )、正己烷：0.0、甲苯：2.4、混合二甲苯：2.5、苯：2.7、二氯甲烷：3.1、异丙醇：3.9、正丁醇：3.9 丙酮：5.1、乙腈：5.8、冰乙酸：6.0、水：10.2、7、1 .一般来说，弱极性溶剂体系的基本两相由正己烷和水组成，可根据需要加入甲醇、乙醇、冰乙酸乙酯调节体系极性，达到2 . 中极性的溶剂系由三氯甲烷和水的基本两相组成，用甲醇、乙醇、冰乙酸乙酯等进行调节，适用于蒽醌、陆战队员以及一

3、些极性大的木脂素和萜类化合物的分离。 3 .由强极性溶剂、正丁醇和水组成，并通过甲醇、乙醇、冰乙酸乙基等进行调节，适合分离极性大的生物碱系化合物。8、4、在展开剂的选择、物质分子化学结构中，通常由极性部分和非极性部分两部分组成。 例如，以下将专业摇镜头作为极性小的部分，随着极性化学基部分增加，整体极性增加，展开剂的极性也增加。 9，1 .类极性小的挥发性物质，铁片：石油精(3060 )冰乙酸乙酯(17:3 )厚朴酚：苯冰乙酸乙酯(9:1.5 )丹皮酚：环已烷冰乙酸乙酯(3:1) -香香香拖尾等其他类似相容原则以外的影响10，2 .类极性小的非易失性物质谷甾醇：环已烷冰乙酸乙基甲醇(6:2.5:

4、1 )或环已烷丙酮(5:2 )、熊果酸：甲苯冰乙酸乙基冰冰乙酸(12:4:0.5 )； 齐墩果酸：氯仿甲醇(40:1 )大黄素甲醚：苯乙酸乙基甲醇(15:2:0.2 )或苯基乙醇(8:1 )、丹参a :苯乙酸乙基甲酸(40:25:4 )、内酯：三氯甲烷乙醇(。 结论此类物质展开剂的极性比极性小的挥发性物质的溶出力强。 由于这种物质的极性小，母核大，因此极性大的化学基通常可以形成羧酸、羟基化学基等氢键。 以上物质，母核分子量的减少、母核结构中的不饱和健的增加(特别是苯环的出现)、极性化学基的增加，都使极性增加，展开剂的极性也增加。 的双曲馀弦值。 该范围内物质多，一般展开剂的百分比溶剂可以按照环

5、已烷甲苯混合二甲苯三氯甲烷的顺序根据极性的要求进行选择。在此，异丙醇、正丁醇的极性指数也比较小，该范围的化合物的粘性大，展开慢，因此斑点扩散，此外，羟基化学基的氢键作用力也不利。 调节Rf值的溶剂来自冰乙酸乙基甲醇丙酮乙醇。 挥发性物质也多具有羰基化学基、羟基化学基，从其挥发性可以看出，分子间作用力不强，另外，母核和石油精、生产定额烷烃、苯的结构差异小，容易从硅凝胶吸附脱离，可以预测更快地进入溶剂，没有必要提高展开剂的极性、12，3 .类极性大的小分子有机酸，结论：此类物质多为苯乙烯母核，该结构极性本身较大，又有酚羟基化学基和羧酸化学基，个别有多羟基化学基配体。 皂角苷的展开剂基本相同，极性大

6、。 甲酸通常是浓度85%左右的物质，请注意它含有水。 五倍子酸：三氯甲烷冰乙酸乙酸(5:4:1 )、阿魏酸、咖啡酸、菊苣酸、绿原酸、异绿原酸。 例如，以下将专业摇镜头作为极性小的部分，随着极性化学基部分增加，整体极性增加，展开剂的极性也增加。 桂皮酸、阿魏酸、咖啡酸、菊酸、绿原酸的顺序。 各展开剂为正己烷二乙醚冰冰乙酸(5:5:0.1 )、苯冰冰乙酸甲醇(30:1:3 )、三氯甲烷甲醇甲酸(9:1: 0.5 )、石油精冰乙酸乙基甲酸(3:6: 1 )、13、 4 .类含氮有机物，结论：由于NH2硅烷醇化学基作用较强，在强极性展开剂中加入有机酸、有机碱进行扫尾。 对于极性化合物，使用正丁醇对斑点

7、扩散的影响小，化合物和硅凝胶的作用强。 盐酸黄连素：苯冰乙酸乙基甲醇异丙醇浓阿摩尼亚试验液(12:6:3:3:0.6 ) (阿摩尼亚蒸汽饱和)或正丁醇冰醋酸水(7:1:2 )、麻黄碱：三氯甲烷甲醇浓阿摩尼亚试验液(20:2 )、14、5， TLC的通用发色方法，1、紫外照射法：方便，不破坏样品2 .碘元素蒸气法：通用性高，与紫外法的结合灵敏度比这两种方法高的单独使用3 .荧光试剂：制造荧光背景，鉴别原来紫外下没有荧光物质，进一步明确荧光物质4 .硫酸溶剂、15、6、薄层色谱法和纸色谱分析法操作的注意事项1、点样检查点在薄层板上，一般点、点样地面线距离底边1.01.5cm，点直径一般在2mm以下

8、，点间距离不影响斑点扩散状况为好。 样品溶液过薄，可以重复样品，但请在上次样品的溶剂挥发后重新斯坦共和国定样品，以免样品过大而引起拖尾、扩散等现象，影响分离效果。 检查时要注意不要损伤薄层表面。 16、2、将检查过的样品薄层板放入展开气缸的展开剂中，浸入展开剂的深度最好是距离原点5mm。 密封，展开至规定距离(通常为815cm )，取出薄层板，晾干、检查。 注：展开气缸需要预先用展开剂进行预平衡时，可在气缸中加入适量的展开剂进行密封，保持1530分钟。17、3、显色和检验供试品所含可见光下有色成分可以直接在阳光下检验，可以用喷雾法或浸渍法用适当的显色剂显色或加热显色，在阳光下检验。 有荧光的物

9、质和一部分试剂能激发荧光的物质可以在356nm紫外线灯下观察荧光色谱分析法。 在可见光下为无色，但在紫外光下被吸收的成分可以使用带有荧光剂的硅橡胶板(例如GF254板)，在254nm紫外光下观察荧光板面上的荧光消物质产生的色谱分析法。18、理想的显色希望灵敏度高，斑点的颜色稳定，斑点和背景之间的联托拉斯好，斑点的大小和颜色的深度与物质的量成正比，样品的组成不完全知道的情况下，通用的显色方法特别重要，通常的显色方法主要是：1 .紫外照射法：方法， 与不破坏样品2的紫外法的结合灵敏度比这2法高的3 .单独使用荧光试剂：制作荧光背景，鉴别原来紫外下没有荧光物质，荧光物质更显着的19，4种系展开剂、PE(60-90 )、有etac/acce的EtAc/PE/AcOH 15:5:1，展开剂，20， 展开剂的选择大致原则是，一般对展开的样品有溶解度大的溶剂，极性小的用冰