病原细菌检验基础的知识.ppt

1、医院细菌检查的基础知识天津市动物病预防控制中心郭立里，1。概念上，自然界中有一种叫做微生物的大个体小生物。其中一些对人或动植物有害，会引起传染病，牙齿微生物称为医院微生物。细菌：细菌是单细胞微生物，个人小，需要借助显微镜才能观察。非病原体：无致病性致病菌：条件性致病菌，无条件性致病菌，1。细菌的基本形态和排列1.1细菌的形态：细菌的外部形态比较简单，只有三种茄子主要类型：球形、棒状、螺旋型。因此，将细菌分为球菌、细菌和螺旋杆菌。1.2排列方式：细菌的排列方式由细菌的繁殖决定。细菌的繁殖方式变成简单的裂缝，1变成2个，2变成4个。球菌：大部分球菌为园型，根据分裂方向和分裂后的连接情况，可分为双球

2、菌、链球菌、思氏球菌、八层球菌、葡萄球菌。菌：菌体呈棒状，细菌只有一个分裂方向，可以分为单株、双株和链菌。螺旋杆菌：菌体弯曲或螺旋，两端圆或尖。2 .细菌的大小各种细菌的大小有一定的差异。长度到80微米，短的只有0.2微米。细菌的大小以最合适的温度和在培养基上生长的年轻培养物为基础。培养条件、染色方法、制作方法不同，菌体大小也略有不同。3 .细菌的结构细菌细胞很小，但结构复杂。基本结构：细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核特殊结构：部分细菌有荚、孢子、鞭毛、2。细菌的基本检查技术，1，1.1染色经检查细菌是无色、半透明、单细胞的小个体，折射性弱，在显微镜下只能看到近似的轮廓，在研究细菌形态、排列和结

3、构方面存在一定的困难。为此，在用一些染料将细菌染成不同的颜色后，明确视野显微镜，可以观察细菌的内部、外部结构和特殊结构。简单的染色方法：用一种染料染色，只能观察细菌的形态，但不能识别细菌。鉴别染色法：用两种茄子以上的染料染色鉴别细菌，观察细菌的特殊结构，如革兰氏染色法、抗酸染色法、特殊染色法。1.1.1制作和染色篇无论使用什么染色方法，染色标本的制作过程基本相同。补丁：细菌培养物、体液(脓、血、积液)、组织(心、肝、脾)。干燥：空气中自然干燥固定：加热干燥的薄膜或放入化学试剂固定。固定的目的是杀死细菌，改变对染料的渗透性，使其易于上色。固定原生质体和细胞的其他结构；把细菌固定在幻灯片上染色时不

4、容易洗掉。染色：一般染色，特殊染色，1.1.2注意事项涂抹时要薄。必须自然干燥，不能使用火焰。火焰固定时温度太高，渡边杏。用水冲洗的时候，水不能太大。使用的幻灯片要干净，没有油。用1-2%的盐酸浸泡或酒精棉球擦干净。1.2直接道波经检查主要用于检查细菌的运动力。最常用的是湿偏法，悬挂法。注意：菌液要适量，不能溢出，防止起泡。一般不使用油镜。减少光圈，降低电容器，形成光线暗淡的环境。避免环境污染。2 .细菌的分离培养细菌分离培养是细菌学的重要阶段。真菌培养所需的条件和生长特性也各不相同。在通常的条件下，有生长和繁殖的氧菌和在有氧或无氧环境下都能生长的兼性厌氧菌。无氧环境中也有可以生长的厌氧细菌。

5、少数细菌必须在适量的二氧化碳环境下培养才能生长。细菌分离培养有多种茄子方法，下面重点介绍几种常用的茄子方法。2.1接种方法2.1.1平板线接种法：平板线接种是细菌分离培养的一般技术，主要允许标本或培养物中的混合细菌散布在培养基表面，形成单一菌落。连续下划线分离法：接种环灭菌后，以稍微45度的角度选择组织或菌液，在平板1/5上轻轻涂抹，然后左右前后曲线接种下划线。区域下划线分隔法：接种环在板块内分为5个区域，每个区域烧伤一次。2.1.2斜接种保存株。2.1.3穿刺接种法常用于保存菌种观察动力，进行厌氧培养，也可用于观察细菌对糖类的分解反应。2.1.4版培养法细菌计数。2.2培养法2.2.1一般培

6、养法(也称为氧气培养法)直接安装接种的板块、斜面、液体培养机等3537孵化箱进行培养。2.2.2二氧化碳培养法将一些细菌放置在含有CO2环境的3537中进行培养。2.2.3厌氧培养法厌氧罐法，气囊法，气体喷射法，厌氧培养法。2.3培养基培养基按其形态分为固体、半固态、液体。固体培养基分为平板、斜面、高层。根据用途可以分为基础培养基、菌培养基、选择性培养基、鉴别培养基、厌氧培养基。鲜血阵地培养基，麦康凯阵地培养基，营养阵地培养基，营养肉汤，3。细菌的生化情感细菌在代斯活动过程中进行各种生化反应，这些反应几乎由各种酶系统促进。不同种类的细菌产生的酶类和活性也有差异，因此在代斯过程中，产生降解产物和

7、合成产物的方式各不相同。在细菌学检查工作中，经常利用牙齿特征，用生化方法鉴别细菌，称为生化实验。这种实验在细菌的鉴定中很重要，是最常用的生物化学反应实验。糖发酵实验V-P实验甲基红实验脲酶实验溶血实验血浆凝血酶实验灯，3。药敏实验的基础知识，对细菌抗菌药物的敏感性实验，通常称为细菌药敏实验，是在治疗病禽之前测量细菌对药物的敏感性。对某些细菌药物的敏感度是指抑制牙齿细菌生长所需的最低药物浓度。细菌在体外的敏感度和临床疗效大体一致，但也有不一致者。目前做药敏实验的方法很多，可以概括为两个茄子主要类别：稀释法和扩散法。1 .稀释法将选定的药物稀释到不同的浓度，对检验菌起作用。试管双稀释法固体培养基稀

8、释法，2。扩散法细菌药敏实验的扩散法放置在接种抗菌药的固体培养基(或内部)中，抗菌药通过培养基内扩散抑制敏感细菌的生长，出现抑制菌环(带)。药物扩散的距离越远，到达牙齿距离的药物浓度就越低，因此根据细菌环的大小，可以判断细菌对药物的敏感度。抑菌环(带)边缘的药物含量就是牙齿药的敏感度。牙齿方法操作简单，容易理解，但只用于定性。2.1纸片法将含有一定量抗生素的药敏纸贴在接种细菌的琼脂板上，经过37C培养后，抗生素浓度梯度通过对纸片的分散作用形成，在敏感抗生素的有效范围内，细菌的生长受到抑制，细菌可以在有效范围外生长，因此形成了星形抑制菌环。，2.1.1结果20mm以上选择了极敏，15-20mm苦恼，10-15mm中敏，10mm低敏，0不敏感的2.1.2注意事项特别培养基MHA，否则可以使用鲜血琼脂培养基或营养琼脂培养基。接种细菌的浓度渡边杏太高，接种细菌后2 3分钟贴上药敏纸。培养的温度必须保持不变，培养时间通常为12-24小时。2.2挖洞的方法是在接种细菌的