编写中的规程

1、程序文件的管理和维护1目的：程序文件是指导临床检验活动的法规性文件。本部分确立程序文件的制定、控制和修改的程序，借此保持程序文件的持续适用性和现行有效性。2职责：程序文件由中心实验室负责人主持编写、修订、审核并保持其现行有效性。程序文件由科主任批准和颁布实施，并负责解释。3编制：程序文件由中心实验室负责人主持编写，编写中充分与工作人员讨论，编写成文并校准后交科主任。4发放：程序文件由科主任批准发放。发放和回收要登记签字，收回的旧版程序文件应登记并销毁。保证现场只有唯一的、最新的使用版本。5持有者责任：程序文件属内部文件，由中心实验室负责人保管，不得擅自修改、涂抹，不得遗失、外借和翻印。若意外丢

2、失，应及时报告科主任，并作书面检查，经核实后方可补发。实验室工作人员要认真学习程序文件、了解内容、熟悉其中各项规定，并严格执行。程序文件执行情况纳入实验室目标管理，定期考核，与奖惩挂钩。持有者调离时，要收回该程序文件。6内容：程序文件包括版次、批准页、程序文件的管理和修改、程序文件目录等。7适用范围：安阳市中心血站中心实验室。8修改：科室任何工作人员都可提出对程序文件的修改建议，由中心实验室负责人根据条件变化提出是否修改的决定。文件修改须经有关人员讨论。如果是小的修改，则可在修改页上进行。修改文件经科主任审核批准后填写程序文件修改页。如果文件须作重大修改或小的修改超过十项，中心实验室负责人可进

3、行改版。9新版程序文件经科主任批准后生效，并收回旧版，发出新版，同时登记签字。回收的旧版文件应予以销毁。 人员配置和培训制度1目的：保证实验室工作人员的专业知识及时更新、提高技术水平。2范围：细胞分型工作的检验人员。3职责：中心实验室负责人制定人员在职教育培训计划并组织实施；负责收集资料，建立人员科技档案。4程序：41人员配置：411 干细胞实验室根据工作需要配备足够的工作人员，以保证临床工作的高质量完成和实验室的进一步发展。目前实验室有工作人员2人。以后，视工作量的增加和实验室的发展，应适当增加工作人员。412实验室技术人员上岗必须持有专业技术人员任职资格证书和培训合格证书。42人员的培训：

4、421实验室工作人员每12年至少参加一次干细胞及其相关的继续教育或学术交流会。422视工作或开展新项目情况，选送实验室工作人员到高一级的实验室进修学习。423安排未取得培训合格证的工作人员在适当的时间参加技术培训。424科室每季度组织实验室工作人员干细胞相关知识，提高实验室工作人员的理论水平。每次培训要有记录、有考核。并应将培训时间、参加培训人员、培训内容以及考核成绩收集归档备查。43人员管理：实验室建立实验室人员的科技档案，收集所有技术人员的学历、职称、进修、论文、参加学术会议、从事科研等方面的证件及有关资料，并建立登记表格。实验室记录管理制度1目的：实验室记录是实验室质量证明资料及质量体系

5、运作的重要组成部分，记录必须真实完整地反映进行状态，并进行有效的规范化管理。2范围：记录范围涉及实验室活动的各个环节，与质量体系运行直接相关。主要包括样本信息、试剂采购和配制记录、实验操作记录、仪器使用和仪器维修保养记录、实验室温度和湿度、冰箱温度、室内清洁、抱怨处理、加样器校准、温度计校准、仪器校准、室内质控等记录。3职责：干细胞工作人员应及时完整地填写记录，并保证质量。4程序：41记录的管理411记录含书面记录和电子记录。412书面记录由干细胞实验室负责人每月收集一次，电子记录每周备份一次。413所有的记录和报告都应长期保存，并为被检者保密，不得擅自向任何单位和个人透露。414记录是实验室

6、的资料，不能为个人所有，应统一归档保存。42 记录制度421记录要完整、真实，按各项表格内容认真填写，不能空行，所有记录要有签名。422数据不允许随意更改。若要更改，只许杠改，正确数据在上面，不能使用铅笔和涂改液。更改记录应有更改人签名，注明更改日期。5应用的文件及表格51 接受标本登记表（放在接受标本的区域）52 拒收标本记录表（放在接受标本的区域）53 实验室环境温度、湿度记录表54 冰箱温度记录表55 清洁消毒处理记录本56 SOP文件5.8文件柜的文件及表格包括：SOP文件、实验室工作制度、工作人员档案、人员培训计划及记录表、仪器设备档案、仪器设备保养记录表、仪器设备校准记录表、标本超

7、低温保存记录表、废血标本处理交接表、室间质控记录表、室内质控记录表、应急处理登记表、抱怨记录表、试剂购买记录表。检验报告管理制度1目的：干细胞实验室出具的检验报告是检测结果的正式文件，应具有及时性、准确性。2范围：干细胞实验室临床标本检验报告。3职责：干细胞实验室的工作人员应严格遵守报告管理制度，保证结果及时准确发出。4程序：41干细胞实验室统一制定报告格式，并包括以下信息： A标题 B血清号（样本的唯一性标识）C检测日期 D检测结果F检测方法、计量单位、参考范围 G检测者、审核者的签字42出具的报告应按有关程序规定的时间发出。结论要真实、准确。43临床标本检验报告应经过检测人和审核人签字后发

8、出。44已发出的检测报告中出现检测错误、或需作重大修改、或对报告的有效性发生疑问时，应立即重新进行检测，发出新的报告。不准在原报告书上更改。45如果报告单遗失，可补发报告单，并在报告登记本上登记。登记本应记录血清号、检测日期、补发日期、和补发原因及补发者签名。46传送检验结果报告，按以下程序进行：461需要电话查询结果的，在取样时将电话和查询时间和取报告单凭证留给被检测者。462接到查询电话时，核对姓名、性别年龄和取单凭证的单号，准确无误时方可发出口头结果，同时提醒患者方便时到取单处取报告单结果，实验结果以发出的结果报告单为准。463如患者需要邮寄检测结果，可在接收样本时，提供一份详细通信地址

9、并登记，检测报告以挂号的方式寄出。464一般情况不提供电子、传真报告。仪器设备的管理制度1目的：为保证干细胞实验室的仪器设备得到妥善的管理，确保仪器设备保持在良好的工作状态。2范围：干细胞实验室所有的仪器设备。3职责：实验室操作仪器设备的工作人员应对仪器的使用、保养维修、校准进行全面管理。4程序：41仪器设备的一般情况：名称、制造商、接收日期、接收状态、启用日期、目前放置地点，仪器负责人等，具体见实验室仪器设备一览表。42仪器设备的相关文件：仪器设备的使用说明书，操作手册、保修卡，相关仪器的管理负责人。43仪器设备的损害，故障，修理的结果，记录人员签名，相关仪器的管理负责人签名。44仪器设备的

10、报废由血站统一处理。45干细胞实验室仪器设备实行严格的使用。46使用的仪器设备应定期进行状态校准。47为保证仪器设备工作状态的稳定，应对其进行定期的，必要的维护和保养。48为使扩增仪处于稳定的工作状态，在该仪器所配备的电脑上不得使用非本室的外来软盘，不能在电脑上加载其他程序和软件；使用本室软盘或U盘进行资料备份时，需要先杀毒方可使用。5引用的文件及表格：51实验室仪器设备一览表；52仪器设备标准操作程序；53仪器维护保养程序；54仪器设备故障和维修记录表。仪器设备使用制度1目的：保证仪器设备得到正确的操作使用以满足检测质量要求和延长使用寿命。2范围：干细胞实验室所有的仪器设备。3职责：实验室操

11、作仪器设备的工作人员应严格按仪器使用说明进行操作。4程序：41只有本室工作人员有权使用该实验室的仪器设备。42本室工作人员在使用仪器设备前首先进行岗前培训，熟悉仪器设备标准操作程序，并经室负责人考核认可。43因科研活动的需要，使用本实验室仪器设备的非本室工作人员，必须熟悉仪器设备标准操作程序，并经室负责人考核认可后，在本室工作人员的指导下方可使用。44仪器的使用严格按操作程序进行。45主要仪器使用后应做好使用记录和日常维护。5引用的文件及表格：51仪器使用记录本；52仪器设备标准操作程序；53仪器维护保养程序；连续可调式移液器的操作和校准程序1目的：正确使用移液器，确保移液器加样的精确性和准确

12、性。2适用范围：各种品牌、型号的连续可调式移液器。3操作程序3.1 转动旋钮设定移液量，设定的移液量不可超出该移液器规定的范围。3.2 装上配套的吸头（Tip）。3.3 将按钮压至第一停点位置。3.4 将移液管吸头浸入液面下23mm深处，然后慢慢松开按钮吸入液体。待吸头吸满液体后，将吸头撤出液面，擦掉吸头外侧的所有液滴。3.5 轻轻压下操作按钮至第一停点位置，放出液体。约1秒钟后，继续将操作按钮向下压至第二停点位置。待吸头液体放干净后，将吸头贴在容器瓶壁上防止形成液滴滴入瓶中，撤出吸头。3.6 松开按钮使之回到起点位置。需要时，可更换吸头继续移液操作。4校准方法 连续可调移液器校准由当地计量监

13、督局统一校准，并做好校准记录。5 自校准方法5.1校准环境和用具要求室 温：2025，测定中波动范围不大于0.5。电子天平：放置于无尘和震动影响的台面上，房间尽可能有空调。称量时，为保证天平内的湿度（相对湿度6090），天平内应放置一装有10mL蒸馏水的小烧杯。小烧杯：510mL体积。测定液体：温度为2025的去气双蒸水。选定校准体积：5.1.1拟校准体积；5.1.2移液器标定体积的中间体积。5.1.3最小可调体积（不小于拟定体积的10）。如为固定体积移液器，则只有一种校准体积。5.2校准步骤5.2.1将移液器调至拟校准体积，选择合适的吸头；5.2.2调节好天平；5.2.3来回吸吹蒸馏水3次，

14、以使吸头湿润，用纱布拭干吸头； 5.2.4垂直握住移液器，将吸头浸入液面23mm处，缓慢（13秒）一致地吸取蒸馏水；5.2.5将吸头离开液面，靠在管壁，去掉吸头外部的液体；5.2.6将移液器以30角放入称量烧杯中，缓慢一致地将移液器压至第一档，等待13秒，再压至第二档，使吸头里的液体完全排出；5.2.7记录称量值；5.2.8擦干吸头外面；5.2.9按上步骤称量10次；5.2.10取10次测量值的均值作为最后移液器吸取的蒸馏水重量，按附表1所列蒸馏水Z因子计算体积；5.2.11按校准结果调节移液器。（附表 蒸馏水Z因子 hPa(mbar)）温度（）80085390796010131067201.

15、00261.002710.00271.00281.00291.002920.51.00271.00281.00281.00291.00301.0030211.00281.00291.00301.00301.00311.003121.51.00301.00301.00311.00311.00321.0032221.00311.00311.00321.00321.00331.003322.51.00321.00321.00331.00331.00341.0035231.00331.00331.00341.00351.00351.003623.51.00341.00351.00351.00361.0

16、0361.0037241.00351.00361.00361.00371.00381.003824.51.00371.00371.00381.00381.00411.0039251.00381.00381.00391.00391.00401.00415.3比较校准法利用经计量局校准并颁发校准报告之同型号移液器，在移液器量程范围的高低两个档各选择一个校准点，利用电子天平称量结果与已校准移液器称量结果进行比较，完成校准。离心机的使用、维护和校准的标准操作程序1 目的：保证离心机的正常使用。2 适用范围：适用于本室使用的普通高速离心机3操作3.1使用方法3.1.1普通离心机 4.1.1.1离心机应放

17、置在水平坚固的地板或平台上，并力求使仪器处于水平位置以免离心时造成仪器振荡。4.1.1.2打开电源开关，将预先平衡好的样品对称放置于转头的样品架上，关闭机盖。4.1.1.3旋动定时旋钮设定离心时间，缓慢旋转转速调节旋钮使仪器转速达到预定需要的转速。4.1.1.4离心完毕后，将转速调节旋钮调回零位，关闭电源开关。4.1.1.5待离心机完全停止转动时打开机盖，取出离心样品，再次关闭机盖结束离心。3.2维护保养4.2.1离心机的清洁：为了避免样本等残留物的污染，应经常对离心机外壳和离心室进行清洁处理。对离心室清洁，应先打开离心机盖，拨掉电源线，用专用设备将离心机转头旋下，再用中性去污剂（75%乙醇）

18、清洁离心室；离心室内的橡胶密封圈经去污剂处理后，用水冲洗，再用甘油润滑。4.2.2转头的清洁：转头会被样本残留物污染，也可能会被某些化学试剂腐蚀，因此应对转头每月进行清洁维护。每月用中性的清洁剂清洁转头一次，并在仪器使用记录本上作好记录，以延长转头的寿命。3.3校准每年联系计量局对该类仪器进行定期检修校准。5 应急处理如果离心时发现离心管破裂，必须先停止实验，将破裂管密封放入生物垃圾桶，再用75%酒精进行擦拭消毒，如必要需用移动紫外灯照射30分钟后才能开始实验。注意事项： 1）离心机应始终处于水平位置，与外接电源电压匹配，并要求有良好的接地线。 2）开机前应检查机腔是否有异物掉入。3）样品应预

19、先平衡，使用离心机微量离心时离心套管与样品应同时平衡。4）挥发性或腐蚀性液体离心时，应使用带盖的离心管，并确保液体不外漏以免侵蚀机腔或造成事故。 5）每次操作完毕，应做好使用情况记录，应定期对机器各项性能进行检修。 6）离心过程中若发现异常现象，应立即关闭电源，报请有关技术人员检修。7）定期清洁机腔。8）使用离心机时遵守左右手分开原则，只以右手操作仪器。9）相对离心力于每分钟转速的换算。以往离心机的转速常以每分钟多少转表示，现在常用相对离心力（RCF）表示。两者互换公式如下：N=(RCF105)/(1.18R) RCF=0.011238095RNN表示转速，单位为转/分（r/min）；R表示离

20、心半径，即离心管底端至轴心的距离，单位为厘米（cm）；RCF表示相对离心力，单位用重力加速度g（g9.8m/s）常规仪器设备的使用、操作和维护程序1 目的：正确操作使用仪器设备，确保检测质量，保障仪器设备的使用寿命，充分发挥仪器效益和效率。2 范围：冰箱等。3 使用程序3.1 仪器设备的使用授权：3.1.1仅有本实验室工作人员有权使用实验室的仪器设备。3.1.2仪器设备的使用者在使用前首先必须熟悉仪器设备的操作使用程序并经室主任考核认可。3.2 仪器的使用：3.2.1仪器设备的使用严格管理。3.2.2仪器设备的使用必须严格遵循仪器设备的标准操作规程。3.2.3主要仪器使用时每次工作应有相应的使

21、用记录。4 操作及维护程序4.1 普通冰箱4.2.1 开、关机：试剂冰箱按说明书要求放好后，插上电源线，冷藏室温度开关置于4，2小时后用温度计确认。系统进入正常运行状态后即可正常使用。4.2.2 若冰箱较长时间不用或需要送修时需按以下步骤操作：4.2.2.1关闭冰箱电源，并拔下电源插头。4.2.2.2清空冰箱内的所有贮存物，并妥善放置到其它冰箱内。打开冰箱门，等待冰箱内的霜化完。4.2.2.3用肥皂水擦洗干净冰箱内胆，后用消毒液擦洗一次。4.2.2.4保持冰箱门打开待其自然干燥。4.2.3 冰箱应放置于水平地面并留有一定的散热空间。4.2.4 外接电源电压必须匹配，并要求有良好的接地线。4.2

22、.5 放入冰箱内的所有试剂、样品、质控品等必须密封保存。4.2.6 保持冰箱出水口通畅；非自动除霜冰箱应定期除霜；定期清洁冰箱，清洁时切断电源，用软布蘸水擦拭冰箱内外，必要时可用中性洗涤剂。4.2.7 每日由专人负责观察冰箱内温度并记录于表中，每月一张，一年装订成册存档。4.2.8 若温度超出规定范围，调节温控使其回到正常范围，并进行记录。 4.2.9 若温控调节无效，报请设备科维修，修理后须验收合格并签字后方能正常使用。 MultiSET四色免洗淋巴细胞亚群的相对计数操作规程1、 实验原理：2、 样本要求：样本使用EDTA或肝素抗凝全血，4放置，24小时内处理，处理前充分混匀。3、 主要试剂

23、：（1） 抗体：CD3/CD8/CD45/CD4；CD3/CD16+56/CD45/CD19四色荧光抗体（2） FACS Lysing Solution（溶血素）（10，使用前用蒸馏水稀释成1）4、 样本的处理步骤：（1） 取两只普通上样管，编号A和B（若同时处理多个人的样本应有唯一标示）；（2） 用反向加样法在上样管中分别加入30ul充分混匀的抗凝全血。（3） 取7ul CD3/CD8/CD45/CD4抗体加入到A管中、取7ul CD3/CD16+56/CD45/CD19标记的抗体加入到B中，注意：不要碰到血。漩涡混匀，室温避光放置15-20分钟。（4） 取出分别加入350ul 1FACS溶

24、血素，充分混匀，避光放置15分钟。（5） 24小时内上机，用MultiSET软件获取15000个细胞进行检测，上机前应充分混匀。5、 MultiSET软件的获取分析：（1） 执行FACSCalibur开机程序，进入MultiSET软件。（2） 在出现的“Sign in”窗口中输入操作者姓名、单位、负责人姓名的信息。（3） 进入“Set up”窗口，在“Data Source”对话框中选择“From Cytometer：Acquisition and Analysis”，在“Entry Level File Name Prefix”中选择“Sample name”在“Automatic Savi

25、ng Options”中选择“Data File”、“Laboratory Report”、“Physician Report”，软件会自动生成一个文件，文件的默认路径Facstation G5BD filesMultisetDDMMYY文件夹；可单击“Location”可改变文件保存路径；在出现的新的对话框中指定的文件夹，选好文件夹后，单击对话框底部的“choose”。在“View Reports”中选择“Until NextButton Pressed”。(4)单击“Accept”，进入“FACSComp”窗口，单击“Skip FACSComp”（四色仪器调整FACSComp在检测前单独完

26、成，见FACSComp操作部分）。（5）进入“Test Prefs”，在“Physicians Report Choices”中，这一项可输入TruCount tube的批号和Beads总数（标在包装袋上），单击“Accept”。（6）进入“Samples”窗口，在表格中输入相应的Patient Name、ID、Case Number，在Panel中选择4color TBNK+Truc（7）在窗口最上方的“Cytometer”的下拉菜单中，单击“Instrument Setting”，在出现的新对话框中单击“Open” ；打开此路径下Facstation G5BD filesInstrumen

27、t Setting FilesCalibur.INW文件。调用仪器各个参数的条件，选好后单击“Open”“Set”“Done”；在“Cytometer”中选择“Detectors/Amps”、“Threshold”、“Compensation”、“Staus”，出现相应的四个窗口。（8）然后单击“Run Tests”，上样，单击“Acquire”。在“low” 运行5秒左右，看细胞分布情况。然后，按“HI”键，进行高速获取。（9）获取完成后，可以打开屏幕底部的“manual gate”人工调整各个门的大小，单击“Continue”；打印“Phys Report”。（10）继续其他实验，或单击“

28、Quit”，“Dont Save”，退出MultiSest软件。6、报告结果： 报告绝对值。7、操作过程质量控制：每半年有试剂生产厂家，来站做一次室内质控。8、正常范围参考值：9、临床意义：（1）T、B淋巴细胞亚群是重要的免疫状态检测指标，在肿瘤、免疫缺陷、病毒感染，自身免疫性疾病、创伤、急性感染、多脏器功能衰竭、器官移植等具有临床诊断、病情判断、治疗等价值。临床常用ThTs比值来判断病人的免疫状况。ThTs比值升高：表示免疫功能亢进：见于自身免疫性疾病，如SLE、类风湿性关节炎、自身免疫性溶血性贫血、重症肌无力以及HBsAg+乙肝等。ThTs比值减低：表示免疫功能下降：艾滋病、病毒感染、肿瘤

29、病人、慢活肝和活动性肝硬化、再生障碍性贫血、粒细胞减少患者。（2）NK细胞主要破坏各种肿瘤细胞和感染某些病毒、细菌的细胞，所以在抗肿瘤和防御疾病中起主要作用。NK活性减低主要见于各种恶性肿瘤、自身免疫性疾病、病毒感染、应用免疫抑制剂，疲劳综合征病人等，NK活性随年龄增长而减退。NK细胞也参与第二型超敏反应和移植物抗宿反应，白介素-2治疗后；外周血NK细胞增加。10、报告发放步骤：（1）双击打开桌面上“FACStation”图标；（2）双击打开“BD Files”文件夹；（3）双击打开“MultoSET Files”文件夹；（4）打开最新建的文件夹；（5）打开后缀为“.lab”的实验室报告，分析

30、实验结果；（6）打开后缀为“.phy”的医生报告，分析试验结果；（7）桌面上的“原始1.docx”文档复制到最新建的文件夹中；（8）重命名为“.docx”，并把医生报告有用信息复制到“.docx”；（9）进行报告的信息补充，如患者信息、试验结果、报告人签名、审核人签名、报告日期及联系电话等；（10）点击“save”进行保存；（11）点击“Print”进行打印，报告完成。HLA-B27分析操作规程1、实验原理：2、样本要求：样本使用EDTA抗凝全血，4放置，24小时内处理，处理前充分混匀。3、主要试剂：（1）HLA-27试剂盒包括抗体试剂A，10溶血素试剂B，微球试剂C；（2）抗凝全血；4、样本

31、的处理（1）在试管上对应每一个样本作好识别标志（每个样本一个试管）；（2）用微量移液器加10ul抗体到试管中；（3）用小心地将40ul充分混匀的抗凝全血加到进样管的底部，确保WBC的浓度在3.51039.4103/ul之间，低速混匀3秒钟，室温避光静置1520分钟；静止时避免样本直接光照。（4）将10溶血素用蒸馏水稀释成1，每管中加入1.5ml室温的1溶血素，立即低速离心，避光室温静置10分钟，不要超过12分钟，以免破环白细胞。（5）随后室温300g离心5分钟；（6）弃去上清液，留大约50ul液体于试管中以免损伤细胞团；（7）低速混匀，重悬细胞，加入2ml鞘液，低速混匀，室温300g离心5分钟

32、；（8）弃去上清液，留大约50ul液体于试管中以免损伤细胞团；（9）低速混匀，重悬细胞，加入2ml鞘液，低速混匀，室温300g离心5分钟；（10）重复8、9步骤；（11）低速混匀，加1ml鞘液，低速混匀，准备上机操作。5、HLA-27电脑软件的操作程序（1）打开仪器和电脑（见开机程序），预热1015分钟后进行操作；（2）执行FACSCalibur开机程序，进入HLA-B27软件；（3）在出现的“sign in”窗口中输入操作者姓名、单位、实验室负责人姓名等相关信息，单击“Accept”，计算机将保存这些信息；（4）进入“Set up”窗口，首先“Data Source”对话框中选择“From

33、Cytometer”，并输入“15000”。然后在：a、“File name prefix”中选择“Patient name”；b、在“Automatic Saving Options”中选择“Data File”、“Laboratory Report”，软件会自动生成一个文件，文件的默认路径Facstation G5BD filesHLA-27DDMMYY文件夹；c、单击“Location”可改变文件保存路径，在出现的新的对话框中指定的文件夹，选好文件夹后，单击对话框底部的“chose”（此步骤为可选项）；d、在“View Reports”中选择“UntilNextButton Presse

34、d”，最后单击“Accept”。（5）进入“FACSComp”窗口，在这里可以进入FACSComp软件，做HLA-B27beads的调试，如果之前做了就单击“Skip FACSComp”；（6）进入“Patients”窗口，在表格中输入相应的Patient Name、ID、Case Number；（7）然后单击“Run”，单击“Acquire”，不要调节仪器设置，仪器会自动调出条件。获取完成后打印Laboratory Report；（8）如果要继续检测单击“More tests”，如果退出单击“QUIT”-“Dont save”（9）退出软件，按每日关机程序清洗仪器，关机。6、报告结果：7、操

35、作过程质量控制：8、正常范围参考值：9、临床意义：分析HLA抗原表达情况不仅有助于了解发病机理，对于疾病的诊断、预防和预后判断都有重要意义。HLA-B27基因属于I型MHC基因，基因表达在机体中所有含核细胞上，尤其是淋巴细胞的表面有丰富的含量。a、 HLA-B27抗原的表达与强直性脊椎炎有高度的相关性，超过90的强直性脊椎炎患者其HLA-B27抗原表达为阳性。b、 Reiters综合症，HLA-B27阳性率为7090。c、 银屑病性关节炎，HLA-B27阳性率为5060。d、 葡萄膜炎（眼色素层炎），HLA-B27阳性率4050。e、 溃疡性结肠炎伴有关节病，HLA-B27阳性率为510。10

36、、HLA-B27报告的发放：（1）双击打开桌面上“FACStation”图标；（2）双击打开“BD Files”文件夹；（3）双击打开“HLA-B27 Files”；（4）FACSCalibur的日常维护FACSCalibur的设计将仪器的维护工作减至最少，但是，为了保证仪器的正常运转和测定结果的可靠，仍需要进行一些必要的常规维护。1、清洗液的选择a、FACS Clean Fluid：流式细胞仪的常规清洗液，直接使用，可有效去除仪器管路内的样本、染料等造成的污染。b、漂白剂NaClO溶液：流式细胞仪的常规清洗用液。目前市场上的漂白剂有效氯浓度多为5-10.0.45um滤膜过滤后备用。c、FAC

37、S Rinse Fliud：流式细胞仪的清洗液，直接使用，可有效去除仪器管路内积聚的蛋白成分。d、表面活性剂Trion等：使用浓度约为1，0.45um滤膜过滤后备用。使用表面活性剂时，注意上样管中不要加满，也不要反冲，防止操作不当造成液体进入管路，或进入压力控制器。e、蛋白酶液：测定血样以后，可以使用蛋白酶液清洗上样管，有效去除加样针、流动池中附着的蛋白成分。0.45um滤膜过滤后备用。f、蒸馏水：为了防止管路内残留有清洗液，形成结晶或造成管路接口的腐蚀，在使用清洗液清洗完毕后，一定要用蒸馏水，再次冲洗管路。0.45um滤膜过滤后备用。2、每日维护实验结束后，请于关机前清洁加样针的外管和内管，

38、防止加样针堵塞或有染料残留。在使用一些荧光染（如PI、AO、TO等）后，也需要立即进行加样针的清洁。a、 准备一只上样管，加入3ml漂白剂（可以直接使用过滤后未稀释的漂白剂）；另一只上样管，加入3ml蒸馏水。b、 打开支持臂，放好有漂白剂的上样管。c、 加样针外管跑1ml。d、 流速选择HI档，合上支撑臂，加样针内管跑10分钟。e、 取下有漂白剂的上样管，换上有蒸馏水的上样管。f、 打开支持臂，加样针外管跑1ml。g、 流速选择HI档，合上支撑臂，加样针内管跑15分钟。h、 按下STANDBY按钮。i、 检查上样管内剩余的蒸馏水，应不超过1ml。j、 关机以后，有蒸馏水的上样管应保持原位，防止加样针有结晶生成。有时某些样本中含有大量蛋白成分，这些蛋白成分在上样针中会有残留，如果不能有效去除这些成分，积聚过多，会影响实验检测。这是应在处理完含有蛋白成分的样本后，使用含有去蛋白成分的洗液清洗加样针（步骤如上）。每月维护流式细胞仪使用一段时间后