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文档简介
1、,血清传染病 检测与报告解释,乙肝血清标志物检测,3,HBsAg清除和血清学转换是理想的治疗终点,持久免疫控制是达到HBsAg清除的重要条件,HBsAg下降 HBVDNA抑制,治疗中,持久免疫控制,HBsAg清除,减少肝硬化和肝癌,提高存活率,4,HBsAg清除和血清学转换是理想的治疗终点,HBsAg血清转换可作为持久免疫控制指标,即使使用高敏度试剂测不到HBVDNA 并不表示无循环的HBV和/或HBV感染已清除,时点评价病毒载量可作为 抗病毒治疗有效和持续应答,HBsAg定量检测可确定宿主免疫 系统是否已有效控制HBV感染,5,HBsAg测定中可能存在的挑战:假阴性,HBsAg含量低于所用方
2、法的测定下限之下。如感染的“窗口期”、急性期后或恢复期、自限性感染末期的携带者等 编码HBsAg的HBV-S基因的突变 HCV/HDV重叠感染对HBV复制和/或HBsAg的表达的抑制作用 测定方法所用抗体对HBV不同基因型检测敏感性的不同 钩状效应(HOOK EFFECT),6,HBsAg的变异所致的不常见的HBV标志物模式或不一致的结果,单独抗HBc阳性。 HBsAg阴性但HBeAg阳性。 HBsAg(HBeAg)和抗HBs(大多为100IU/ml的低滴度)同时存在。 使用不同厂家的HBsAg试剂盒得到的不一致结果。,7,常见乙肝病毒标志物检测模式,8,常见乙肝病毒标志物检测模式,9,如何正
3、确地理解和应用乙肝血清学标志物检测结果:,对检验结果不应是固定的静止的去看待,应以动态的纵向的和横向的方式去看。 作为一个特定的HBV感染者,某一次检测乙肝“两对半”,什么样的模式组合都有可能出现。出现某种罕见模式,既可能是由于患者感染后的免疫状态的反映,也可能是标本中的干扰因素所致的假阳性或假阴性,或实验室不可知原因的检测错误。,梅毒实验室诊断,血清学检测法,黑龙江省性病防治中心,快速血浆反应素(RPR)环状卡片试验,结果判读: 凝集反应强度分级: 3 4:圆圈内出现中到大的黑色絮状物, 液体清亮 2:圆圈内出现小到中的黑色絮状物, 液体较清亮 1:圆圈内出现小的黑色絮状物,液体 混浊 :圆
4、圈内仅见碳颗粒集于中央一点或 均匀分散,黑龙江省性病防治中心,血清学检测法,非梅毒螺旋体抗原血清学试验特点,前带现象 指非梅毒螺旋体抗原血清试验中,有时血清中存在高浓度的抗体时出现的弱阳性、不典型或阴性反应的结果,而临床表现象二期梅毒,此时将血清稀释后再进行试验,出现了阳性结果,该现象称为前带现象。,非梅毒螺旋体抗原血清学试验特点,耐血清性(血清固定) 指经抗梅毒治疗后,非梅毒螺旋体抗原血清试验在一定时期内不阴转。早期的耐血清性常与治疗量不足或不规则治疗、复发、再感染或有神经系统梅毒等因素有关。,梅毒螺旋体抗原血清试验,梅毒螺旋体抗原血清试验是以梅毒螺旋体为抗原的特异性的抗原抗体反应,用以检测
5、梅毒抗体。常用的方法有: 梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA) 梅毒螺旋体血球凝集试验(TPHA) 梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验(TP-ELISA) 荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS) 梅毒螺旋体蛋白印迹试验(TP-WB)等,黑龙江省性病防治中心,血清学检测法,梅毒血清学试验结果的临床意义总汇,TRUST TPPA 意义 RPR TP-ELISA VDRL TPHA _ _ 排除梅毒 一期梅毒的早期 + + 现症梅毒(梅毒孕妇所生 的婴儿除外) + - 生物学假阳性 - + 早期梅毒或经治疗后,血清学检测法,黑龙江省性病防治中心,快速免疫层析法,利用免疫层析原理,采用吸附有显色标记的
6、梅毒螺旋体重组抗原的滤纸条,快速检测标本中的梅毒螺旋体抗体。 可以用于标本的快速筛查。检测阳性不能区分既往感染和现症感染,应结合非梅毒螺旋体抗原血清试验(如TRUST等)结果进行诊断。,黑龙江省性病防治中心,血清学检测法,胎传梅毒的实验诊断,具有下列实验室四个指标之一,可确诊为 胎传梅毒: 暗视野检查梅毒螺旋体阳性; 患儿非梅毒螺旋体血清抗体滴度持续上升; 患儿非梅毒螺旋体血清学定量试验结果比母亲高4倍(低于或等于该值并不排除胎传梅毒); 患儿检出19S-IgM抗体。,黑龙江省性病防治中心,血清学检测法,生物学假阳性(BFP),分为两组:,生物学假阳性(BFP),分为两组: (1) 急性BFP
7、 抗体效价一般不超过1:8, 在数周至6个月内转阴性。此种发生率极低, 多见于急性感染,如肺炎、亚急性心内膜炎、 风疹、水痘、传单等。,生物学假阳性(BFP),分为两组: (2) 慢性BFP 血清反应素阳性能持续数月或数年甚至终身。如麻风和药物成瘾者阳性可达20%。有报告称慢性BFP见于多种自身抗体存在的胶原病和自身免疫性疾病。常见的有SLE、类风湿关节炎、风湿性心脏病、麻风、肝硬化、自身免疫性溶血性贫血、多发性结节性动脉炎、桥本甲状腺炎伴甲状腺毒症、干燥综合征、慢性肾炎和系统性硬化症等。,故作梅毒诊断尚需结合临床症状。 甚至健康人群也可能有小于1%的BFP。 原因不祥,可能与潜伏的疾病有关。
8、,艾滋病感染实验室检测,HIV相关检测目的,1.临床诊断 2.安全输血 3.流行病学调查、高危人群监测 4.自愿咨询检测VCT 5.抗病毒治疗后效果检测 6.抗病毒治疗耐药性检测 7.免疫功能测定,HIV感染的实验室检测方法,常用HIV抗体检测方法: 初筛:1.酶联免疫吸附法 ELISA 2.快速检测 RT:免疫渗滤层析(金标、硒标) 3.简单法 PA: 明胶颗粒凝集 4.化学发光免疫测定 确证:免疫印迹法 WB:(Western Blot)、RIBA 常用HIV病原学检测方法: 1. 核酸检测( cDNA测定-PCR、 RNA测定-病毒载量) 2. 病毒培养分离 3. P24抗原检测 其他相
9、关检测方法: 免疫功能测定:CD4/CD8检测,快速检测的影响因素, 检测的目的 实验的敏感性和特异性 受检测人群的HIV的流行率,HIV抗体检测经典程序 初筛+确认 ( ELISA+WB ),HIV检测策略,检测顺序: 首先应选择最敏感的实验 第二次实验应该采用更特异的实验,HIV感染测定结果的解释,机体感染HIV后,血液中最早可检出的是病毒的RNA,大约在感染后的平均59天即可检出,约16天可检出P24抗原,约22天出现可检出的抗体。 针对p24和病毒表面蛋白(尤其是gp160和gp41)为机体内最早出现的HIV抗体,目前商品ELISA试剂盒所测定的基本均为这种抗体。 在感染初期,即抗体出
10、现之前,外周血循环中病毒核酸的含量最高,可达到106 IU/ml以上,出现抗体后,HIV RNA水平即下降,一般在104 IU/ml。,检测结果的报告和处理,1、HIV抗体筛查 筛查试验呈阴性反应出具HIV抗体阴性报告。 筛查试验呈阳性反应,可出具“HIV抗体待复查”报告,不能出阳性报告。同时应尽快进行以下处理: (1)认真核对病人身份,填写HIV抗体复查送检单,检测人和审核人签字。 (2)尽可能重新采集受检者的血样。 (3)将二份血样(或仅原血样)连同HIV抗体复查送检单一并送当地艾滋病筛查中心实验室或直接送确认实验室确认。 (4)做好检测后咨询。,快速检测的影响因素,丙型病毒性肝炎,.,.
11、HBV与HCV重叠感染 由于HCV与HBV有相似的传播途径, 因此同时感染这两种病毒的可能性是存在的, 但更多见的是在HBV持续性感染的基础上又感染了HCV,HCV感染与肝细胞性肝癌(HCC) HCV感染与HCC的关系日益受到重视, 从HCV感染发展到HCC平均约25年, 也可不通过肝硬化而直接由慢性肝炎发展而来。,HCV RNA检测 HCV RNA检测可直观地反映病毒的存在, HCV RNA阳性即表示机体内存在HCV, 而且HCV RNA最早可于暴露后2周检出, 而抗-HCV直到812周才能检出, 因此可减少抗-HCV“窗口期”造成的漏检。,抗-HCV和HCV RNA检测的意义 抗-HCV和
12、HCV RNA检测结果可出现以下四种模式, 需要进行认真分析以明确其诊断意义。 AASLD指南指出: 1、HCV RNA及抗-HCV均为阳性并伴近期ALT升高 存在以下三种可能:结合近期高危暴露史,考虑 是否为急性HCV感染; 慢性HCV感染急性加重; 合并其他病原体导致急性肝炎的慢性HCV感染。,2、抗-HCV阳性而HCV RNA阴性提示: HCV感染痊愈; 急性HCV感染后HCV RNA的清除期; 假阳性或假阴性结果;此时,建议 46个月后再行HCV RNA检测以明确诊断。,3、抗HCV阴性而HCV RNA阳性, 提示为抗体产生之前的急性感染早期 或免疫抑制患者慢性HCV感染, 也有可能为HCV RNA假阳性结果, 建议46个月后复查抗HCV和HCV RNA。,4患者ALT升高而抗HCV及HCV RNA均为阴性, 考虑可除外急性或慢性丙型肝炎诊断。 推荐46个月后复查抗-HCV。 需要说明是,
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