流式细胞术在白血病中的应用

1、在白血病/淋巴瘤分类及监测中应用流式细胞术，第二，世界卫生组织血液肿瘤分类方案(1999年)，“新分类方案的基本原则是结合形态学、免疫表型、遗传变化和临床特征，确认疾病的真正本质”。“将为世界各国的肿瘤学家和病理学家提供新的有趣的合作交流新的篇章，极大地促进对血液肿瘤的治疗和认识。”(美国临床肿瘤协会，临床肿瘤杂志第17卷3835-3849页，1999年)更重要的是，提供了疾病分类和治疗选择及预后判断的明确联系，开启了血液肿瘤针对性治疗和个人化方案的新时代。3，白血病分子诊断的意义，系统诊断，白血病初发，异常标记，5，6，investigative tools for MM diagnosis

2、 and management(2008 ash education program book p298)patient evaluation诊断单克隆蛋白数和特征血清总蛋白本周生化检查：血清肌酐和骨钙测定预后评估球蛋白、-2肌球蛋白、LDH、CRP骨髓细胞遗传学和FISH t(4；14)、t(14)；16)，特定患者16)，del 17p的特殊研究，7，现有流式细胞术的林爽应用细胞数：CD4，CD34 DNA含量：多重引流，S期结果数据，准确度依赖于良好的质量管理，现有流式细胞术在白血病免疫型中“白血病表型”阳性率大部分细胞是由临床医生用肿瘤细胞形态/细胞化学后的确认数据判断的，高分辨率流式

3、细胞的优点是基于多参数正常抗原表达，原发性诊断和鉴别诊断的病理报告，用于疾病分期，治疗选择疗效监测，预后判断，流式细胞术，8，骨髓-异质性系统的应用，再利兹Lymphocyte (T B)9，应该使用什么抗体？所有抗体必须是标准商业化试剂。“秘密武器”或特殊抗体抗体的联合应用可以从有限样本中获得最大限度的信息量，通过对正常抗原表达的正确认识，有效地鉴别与疾病状态相关的变化。10、高分子类细胞术可以识别和分类所有骨髓细胞。(威廉莎士比亚，美国电视电视剧，健康)对每个细胞进行多特征检查，将相应的系列和成熟阶段分类，至少可以检测1万个细胞。分辨率为0.5 %、11，12、CD45/SS、Wood (

4、2004)方法单元753360559-576、13、正常粒子成熟模式、正常BHCL，27，大型b细胞淋巴瘤，28，mm，29，t-all，30，NK-lgl，有助于细分亚型。更准确的原始细胞识别和定量有助于预后判断后的监测。35、免疫表型分析和FAB型徐璐根据其他参数对白血病分类，结果可能一致或不一致。免疫表型分析对部分病例，尤其是骨髓系白血病亚型不寻常。在复杂的案例中，应结合各种检查，如特异性染色体核型分析和融合基因综合判断。36，MRD背景，现在多种化疗药物的结合，使大部分白血病患者获得形态完全缓解(CR)。但是大部分患者不能保持器官缓解，仍然有相当多的患者复发。复发的主要原因是患者体内有

5、少量的形态难以识别的残留白血病细胞。如果能准确检测患者体内残留的白血病状态，可以射一些箭进行治疗，避免很多不必要的痛苦。37，MRD，outline of leuke mic diagnosis，morphology : 1-5%，cyto genetics 3360 1-5%，flow cytometry 330 新的抗逆转录或治疗结果评价，40，MRD和预后，残留白血病细胞10-2，3年复发率为76-94% 10-3残留白血病细胞10-2，3年复发率为37-53%残留白血病细胞10-3，3 评价这些方法的效果和应用性主要基于牙齿方法的特异性、敏感性、简洁性、重复性和速度。FCM免疫表型，F

6、CM DNA配体，PCR，FISH是好方法。42、MRD流式分析原则，在违反正常分化模式诊断的情况下，识别出偏离正常发育阶段的免疫表型相对不寻常的抗原组合，识别出不同于正常免疫表型的不连续群体，诊断出的免疫表型为起点，43、免疫表型异常适合MRD检查。ALL 95%儿童ALL 90-95%成人ALL AML 85%儿童AML 80-95%成人AML，44%，报告模板，45，案例1 AML，案例资料：女性，3岁，2009.6淋巴细胞比例下降。提示：急性髓系细胞白血病(AML-M2可能)。基因：AML1/ETO阳性。46，病例1(继续1)，2009.7化学疗法D33: FCM:可见残留物，CD33

7、 CD19细胞约占0.04%。基因：AML1/ETO阳性。47，2009.9d70: FCM:渡边杏了。基因：AML1/ETO语音。2010.3 D245: FCM:免疫表型没有明显异常的细胞。基因：AML1/ETO语音。案例1(继续2)，48，案例2B-all，案例资料：男性，3岁，2007.3秒FCM印象：CD45/SSC粘度中的门分析设置，CD45弱表达分布区域中的异常细胞群，核细胞约45提示基因：BCR/ABL语音。49，2008.11化学疗法20个月：FCM:没有明显表型异常的残留白血病细胞。(没有图片)基因：渡边杏了。2009.09化学疗法30个月：FCM:可见残留物，CD45dim/-地区约1.87%的CD10 CD19 CD20-细胞约1.55%的HLA-DR CD19 CD34细胞被认为是残留白血病细胞。(见右)基因：渡边杏了。病例2(继续1)，50，病例2(继续2)，2010.03化学疗法DC-CIK 36个月：FCM印象：CD10提示：与病史一起考虑急性B淋巴细胞白血病(一般型B-ALL)复发。基因：ALL基因检测呈TSL/ERG阳性，其余为阴性。，51，病例3 T-ALL，病例资料：女性，3岁，2008.10秒发FCM印象：在CD33/SSC粘度方面，门分析，在远视细胞分布领域可见异常细胞群，占核细胞约59%，淋巴细胞和边界不清楚。提示：急性t淋巴细胞