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文档简介

1、一、蛋白质的概念和生物学意义 二、氨基酸 1、氨基酸的基本结构和性质 2、根据R基团极性对20种蛋白质氨基酸的分类及三字符缩写 三、蛋白质的结构与功能 1、肽的概念及理化性质 2、蛋白质的初级结构 3、蛋白质的高级结构(二级结构、超二级结构和结构域、三级结构、四级结构) 4、蛋白质的结构与功能的关系,四、蛋白质的理化性质 1、蛋白质的相对分子质量 2、蛋白质的两性电离及等电点 3、蛋白质的胶体性质 4、蛋白质的紫外吸收特征 5、蛋白质的变性及复性 五、蛋白质的分离与纯化 1、蛋白质的抽提原理及方法 2、蛋白质分离与纯化的主要方法:电泳、层析和离心 3、蛋白质的定量方法,1,下列氨基酸中,aTD

2、=0的是: A Gln B Glu C Gly D Ile (2009) 2,由360个氨基酸残基形成的典型螺旋,其螺旋长度是 A.54nm B.36nm C.34nm D.15nm (2008),简述蛋白质的一级结构及其与生物进化的关系。(2008),请写出凯氏定氮法测定蛋白质含量的基本原理,并简单说明在蛋白样品中加入一定量的三聚氰胺(分子式C3H6N6)为什么会导致样品测定值高于实际值的原因。(9分),1. 蛋白质在波长为 nm的紫外光中有明显的吸收峰,这是由 、 和 三种氨基酸残基所引起的。 2. Glu的pK1(a-COOH)=2.19、pK2(R基团)=4.25、pK3(a-NH3+

3、) = 9.67,该氨基酸的pI值为 。 3. 有一混合蛋白样品,含A、B、C、D四种蛋白质,其pI分别为4.9、5.2、6.6和7.8,若将此样品液置于pH7.0的缓冲液中电泳,向阴极移动的有 。,4. 在组成蛋白质的二十种氨基酸中, 是亚氨基酸,当它在a-螺旋行进中出现时,可使螺旋 。 5. Lys的a-COOH、a-NH3+ 的pK值分别为2.18和8.95,该氨基酸的pI值为9.74,则R基团的pK值为 ,它是由 基团的解离引起的。,6,某蛋白质的某一区段含有15个氨基酸残基,这些残基之间均可形成如下图所示的氢键。 (1) 该区段具有 的二级结构,它的长度为 纳米。 (2) 该区段的主

4、链中可形成 个氢键。 (3) 已知该区段被包埋在整个蛋白质分子的内部,则这一区段很可能含有较多的 氨基酸。,二、 选择题 1. 在下列肽链主干原子排列中,哪个符合肽键的结构(A)CNNC (B)CCCN (C)NCCC(D)CCNC (E)COCN 2. 下列什么氨基酸溶液不使偏振光发生旋转(A)Ala (B)Gly (C)Leu (D)Ser (E)Val 3. 下列AA中,蛋白质内所没有的是 (A)高半胱氨酸 (B)半胱氨酸 (C)鸟氨酸 (D瓜氨酸 4. 蛋白质变性不包括 (A) 肽链断裂 (B) 离子键断裂 (C) 疏水键断裂 (D) 氢键断裂,5. 下列氨基酸中,在波长280 nm处

5、紫外吸收值最高的氨基酸是 (A) Lys (B) Cys (C) Thr (D) Trp 6. 维持蛋白质二级结构的作用力是 肽键 (B) 离子键 (C) 疏水键 (D) 氢键 (E) 二硫键 7. 蛋白质肽链在形成-螺旋时,遇到Pro残基时,-螺旋就会中断而拐弯,主要是因为, (A) 没有多余的氢形成氢键 (B) 不能形成所需的角 (C) R基团电荷不合适 (D) 整个-螺旋不稳定,8.蛋白质的空间构象主要取决于下列哪项() A.多肽链中的氨基酸排列顺序B.次级键 C.链内及链间的二硫键D.温度及pH 9.加入哪种试剂不会导致蛋白质变性() A. 尿素 B.盐酸胍 C.SDS D.硫酸铵 E

6、.二氧化汞 10.下列哪种氨基酸在生理pH范围内具有缓冲能力() A.赖氨酸B.谷氨酸C.丝氨酸D.组氨酸E.苏氨酸,有一混合液含有五种多肽(P1、P2、P3、P4和P5),在pH8.0的条件下进行电泳分离,已知这五种多肽的PI 分别是P1为8.8,P2为5.5,P3为10.5,P4为7.3,P5为6.3,并且它们的相对分子质量都大约为1000,问: 1, 什么是多肽的PI,其大小和什么有关? 2,若电泳染色结果如下图所示,请在图上1、2、3、4、5处标出每条带所对应的多肽。 3,另有一多肽(P6),PI为10.5,相对分子质量约为500,P6若与上述五种多肽在pH8.0一起电泳,请指出它在电

7、泳结束后的大概位置。 起点 1 2 3 4 5,从蛋白质的一级结构可预测它的高级结构。下面是一段肽链的氨基酸排列顺序:“Leu-Ala-His-Thr-Tyr-Gly-Pro-Phe-Gln-Ala-Ala-Met-Cys-Lys-Trp-Glu-Ala-Gln-Pro-Asp-Gly-Met-Glu-Cys-Ala-Phe-His-Arg”,问: 1, 你认为此段肽链何处会出现转角结构? 2, 何处可形成链内二硫键? 3, 假定这段肽链是是一个大的球蛋白分子的一部分结构,请指出Asp、Gln、Glu、Ala、Leu、Lys氨基酸残基可能在蛋白质分子的表面还是内部?,什么是蛋白质的空间结构?蛋

8、白质的空间结构与其生物学活性有何关系? 举例说明蛋白质的结构与其功能之间的关系。 什么是蛋白质的变性和复性作用?蛋白质变性后有哪些性质会发生变化? 简述蛋白质变性的机制。,.蛋白质分子中原子和基团在三维空间的排列、分布及肽链走向。结构决定功能,结构与功能相适应。 蛋白质的一级结构决定高级结构,高级结构决定其生物学功能,特定的蛋白结构是实现其功能的基础。举例 :血红蛋白的变构现象 变性、复性的定义。变性后的变化:生物活性丧失,理化性质的变化(溶解度、粘度、光学性质等),生物化学性质的改变(结构松散、易被酶解)。 维持蛋白质空间构象稳定的是次级键,和二硫键的一些作用,当某些因素破坏这些作用力时,蛋

9、白空间构像遭破坏,引起变性。,胃液pH1.5的胃蛋白酶的等电点约为1.远比其他蛋白质低。试问等电点如此低的胃蛋白酶必须存在大量的什么样的官能团,什么样的氨基酸能提供这样的基团? -COO-;Asp ,Glu,扼要解释为什么大多数球蛋白在溶液中具有下列性质。 在低pH时沉淀。 在离子强度从零逐渐增加时,其溶解度开始增加,然后下降,最后出现沉淀。 在一定的离子强度下,达到等电点pH时,变现最小的溶解度。 加热时沉淀。 加入一种与水混容的非极性溶剂减小其介质的介电常数,而导致溶解度的减小。,(1)低pH,蛋白质带大量正电荷,分子内正电荷相斥使蛋白变性,内部疏水基团暴露使蛋白质溶解度降低,沉淀。(2)加少量盐有利于稳定带电基团,增加蛋白质溶解度,盐浓度增大则盐离子夺取与蛋白结合的水分子,降低蛋白的水合度,使蛋白沉淀。 (3)等电点是,蛋白分子间静电斥力最小,溶解度小。 (4)加热是蛋白质变性,内部疏水基团暴露,溶解度降低,沉淀。 (5)非极性溶剂减少了表面极性基团的溶剂化作用,使

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