2017-2018学年高中生物第一章无茵操作技术实践第二节植物组织培养技术教案苏教版选修1

1、第三节植物组织培养技术1.简述了植物组织培养的原理和过程。(严重困难点)2.了解MS基本培养基储液的赵霁方法。(重点)3.举例说明使用的激素和脱分化，再分化的作用。(困难)植物组织培养和过程1.植物组织培养(1)概念：在无菌和人工控制条件下诱导离体植物器官、组织等，在适当的培养条件下发展成完整植物的技术。(2)原理：植物细胞的多能性是指植物体中的每个体细胞都有来自受精卵的完整基因组，具有发展成为完整植物的潜力。2.植物组织培养过程(1)去分化：在已经分化的植物细胞或组织中产生愈伤组织的过程。(2)再分化：在一定条件下继续培养脱分化的愈伤组织，可以重新柔道根、芽等器官的分化。合作讨论1:同一植物

2、不同部位的细胞培养所得的愈伤组织基因组成是否一定相同？提示：不一定一样。取花粉是通过减数分裂形成的，得到的愈伤组织染色体数目是体细胞的一半，因此与体细胞形成的愈伤组织基因构成不同。2:与微生物培养基配方相比，MS培养基配方有什么不同？提示：微生物培养基主要是有机营养。MS培养基需要提供大量的无机营养，主要包括植物生长所需的大量元素和微量元素两种茄子主要种类。3:长期种植土豆会减少产量，容易感染病毒。要提高土豆的产量，应该如何培养没有病毒的土豆？提示：长期无性繁殖的植物在根端和茎端几乎没有病毒，因此利用土豆的茎端或根端，通过植物组织培养，可以获得没有病毒的马铃薯植物。事故升华1.植物组织培养过程

3、离子植物组织、器官或细胞(外植体)伤害组织根、芽或胚胎。新对象。(1)愈伤组织与根尖分裂组织的异同：组织类型细胞酱料细胞形态细胞结构细胞排列细胞去向根尖分生组织受精卵正方形没有液泡致密分化多种茄子细腻度细胞组织治愈伤口组织高程点化学细胞无定形高度液态饱和疏松的再分化做成新的身体相同点细胞增殖是通过有丝分裂实现的。(2)植物组织培养过程中脱分化和再分化的比较：课程特征条件脱分化外植体成为愈伤组织疏松，高度液化的薄壁细胞团排列。离子、营养素、植物激素、其他适当条件再分化从愈伤组织到幼苗或胚胎结构根、芽或根发芽能力生长素和细胞分裂素的使用顺序和比例比较(1)使用顺序比较使用顺序实验结果先使用生长素，

4、然后使用细胞分裂剂有利于细胞分裂，但细胞不会分化首先使用细胞分裂素，然后使用生长素细胞既分裂又分化并发使用分化频率提高(2)使用比率比较使用的数量和百分比实验结果比例适当促进愈伤组织的生长生长素细胞分裂素有利于根的形成生长素细胞分裂素有利于幼苗的形成1.植物组织培养过程中生长素和细胞分裂素的使用影响实验结果。以下说明为()A.两种激素的比例对实验结果的影响B.两种激素的使用顺序影响实验结果C.两种激素的浓度影响实验结果。D.上述陈述都是正确的。分析生长素和细胞分裂素的作用不同。浓度，使用率，使用优先级影响细胞的分裂和分化。回答 d2.以下关于植物组织培养的叙述中错误的是()A.培养基中添加蔗糖

5、的目的是提供营养，调节渗透压B.培养基的生长素和细胞分裂素对愈伤组织生长和分化的影响。C.分离的器官或组织的细胞必须通过脱分化形成愈伤组织D.同一绿色开花植物不同部位的细胞培养获得的愈伤组织基因组成相同。同一绿色开花植物不同部位的细胞不一定具有相同的基因组成。花药的配偶通过减数分裂形成，染色体数目减半，基因重组等因素与普通体细胞的基因组成不同。回答 d植物细胞表现全能的必要条件是()道学号：A.提供适当的营养和外部条件B.引入其他植物细胞的基因C.脱离母体后，给予适当的营养和外部条件D.成熟叶细胞的核移植到去核卵子中。植物细胞必须脱离母体，才能不受母体影响，制造自行营养，因此必须提供适当的营养

6、和外部条件，植物细胞才能表现出全能。回答 c天祝葵的组织培养一、组织培养1.准备实验器材和药品。2.准备配MS培养基。分别添加MS基本培养基所需的植物激素，准备诱导愈伤组织形成的培养基，诱导分化儿的培养基，引导根的培养基。添加植物激素后，将培养基均匀混合，再定容量，调节pH。3.灭菌根据121温度培养湿热灭菌20 min。灭菌彻底的培养基用于向日葵组织培养。4.采访和接种(1)植物组织培养的各项工作应在无菌室或超净工作台上进行。(2)摘下向日葵的嫩叶，洗净后消毒，切成约0.5 cm2的小块。(。(3)接种到已配制的诱导愈伤组织形成培养基上，做标记，在适当的条件下培养。5.观察和记录每天观察外植

7、体的生长情况并记录其变化情况。6.传输培养将增加到特定体积的愈伤组织连接到诱导分化儿的培养基上，在光照培养箱内继续培养，光照强度在1 _ 000 2000 _ LX之间。分化芽后转移到诱导根的培养基上，继续培养。生根后，先精炼试管苗，然后移植到大田。二、露地栽培1.通常要修剪和驯化树苗的原因组织培养的试管苗植物非常嫩弱，所处的环境是恒温、高湿、弱光、无菌、完全营养的条件，植物表面没有蜡和角质层等保护组织，气孔不关闭功能，有叶绿体，但光合能力较差。2.驯服树苗的步骤栽培岳母-洗净琼脂培养基-选择合适的移植基质-移植后条件控制合作讨论讨论1:为什么需要消毒接种explants疫苗？提示：外植体中残

8、留的杂菌争夺外植体和培养基中的营养物质，生产大量外植体有害物质，外植体可能死亡，必须先消毒接种。讨论2:在培养天竺葵的时候，需要更换培养基吗？需要更换多少次？提示：需要，三次。事故升华1.影响植物组织培养的因素(1)内部原因：explants的选择。其他植物的组织培养很困难。相同的植物材料、材料的年龄、保存时间等也会影响实验结果。旺盛生长的淡茄子生理状态好，容易诱导脱分化和再分化。(2)外人2.无菌技术是植物组织培养成功的关键(1)严格的无菌操作：用于植物组织培养的植物材料体积小，耐受性弱，对培养条件要求高。用于植物组织培养的培养基适合于某些微生物的生长，如某些细菌、真菌的生长。培养物一旦被微

9、生物污染，就会放弃实验前的球，必须进行严格的无菌操作。(2)无菌技术包括对培养基、仪器和植物材料(外植体)进行灭菌消毒。(。对培养材料进行表面消毒时要考虑药剂的消毒效果，另一方面要考虑植物材料的耐受性。(3)妥善处理被污染的培养物：一旦发现培养物被污染，特别是真菌污染，必须灭菌后打开清洗。(4)使用有毒物质后，要妥善处理，以免造成环境污染。特别提醒培养的植物材料也可以用体积分数为70%的酒精消毒。3.培养物污染的原因及处理污染的种类细菌污染真菌污染污染的原因戴口罩的渡边杏盒，接种时说话，不消毒手，机器灭菌不完全等可能是操作员造成的可能是由于植物材料消毒不当造成的处理措施将污染的培养瓶统一在高压

10、蒸汽灭菌锅里，进行高压蒸汽灭菌，然后打开培养瓶进行清洗1.以下哪个组与天竺葵组织培养的基本阶段相匹配()A.准备MS培养基外植体消毒接种培养移植栽培B.准备MS培养基外植体消毒接种培养栽培移植C.准备MS培养基外植体消毒接种栽培培养移植D.准备MS培养基外植体消毒接种移植培养栽培移植是指在培养基中培养的幼苗生长后移植到土壤中，种植是移植后对幼苗进行精细管理的过程，必须先移植后再种植。回答 a2.下图是胡萝卜的韧皮细胞通过无菌操作连接试管内的培养基，在一定条件下形成试管苗的栽培过程。根据图回答以下问题：(1)为了促进植物细胞分裂生长，培养基中必须含有营养素和植物激素。营养物质包括_ _ _ _

11、_ _ _ _ _ _ _ _和小分子有机物。植物激素包括细胞分裂素和_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _牙齿。(2)牙齿程序的依据是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。阶段a和阶段B细胞进行的分裂方式主要是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _(3)牙齿过程需要无菌操作，主要是对_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _的灭菌，在步骤B(4)试管苗的根细胞没有叶绿素，叶片的叶肉细胞有叶绿素，这是_ _

12、 _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _(5)将胡萝卜韧皮组织块接种到培养基上时，如何防止杂菌污染？_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。分析 (1)用于植物组织培养的培养基中，应含有植物组织细胞生长发育所需的无机物和小分子有机物，还应含有调节细胞发育方向的细胞分裂素和生长素等植物激素。(2)植物细胞的多能性是植物组织培养的理论基础。在脱分化及再分化阶段，细胞的增殖方式均为有丝分裂，在再分化阶段，愈伤组织通过细胞有丝分裂和分化形成

13、试管苗。(3)植物组织培养过程必须无菌操作。外植体、培养基、容器、接种工具等都要消毒灭菌，其中培养基的灭菌最重要。再分化阶段需要光。因为幼叶中叶绿素的合成需要光照条件。4)同一植物所有体细胞的遗传信息相同，但表达不同，因此形态和功能也有差异。(。(5)酒精灯火焰旁温度高，可以有效地杀死空气中的细菌。答案 (1)无机物生长所(2)植物细胞的全能有丝分裂分化(3)培养基芽发育为叶片，叶肉细胞中叶绿素的形成有光照条件(4)基因选择性表达(5)接种在酒精等火焰旁进行1.以下关于在植物组织培养中使用植物激素的说法不正确()A.植物组织培养中的重要激素是生长素和细胞分裂素B.先使用生长素，再使用细胞分裂素

14、，有利于细胞分裂和分化C.如果先使用细胞分裂素，然后使用生长素，细胞就会分裂分化D.同时使用生长素和细胞分裂素时，两种用量的比例影响植物细胞的发育方向。在植物组织培养中先使用生长素，然后使用细胞分裂素，有助于细胞分裂，但细胞不会分化。首先使用细胞分裂素，然后使用生长素，对细胞的分裂和分化都有利。回答 b影响植物组织培养的因素包括()培养基赵霁外植体选择激素操作消毒温度、pH、光照A.b .C.d .分析植物组织培养过程受温度、光照、pH等多种外部因素的影响，培养基的成分、外植体的选择和消毒是否严格也影响植物组织培养。回答 a3.无菌技术是植物组织培养能否成功的关键。以下说法正确()道学号：在植

15、物组织培养中使用的植物材料体积小，抗逆性弱，对无菌操作要求很严格。在培养基上对高压蒸汽灭菌培养材料进行表面消毒时，要考虑药剂的消毒效果。另一方面，要考虑植物材料的耐受性。培养中要区分不同的药剂、不同的植物材料，甚至器官。可用于培养材料的高压蒸汽灭菌如果不小心引起污染，可能会发生培养工作A.b . 931 .C.d . 9331分析灭菌或消毒方法取决于其他材料或对象。在培养材料中使用高压蒸汽灭菌渡边杏。否则培养材料可能会死亡。操作过程中必须严格遵守无菌操作，防止污染，抛弃所有专业。回答 c4.回答如下问题，如图所示，花药培养及单倍体育种的大致过程。(1)过程分离幼火药，在无菌条件下在MS培养基中

16、培养培养所需的物质，是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _(2)过程火药在MS培养基提供的特定条件下脱分化，发生了多次细胞分裂，因此_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _(3)过程诱导再分化和生根，最终长成植物，生长的植物(不管细胞核和细胞核融合)是_ _ _(4)过程与过程中使用的培养基有差异，主要是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _的差异。分析 (1)植物组织培养需要养分，主要包括大量元素、稀有元素和有机物，例如甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、甘蔗等。(2)脱分化(或脱分化)是高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程，是细胞有丝分裂的过程。(3)通过火药培养获得的植物以单倍体高度不育，在茎尖或花粉上作为秋水仙素处理，染色体加倍，恢复生育能力。(4)生长素和细胞分裂素的比例高时，有助于抑制根的分化和芽的形成。比例低有利于幼苗的分化，有利于抑制根系的形成。比例适当时促进愈伤组织的生长。答案 (1)水、大量元素、稀有元素、甘蔗、琼脂、植物激素、有机物等(3种回