DNA重组技术的基本工具.ppt_第1页
DNA重组技术的基本工具.ppt_第2页
DNA重组技术的基本工具.ppt_第3页
DNA重组技术的基本工具.ppt_第4页
DNA重组技术的基本工具.ppt_第5页
已阅读5页,还剩37页未读 继续免费阅读

下载本文档

版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领

文档简介

1、专题1 基因工程1.1DNA重组技术的基本工具,生物 选修3,蓝色妖姬,三色紫罗兰,玫瑰,(目的基因),(受体细胞),蓝色妖姬是怎么培育出来的呢?,导入,表达,蓝色妖姬,蓝色素基因,基因工程的概念,基因工程又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。通俗地说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向地改造生物的遗传性状。,基因拼接技术或DNA重组技术,生物体外,基因,DNA分子水平,人类需要的基因产物,剪切, 拼接, 导入, 表达,基因重组,基因工程的概念,提供的材料 1、一段含有三色紫罗兰蓝色素基因的DNA片段 2、受体细胞-玫瑰体细胞,要实现

2、三色紫罗兰的蓝色素基因在玫瑰体细胞内表达从而获得相应性状,我们该怎么做呢?,结合资料,大胆尝试,你认为基因工程培育蓝色妖姬的关键步骤是什么?,基因工程培育蓝色妖姬的关键步骤:,关键步骤一:,在体外对含有三色紫罗兰蓝色素基因的DNA分子进行切割,关键步骤二:,三色紫罗兰蓝色素基因与质粒连接,关键步骤三:,三色紫罗兰蓝色素基因导入受体(玫瑰)细胞,1.1 DNA重组技术的基本工具,基本工具: 限制性核酸内切酶“分子手术刀” DNA连接酶“分子缝合针” 基因进入受体细胞的载体“分子运输车”,(一)“分子手术刀”限制性核酸内切酶,1、来源:,主要来自原核生物,2、特点:,具有专一性(特异性),表现在两

3、方面:,(1)识别双链DNA中特定核苷酸序列,(2)切割特定序列中的特定位点,3、作用:,特定部位的两个核苷酸之间的 磷酸二酯键断开,4、结果:,产生黏性末端或平末端,限制酶切割DNA后形成的末端黏性末端、平末端是如何形成的?,EcoR限制酶,黏性末端,黏性末端,黏性末端,黏性末端,重复演示,EcoR限制酶,什么叫黏性末端?,被限制酶切开的DNA两条单链的切口,带有几个伸出的核苷酸,它们之间正好互补配对,这样的切口叫黏性末端。,Sma限制酶,平末端平末端,限制酶所识别的序列,无论是6个碱基还是4个碱基,都可以找到一条中轴线(如图),中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称、重复排列的。,想一想

4、限制酶所识别的序列有什么特点?,中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称排列的。,思考:如果把两种来源不同的DNA用同一种限制 酶来切割,会怎样呢?,用同一种限制性酶处理不同DNA片段,会形成同样的黏性末端,可进行重组。,(二)“分子缝合针”DNA连接酶,1、种类:, Ecoli DNA连接酶 T4 DNA连接酶,2、作用:,可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来,,Ecoli DNA连接酶或T4DNA连接酶,即恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键,T4 DNA连接酶还可把平末端之间的缝隙“缝合”起来,但效率较低,T4DNA连接酶,EcoliDNA连接酶,T4DNA连接酶,来源,功能,大肠

5、杆菌,T4噬菌体,恢复 磷酸 二酯键,只能连接黏性末端,能连接黏性末端和平末端(效率较低),相同点,差别,EcoliDNA连接酶与T4DNA连接酶,寻根问底,DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗?为什么?,以DNA的一条链为模板合成DNA双链,游离的脱氧核糖核苷酸,DNA聚合酶,DNA聚合酶,DNA聚合酶,DNA聚合酶,DNA聚合酶,DNA聚合酶,DNA聚合酶,DNA聚合酶,DNA聚合酶,DNA聚合酶,DNA,DNA聚合酶,具有连接单链DNA的本领,将单个核苷酸通过磷酸二酯键连接成一条互补的DNA链,DNA连接酶可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来,是把梯子两边扶手的断口连接起来,这样一个重组的

6、DNA分子才能形成。,DNA连接酶,只可以连接双链DNA,(三)“分子运输车”运载体,2、种类:,1、需要具备的条件:,(1)在受体细胞中稳定存在,能自我复制 (2)有一个或多个切割位点 (3)有标记基因 (4)对受体细胞无害,质粒、噬菌体衍生物、动植物病毒等,最常用的质粒大肠杆菌的质粒,试分析其作为载体的优点?,质粒是一种裸露的、结构简单独立于细菌染色体之外、具有自我复制能力的双链环状DNA分子。,能复制并带着插入的目的基因一起复制,有切割位点,有标记基因的存在,可用含氨苄青霉素的培养基鉴别,实际上自然存在的质粒DNA分子并不完全具备上述条件,都要进行人工改造后才能用于基因工程操作。,1、关于限制酶说法中,正确的是( ) A限制酶是一种酶,只识别GAATTC碱 基序列 BEcoRI切割的是GA之间的氢键 C限制酶一般不切割自身的DNA分子, 只切割外源DNA D限制酶只存在于原核生物中,课堂反馈,C,2.(多选)有关基因工程的叙述中,错误的是 ( ) A、

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

评论

0/150

提交评论