鸡神经病靶酯.ppt

1、成年鸡神经病靶向酯酶的同一性和特征描述，作者：吕飞燕2009.05.25，Company Logo，Contents，总结，实验结果，所选材料和方法，文章的主要内容总结，文章的出处和作者乔治亚医学院分子医学和遗传学基因调控专业以分子毒理学实验室为主，专业方向为分子毒理学，主要研究领域为神经毒理学、环境毒理学及药物所致神经病。 主要研究兴趣是总结环境有害化学物质的神经毒性机制神经损伤靶酯酶致迟发性神经毒性的分子机制、Company Logo、文章的主要内容，本文主要谈NTE的基因序列。 NTE基因中的活性部位。 NTE基因的不同部位经GFP标记后，主要分布于哺乳动物。 GFP标记的cNTER被m

2、acroautophagy和蛋白酶体两种物质破坏，其含量降低。 Company Logo，NTE的概念及其基本特征，神经病变靶酯酶(neuropathy target esterase，NTE )是有机磷化合物致迟发性神经病变(organophosphate2induceddelayed ) NTE是由1，327个氨基酸组成的跨膜蛋白。 将不同的NTE肽段重组为大肠杆菌表达，具有有机磷敏感性和戊酸苯酯水解活性的重组多肽至少包括727-1216氨基酸序列，该重组多肽称为NTE酯酶活性区以往的研究结果表明，NTE除了具有酯酶活性外，NEST在神经细胞分化和神经系统发育中还起着重要作用。 NTE不仅

3、在脑、脊髓、末梢神经，在末梢淋巴细胞内的含量也很高。 Company Logo、选择的材料和方法、成年鸡和各实验用的几个基本试剂。 分子克隆鸡NTE基因的控制序列。 2 .鸡NTE序列的扩展和扩展。 3 .质粒的构建4 .细胞培养和转染5 .在细胞中加入MG132、AC、3ma、雷帕霉素等处理因子。 6.western引导分析。 7.NTE活性检测8 .共聚焦显微镜测定、分布、Company Logo，实验结果表明，Company Logo、鸡的完整NTE序列为4501bp组成(基因对数生物学上DNA常用的kb、nt， bp kb=千碱对kilobase nt核苷酸nucleotide bp碱

4、对base pair )鸡的一种是估计的调节区(cNTER )，另一种是催化区，根据也称为NTE酶的活性区序列分析，鸡的NTE序列是人和小鼠的NTE序列Company Logo，实验结果2，cNEST具有NTE活性，cNTER经细胞转染方法证明。 用GFP标记cNEST和cNTER的羧基末端，转染48h后，用Western blot法测定她们的分子量，结果显示他们的分子量分别为65和83kDa NTE活性测定在HEK293T cells中发现了GFP的表达。 Company Logo、distributionofgfptaggedcNTER and cNESTproteininmammalia

5、ncells、cnter and cnest均以gfp标记，因此cnterandcnest compancells Company Logo，NTER和NEST分子量的测定，Company Logo，不同的处理因子对cNTER的影响，Company Logo，compannylogo成年母鸡尽管经常被用作OPIDN的动物模型。 但是，对于NTE的排序和分子特征所知甚少。 现在的研究表明，鸡的NTE完全分离，在氨基酸水平上与人和小鼠有很高的相似性。 另外，蛋白质的结构和领域也与人类有很高的相似性。、公司日志、anerlikelocalizationofpcnter-gfpwasobserveda

6、ndcntewasreasonablyconsideredtobeaner-anchored temaybede 公司日志， chickentewasaner-anchoredproteinanerlikelocalizationofpcnter-gfpwasobservedandcntewasreasonablyconsideredtobea cntemaybedegradedbymacroautophagy .公司日志，thatcntewasdegradedbytheproteasomeandthesimilard-boxsequencesmayactasrecogni

7、t furtherstudiesarerequiredtodeterminewhethertheseresiduesaffectthedegradationofcnte .公司日志、总结、In summary。 chickentegenewasfirstlyidentified.bycharacterizationoftheregulatoryandesteraseactivitydomainofchickente。 chickenntewasconfirmedtobeaner-anchoredproteinandbedegradedbymacroautophagyandtheproteasomepathw