食品中快速检测技术的种类及其应用.ppt

1、食品中快速检测技术的种类及其应用，成员：程超男梁文发王春燕曲晓芳钟莉，报告内容，序言常用快速检测技术在食品安全领域的应用对食品安全快速检测技术的展望，前面随着科学技术的发展，食品供应链中的环节和要素增加，从农场、牧场的原料生产到食品企业的加工、包装、包装近20年来， 世界上发生了许多食品安全事件： 1986年欧洲疯牛病，1999年二恶英污染和可口可乐污染，2000年日本雪印品牌毒牛奶，2004年阜阳奶粉，2005年苏丹红事件欧洲疯牛病，二恶英，口蹄疫及基因这场波澜起伏的食品污染事件，已经使世界有了“食”色变化的趋势。 不久前，毒米、地沟油、死猪肉、瘦身精污染等食品问题和食品中毒事件相继出现在我

2、国几个地方，食品安全从未像现在这样受到关注和担忧。 作为保障食品安全的重要手段的安全检查技术，也发挥着越来越重要的作用。 由于许多食品原料大量使用农药、激素、抗生素等有害物质而发生食品中毒现象，突发性强，蔓延快。 传统的检测手段逐渐不能满足人们的需要，产生了食品快速检测技术。 所谓“快速检查”对于传统和经典的化验、仪器检查，其特点是所需的检查时间相对较少，对仪器设备等条件要求不高，可携带到交易(生产)现场(或在线)实施检查。 方便、快速且经济地适用。 ZYD-JJX食品安全检验箱，广义上说，能够缩短传统检验方法时间的都可以称为快速检验方法，但严格来说，快速检验方法与普通方法相比，除了准确性外，

3、还应具有明显的简便性、经济性和便携性。 食品快速检测技术是食品企业内部和监督检查部门满足食品质量安全和及时控制的需要，食品快速检测技术得到了迅速发展。 现将一些食品安全快速检测技术的现状及应用一、食品安全快速检测技术现在常用的快速检测方法介绍如下：化学比色法、生物传感器技术、酶抑制技术、免疫学技术、分子生物学检测技术、生物芯片技术及ATP生物发光技术等(一) 化学比色检测技术化学比色技术利用迅速产生明显颜色的化学目前，常用的化学比色法包含各种检测试剂和试纸，随着检测仪器的发展，与之相适应的微检测仪器也相应出现。 化学比色分析法与一般的仪器分析方法相比，具有廉价、操作比较简便、结果直观、一次性、

4、无需检修维护、一定的灵敏度和特异性等一系列优点，非常适合食品安全的现场检查。 化学比色分析技术广泛应用于有机磷农药、硝酸盐、亚硝酸盐、甲醛、二氧化硫、吊白块、亚硫酸盐等化学有害物质的检测，也广泛应用于菌落总数、大肠菌群、霉菌、金黄色葡萄球菌等微生物的检测。 (二)酶免疫技术ELISA是一种以酶为标记物的免疫分析方法，也是目前最广泛的免疫分析方法之一，将酶标记在抗体抗原分子上形成酶标记抗体酶标记抗原，酶作用于呈色基质，用仪器或肉眼识别。ELISA法的基本原理是，预先结合在固相载体上的抗体或抗原分子与试样中的抗原或抗体分子在一定条件下进行免疫学反应。 该方法不需要昂贵的仪器设备，由于对人体无害等优

5、点而被广泛采用，具有灵敏、特异、快速、稳定及自动化操作方便等特点。 目前ELISA法常用的固相载体为96孔聚苯乙烯酶靶标，常用酶为辣根过氧化物酶，常用基质为邻苯二胺和四甲基联苯胺等。 酶靶u型96孔，ELISA法可检测食品中的沙门氏菌、军团菌、大肠菌O157等微生物。 (3)酶抑制技术、酶抑制技术利用有机磷和氨基甲酸乙酯类农药抑制胆碱酯酶(ChE )的特异性生化反应。 酶抑制技术比较成熟，是国内应用最广泛的速测技术之一。 自动酶标志物、胆碱酯酶主要分为乙酰胆碱酯酶(ACHE )和丁酰胆碱酯酶(BcllE )，农药的抑制因来源而异，农残的检测精度也因品种而异，包括酶抑制率法和速测卡法。 但酶抑制

6、法只能检测有机磷和氨基甲酸乙酯两种农药，对同种、不同种类农药的抑制率差异很大。 因此，以统一的抑制率确定农药残留是否超过标准，必然导致假阳性和假阴性的漏检。 所以酶的抑制法是现在不得已采用的速测法。 此方法仅适用于基层初检。 发现超标现象，应以标准方法进行再验证。 农产品质量安全法第36条第2项有明确的规定，阴性结果也应该按比例进行抽样，以确切的方式进行再验证和实证。 (4)生物传感器、生物传感器的基本原理是，被测定分子与固定在生物感受器上的敏感材料特异性结合，引起生化反应，从而产生热焓变化、离子强度变化、pH变化、颜色变化或质量变化等信号， 根据反应信号强弱与一定条件下特异结合的被测定分子的

7、量有一定数学关系的生物认证元件和生物机能膜，生物传感器可分为酶传感器、免疫传感器、微生物传感器、组织传感器、细胞传感器、脂质膜传感器、DNA杂交传感器等生物传感器的特征是高特异性和高灵敏度，其高特异性由生物分子特异性识别决定。 用酶联免疫电流型生物传感器验证了食品中存在的少量沙门氏菌、大肠菌、金黄色葡萄球菌等的检测是可能的。 生物传感器、电流型生物传感器、水晶振荡器，还有纳米技术的应用使新的生物传感器的出现成为可能。 据报道，美国利用纳米技术开发了新的生物传感器，能够迅速检测出食品和水中的极微量细菌病毒、寄生虫、病原体等，灵敏度极高。 (五)免疫捕获PCR法依据特异性抗体和病原菌抗原特异性结合

8、的免疫学原理。 将特异性抗体包裹在玻璃珠或PCR管壁中，对菌悬浊液和标本中的病原菌进行浓缩或捕获，通过进行PCR反应，可以检测出目标病原菌。 像0157病原菌检查那样，基于生化特性的传统培养法需要约72h，而本方法为45h，需要时，只需增加细菌6h即可提高灵敏度。 (6)atp生物发光检测法，该方法是近年来发展迅速的食品生产加工设备结晶度检测的快速检测方法。 使用ATP生物发光法分析技术和体细胞去除技术，测定细菌ATP和体细胞ATP，细菌ATP的量与细菌数成比例。 应用ATP生物发光分析技术检测肉类食品细菌的污染状况和食品器具的现场卫生学检测，可以快速及时地达到目标。 国内外已有成熟的ATP发

9、光快速检测系统产品上市。ATP快速检测仪，(7)微型自动荧光酶标准法(DAs )，利用酶荧光免疫分析技术，通过抗原抗体特异反应，分离目的菌，特殊仪器根据荧光的强弱自动判断样品的阳性或阴性。 VIDAS法检测食品沙门氏菌比常规方法敏感、特异，将其检测为阴性的样品可立即作出非沙门氏菌的判断，可在常规方法23天前进行。 (8)生物芯片技术生物芯片包括基因芯片、免疫芯片、蛋白质芯片等技术。 生物芯片技术具有快速、准确、锐敏、高吞吐量和适用范围广等特点，生物芯片技术、生物芯片可以利用： (1)识别不明肉类，不仅可以判明肉制品是否假，而且还可以判明食用脊椎动物副产物的动物肉制品所带的病毒印模例如疯牛病等；

10、(2)确认一些指标严格的食品是否符合标准；(3)兽药残留的检验，可以为兽药残留的控制提供科学、准确、公证的检验数据。 基因芯片技术在能够同时、迅速、正确地分析数千个基因组信息的能力上显示出很大的威力。 基因芯片技术能够检测水和食品常见病原菌及其毒素、真菌毒素、病毒、支原体、衣原体、立克次体等微生物，具有快速、准确、易操作等优势。 二、快速检测方法在食品安全领域的应用，(一)重金属毒物残留快速检测食品中砷、镉、铅、汞、铬5种有害元素的快速检测技术不断涌现。 铅检验试纸最低检验极限可达20mg/L Milestone公司的DMA-80直接汞测定仪，可测定固体和液体中汞含量，表明无需样品前处理，各样

11、品分析仪器可在56分钟内完成。 检出限为005ng级。 DMA-80汞检测器(汞分析修订)，(二)农药残留快速检测农药残留的主要方法是免疫分析技术、生化技术和生物传感器技术。 免疫分析技术在农药快速检测应用研究中非常活跃，是一种检测数十种农药的酶联免疫检测试剂盒，检测灵敏度高。 检查快(一次检查只需10分钟)，成本低，使用方便，安全可靠。 操作员不需要特别的训练，也不需要净化样品。 如果装备小型光度修正，一小时能同时完成20数个样品的检查。 其可靠性达到95以上。 孔雀石绿酶免疫检测试剂盒、氯霉素酶免疫检测试剂盒、胆碱酯酶抑制的生化技术可用于有机磷和氨基甲酸酯醋类农药，如速测卡法、速测片法和农

12、药残毒光度校正法的检测。 目前，国内广泛应用农药速测卡法、速测片法和农药残毒光度校正法，农药速测卡(酶抑制剂法)尤其适合初筛农贸市场蔬菜。 农药残留速测卡，(三)兽药残留快检动物食品在取样检测过程中干扰杂质较多，兽药检测方法要求在各种复杂基质检测中能够检测出含量非常低的残留药物。 目前，我国正在开展多残留仪器的分析和验证方法的研究。 兴奋剂、激素、磺胺钾、四环素类、氟霉素类、硝基呋喃类、内酰胺类、苯并咪唑类、阿奇霉素类、醌类、硝基咪唑类、氨基糖苷类、氨基硫脲类等13种药物完成了新型综合微量样品处理器、超临界流体萃取在线浓缩离线净化装置、高效高速浓缩器、便携式酶标记的研制。 便携式酶标志物，(4

13、)硝酸盐和亚硝酸盐的快速检测目前国内外硝酸盐的快速测定方法主要有硝酸盐电极法、硝酸盐比色法、硝酸盐试验粉试纸法等，我国研究人员已经研制出敏锐、快速、简便的硝酸盐试剂盒、便携式显微仪器、硝酸盐试纸的快速测定方法，并在十几分钟内得出结果亚硝酸盐试纸，(5)其他方面的快速检测，1、重要的有机污染物微量和超微量检测技术方面的研究有二恶英， 完成多氯联苯和氯丙醇微量和超微量检测技术的研究，建立了12种具有二恶英活性的共面PCBs单体同位素稀释高分辨率质谱法建立了稳定同位素稀释技术同时测定食品中氯丙醇的方法建立了食品中丙烯酰胺、有机锡、驱蚊灵、己2、食品添加剂、饲料添加剂和禁产化学检验技术研究开展了甜、蔗

14、糖、防腐剂的快速检验对番茄红素、辣椒素色素、甜菜红素、红花色素、饲料添加剂虾青素、白梨芦醇等进行了检验研究的阿力产、库建立了保健食品中红景天苷、15种脂肪酸测定方法、食品(焦糖色素、酱油)中4-甲基咪唑含量的毛细管气相色谱分析方法建立了芬氟拉明、杂氟拉明、杂醇油、磷化物的快速检测方法。 3、生物毒素检测技术研究成功地与真菌毒素、藻类毒素、贝类毒素ELISA试剂盒进行了检测，建立了在果汁中部署青霉素的高效液相色谱方法。 黄曲霉毒素B1酶免疫试剂盒，三、食品安全快速检测技术展望食品快速检测技术，能及时控制、减轻、消除食品突发事故和有毒有害物质对人体的潜在危害，降低食品中毒的发生率，提高工作效率，因此大力发展食