《张真真开题报告》PPT课件.ppt

1、七叶皂苷钠抑制急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞株增殖的机制，报告人：张真真导师：张双全教授，曹鹏副研究员，开篇报告，前言，国内外研究进展的依据和意义，研究目标和内容，研究方法和途径，成果，创新点，年度研究计划参考文献，前言，七叶皂苷钠是从板栗科板栗干燥成熟果实中提取的三萜皂苷钠盐，结构式如下：七叶皂苷钠具有抗渗出和增加静脉张力的作用，可用于临床：1 .治疗脑水肿、外伤或手术引起的肿胀；2.治疗静脉回流障碍；3.治疗其他渗出性疾病和非感染性炎症。本研究使用的七叶皂苷钠购自山东鲁野制药有限公司，产品批号为ZL-09010A，七叶皂苷钠含量为99.24%，其中A:33.0%，B27.6%，C 3

2、36017.7%，D:11.8%。急性淋巴细胞白血病(ALL)在儿童中更常见，美国的统计数据显示，75%的患者年龄小于15岁，发病率最高。通常男人比女人稍微普遍一些。95%的儿童白血病是急性的，70-85%是急性淋巴细胞白血病。急性淋巴细胞白血病的治疗：联合化疗是白血病治疗的核心，治疗始终进行。异基因造血干细胞移植是常规化疗失败患者的主要治疗方法。由于干细胞移植来源有限，移植过程中出现的移植物抗宿主病等并发症导致移植失败、移植后复发和成本高，在一定程度上限制了其应用。目前，西医治疗白血病的短期效果明显，而长期效果差，治疗效果不稳定。从中期和长期来看，这种疾病仍然严重威胁着病人的生命。西医的主要

3、困难：1 .如何减少复发和延长生存时间？2.如何防治耐药性和毒副作用？中医药的参与可以提高传统治疗的效果，保证治疗的连续性，特别是使长期效果更加安全。中医药对策：1 .解毒、抗癌、调节免疫、消除微小残留白细胞、减少复发。2.充分发挥中草药的拮抗作用，逆转多药耐药性。中西医结合治疗白血病的优势如下：1 .降低化疗药物的毒性。2.促进造血功能的恢复。3.促进免疫功能的恢复。4.提高患者的生活质量。近年来，随着中药现代化和国际化战略目标的确立，利用中草药开发抗肿瘤新药已成为抗肿瘤研究的热点领域。七叶皂苷钠作为一种中草药制剂，符合未来的用药趋势。七叶皂苷钠已广泛应用于临床，其安全性已得到公认。我们以前

4、的实验结果证明，七叶皂苷钠能抑制急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞系的增殖，但对正常人胚肾的HEK-293细胞无抑制作用。Jurkat细胞、肝癌HepG2细胞、人胚肾HEK-293细胞、卵巢癌SK-OV-3细胞、乳腺癌MDA-MB-231细胞、胰腺癌PANC-1细胞和非小细胞肺癌A549细胞。七叶皂苷钠的抗肿瘤作用鲜有报道。周学英报道，七叶皂苷钠可诱导人肝癌细胞株HepG2凋亡，并在G1/硫检查站阻断该凋亡。在此过程中，细胞周期蛋白/CDK2、pRb和E2F的表达下降。七叶皂苷钠诱导的凋亡途径不同于经典的凋亡途径，后者依赖于线粒体，但不依赖于半胱天冬酶。在细胞凋亡中，AIF和细胞色素C从线粒

5、体转移到细胞核，但不在细胞质中积累。在本研究中，我们将从分子水平、细胞水平和整个动物水平研究七叶皂苷钠抑制Jurkat细胞系的机制。本研究的目的是为开发治疗白血病的新药七叶皂苷钠提供理论和实验依据，并为寻找、发现和合成新的抗癌先导化合物提供有用的线索。研究方法和路线，1。体外MTT免疫印迹分析、MTT流式细胞术分析、裸鼠PI染色、细胞周期停滞、s期和G2/M期、凋亡指数检测、凋亡诱导、G0/G1期、DNA阶梯、Hoechst 33258、FITC-膜联蛋白v/pi、caspase 3、8、9、内源性途径、线粒体膜电位、细胞色素c、促凋亡蛋白、抗凋亡蛋白、死亡受体、外源性途径、裸鼠背部皮下接种的

6、Jurkat细胞悬液、 大腿和股骨的骨髓细胞，DNA提取，人Alu序列的检测，移植的肿瘤组织，HE染色，肿瘤抑制率，肿瘤细胞坏死，免疫组织化学，肿瘤抑制机制，裸鼠的Jurkat细胞浸润，每日活性观察，每周体重，肿瘤大小，1。 用MTT法检测不同肿瘤细胞株对七叶皂苷钠的敏感性，发现七叶皂苷钠对体外培养的Jurkat细胞株的增殖具有时间依赖性和浓度依赖性。2.实验证明七叶皂苷钠对人胚肾HEK-293细胞株无抑制作用。具有创新性的是，七叶皂苷钠的抗肿瘤作用最近才被发现，而七叶皂苷钠的抗急性T淋巴细胞白血病作用尚未见报道。本课题旨在通过细胞药效学研究、全动物药效学研究和分子机制研究，为开发抗白血病新药

7、七叶皂苷钠提供理论和实验依据，具有开创性意义。年度研究计划，第一年研究生上学期：专业课程的理论学习；研究生第一年的下学期：阅读大量专业文献，学习细胞培养等相关技术；研究生二年级上学期：完成MTT实验、流式细胞仪分析、凋亡指数检测和部分蛋白质印迹实验；研究生二年级下学期：完成体外实验并完成一篇文章；研究生三年级上学期：完成体内实验并完成一篇文章；研究生三年级下学期：写毕业论文和准备答辩。,参考文献七叶皂苷是一种天然的三萜皂苷混合物，具有抗肝癌的活性Planta Med，2009，103 (2 ) : 679-688 .等。荧光素A通过下调akita television 秋田电视磷酸化诱导人白血

8、病U937细胞凋亡。凋亡，2008，13 : 14941504 .白藜芦醇通过多种机制使雄激素非依赖性前列腺癌细胞对死亡受体介导的凋亡敏感2007，67 : 1641-1653 .汉黄芩素优先杀死恶性淋巴细胞，并通过诱导血小板活化因子1和钙依赖性凋亡抑制T细胞肿瘤生长。血液，2008，111: 2354-2363 .抗肿瘤环斯汀类似物通过半胱天冬酶介导的凋亡诱导作用杀死肿瘤细胞。致癌作用，2005，26 (4 ) : 733739 .6余芳，陈春，凯莱宁，等。抑制MEK诱导人黑色素瘤细胞凋亡是半胱天冬酶非依赖性的，由Bcl-2家族成员PUMA，Bim和Mcl-1J介导。临床癌症研究，2007，13 (16) : 4934-4942 .7吴军，黄军，杨军，等。半胱天冬酶抑制通过增强活性氧生成增强冬凌草甲素诱导的小鼠纤维肉瘤L929细胞死亡。药理学科学，2008，108 : 32 39 .3，3-二吲哚甲烷对核因子-乙的失活导致化疗药物诱导的乳腺癌细胞凋亡增加。摩尔癌症杂志，2007，6 (10) : 2757-2765 .9李涛，王伟，陈海，李涛，等。调治三号信令评价利血平抗