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文档简介

1、血清-淀粉酶(AMS或AMY)活性的测定Reagent for - Amylase Test,一、原理 二、测定方法 三、参考值 四、临床意义 五、注意事项 六、方法学评价,一、原理:,样品中-淀粉酶(1,4-D-葡萄糖水解酶,又称淀粉内切酶,对1,4-糖苷键连接的葡萄糖有特异性。)催化淀粉分子及糖原中的-1,4葡萄糖苷键水解,产生葡萄糖、麦芽糖及含有-1,6糖苷键支链的糊精,在淀粉(已知浓度)充分的条件下,反应后加入碘液与未被水解的淀粉结合成蓝色复合物,其颜色的深浅与未经酶促反应的空白管比较,从而推算出淀粉酶的活力。 注:1、生物界存在和两种淀粉酶,但人体内仅有-淀粉酶。 2、淀粉酶分子量4

2、0000 50000,很易由肾排出。,二、测定步骤:,各管混匀, 660nm波长,以蒸馏水调零,测定各管吸光度值。,2、计算:,注:淀粉浓度 0.4g/L 样品AMY活力(苏氏单位)= 样品AMY活力(苏氏单位)=,注解,0.4淀粉浓度 5.0 1单位定义消耗淀粉mg数 15 1单位定义反应时间 7.5 酶的实际作用时间 100 1单位定义用血清 0.02 样品取量,3、AMY活性单位定义:,100ml血清中的淀粉酶在37,15分钟水解5mg淀粉为1个单位。,4、半自动生化仪的使用,测定法:终点法 温 度:37 波 长:623nm 吸 量:1000 l 参考范围:60180U 线性范围:040

3、0U,三、参考值:,血清:60180U苏氏单位 尿液:100 1200U苏氏单位,四、临床意义:,淀粉酶主要由胰腺和唾液腺分泌,肺、肝、甲状腺、脂肪等组织亦含有此酶。血清淀粉酶测定主要用于急性胰腺炎的诊断。一般于发病后612h开始升高,1224h达峰值,25d恢复正常,因此血清淀粉酶活性显著升高对急性胰腺炎的早期诊断价值较大。淀粉酶可通过肾小球滤过,尿淀粉酶于发病后1224h开始升高,持续时间长,下降比血清淀粉酶慢,故胰腺炎后期测尿淀粉酶更有价值。,慢性胰腺炎、胰腺癌、急性阑尾炎、溃疡性穿孔、肠梗阻、流行性腮腺炎、唾液腺化脓等血清淀粉酶均可升高。肾功能障碍时,血清淀粉酶升高,尿淀粉酶降低。各种肝病患者,血、尿淀粉酶同时降低。,五、注意事项:,1、样品为不溶血的血清、血浆或尿液(pH值应调至7.0)样品应在低温条件下运输保存,血清或血浆中淀粉酶28可稳定30天,室温可稳定7天。 2、如果样品中AMY活力大于400苏氏单位或测定管吸光度小于空白管吸光度一半时,应将样品稀释后再进行测定,测定结果乘以稀释倍数。 3、加入显色剂及蒸馏水后,应立即比色,否则可致结果偏高。使用血浆时应选用肝素抗凝。 4、如遇黄疸、溶血或乳糜标本时应作样品空白。,六、方法学评价,1.淀粉遇碘呈蓝色反应属有机化学的经典型反应,方法可靠,反应特异性高。 2.线性范围:0400苏式单位(U/L) 3.

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