对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析.ppt

1、1.熟悉本类药物的典型药物的化学结构、理化性质与分析方法的关系。 2.掌握本类药典型药物中的鉴别试验（重氮化偶合反应、三氯化铁反应、重金属离子反应及红外吸收光谱法） 3.熟悉本类药物的特殊杂质的结构、危害、检查方法与含量限度。 4.掌握本类药物的亚硝酸钠滴定法、非水滴定溶液滴定法、溴量法和提取酸碱滴定法含量测定的原理、测定的主要条件、终点指示方法和注意事项。,分子结构中都具有对氨基苯甲酸酯的母体（芳伯氨基）,苯佐卡因,盐酸丁卡因,盐酸普鲁卡因胺,案例7-1,已知某药物结构式为： 根据该药物的结构,分析其性质,设计合理的化学鉴别反应。,2.水解特性:分子结构中有酯键或酰胺键，易水解。,1. 芳伯

2、氨基:,受光线、热、碱的影响；盐酸丁卡因BABA，苯佐卡因、盐酸普鲁卡因等PABA,重氮化偶合反应；与芳醛缩合成Schiff碱；易氧化变色等,4.溶解性：游离碱，油状液体或低熔点固体难溶于水，易溶于有机溶剂；盐酸盐白色结晶粉末，具一点的熔点，易溶于水和乙醇，难溶于有机溶剂。,3.弱碱性：具脂烃胺侧链，弱碱性。叔胺氮原子，生物碱沉淀剂反应，非水溶剂滴定,5. UV,6. IR,分子结构中都具有芳酰氨基,（一）基本结构与典型药物,盐酸利多卡因,盐酸布比卡因,1.芳伯氨基：水解后显芳伯氨基特性,乙酰氨基酚水解较快，利多卡因和布比卡因在酰氨基邻位存在两个甲基，由于空间位阻影响，较难水解。,2 水解：水

3、解产物易酯化,COCH3,重氮化偶合反应；与芳醛缩合成Schiff碱；易氧化变色等,水解产物(醋酸)+乙醇/硫酸醋酸乙酯,4.弱碱性：具脂烃胺侧链，弱碱性，可以成盐，可与生物碱沉淀试剂发生沉淀反应。可采用非水滴定法测定含量,5.与重金属离子发生沉淀反应,叔胺氮原子生物沉淀剂沉淀,酰胺氮原子与金属离子络合显色,重氮化-偶合反应,水解产物反应,制备衍生物测熔点,紫外、红外吸收光谱,重金属离子反应,三氯化铁反应,氯化物的鉴别反应,（一）重氮化-偶合反应（芳香第一胺反应）,直接：盐酸普鲁卡因、苯佐卡因、盐酸普鲁卡因胺,间接：对乙酰氨基酚、醋氨苯砜、非那西丁、贝诺酯,盐酸普鲁卡因 Ch.P.（2010）

4、 【鉴别】（4）本品显芳香第一胺类的鉴别反应（附录） 取供试品约50mg，加稀盐酸1ml,必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加0.1mol/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性-萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙黄到猩红色沉淀。,对乙酰氨基酚 Ch.P.（2010） 【鉴别】 （2）取本品约0.1g，加稀盐酸5ml，置水浴中加热40分钟，放冷；取0.5ml，滴加亚硝酸钠试液5滴，摇匀，用水3ml稀释后，加碱性-萘酚试液2ml，振摇，即显红色。,盐酸丁卡因中不具有芳伯氨基，无此反应，但其分子结构中的芳香仲胺在酸性溶液中与亚硝酸钠生成N-亚硝基化合物的白色沉淀。可与芳伯氨基同类药物区别。,具有酯键结构的药物易

5、在碱性溶液中水解,可利用其水解产物进行鉴别。,【鉴别】 （1）取本品约0.1g，加水2ml溶解后，加10氢氧化钠溶液1ml，即生成白色沉淀；加热，变为油状物；继续加热，产生的蒸气，能使湿润的红色石蕊试纸变为蓝色；热至油状物消失后，放冷，加盐酸酸化，即析出白色沉淀。,1.盐酸普鲁卡因 Ch.P.（2010）,与铜盐及钴盐生成配合物反应 羟肟酸铁盐反应 与汞盐反应,（四）重金属离子反应,（三）与重金属离子反应,氯仿,黄色,2.羟肟酸铁盐反应（盐酸普鲁卡因胺）,羟肟酸,羟肟酸铁,盐酸利多卡因+Hg(NO3)2,黄色,红色或橙黄色,对氨基苯甲酸酯类 +Hg(NO3)2,A:芳酰胺类，如盐酸利多卡因,B

6、.对氨基苯甲酸酯类，如苯佐卡因,例1：下列药物中，能在碳酸钠试液中硫酸铜反应生成蓝紫色配位化合物的是,A 盐酸普鲁卡因 B 盐酸利多卡因 C 盐酸丁卡因 D 对乙酰氨基酚 E 肾上腺素,例2：下列药物中，Ch.P.直接用芳香第一胺反应进行鉴别,A 盐酸普鲁卡因 B 盐酸利多卡因 C 盐酸丁卡因 D 对乙酰氨基酚 E 盐酸肾上腺素,例3：盐酸丁卡因与亚硝酸钠作用形成的产物是,A 重氮盐 B 偶氮染料 C N-亚硝基化合物 D 亚硝基苯化合物 E 偶氮氨基化合物,例4：下列药物中，经水解后加碘试液可生成黄色沉淀的是,A 盐酸利多卡因 B 氨甲苯酸 C 乙酰水杨酸 D 苯佐卡因 E 盐酸克仑特罗,例

7、5：下列药物中，在酸性条件下可与CoCl2试液反应生成亮绿色的是,A 盐酸利多卡因 B 氨甲苯酸 C 乙酰水杨酸 D 苯佐卡因 E 盐酸普鲁卡因胺,例8：盐酸普鲁卡因常用的鉴别反应有,A 重氮化-偶合反应 B 水解反应 C 氧化反应 D 磺化反应 E 碘化反应,例9：下列药物中，不属于酰苯胺类的有,A 盐酸布比卡因 B 苯佐卡因 C 盐酸利多卡因 D 盐酸丁卡因 E 盐酸普鲁罗哌卡因,一、盐酸普鲁卡因中对氨基苯甲酸的检查,杂质来源 水解产生,第三节 特殊杂质检查,Ch.P.（2010）盐酸普鲁卡因及其各种制剂均采用HPLC法检查对氨基苯甲酸,原料: 取本品，精密称定，加水稀释制成每1ml中含盐

8、酸普鲁卡因0.2mg的溶液，作为供试品溶液；另取对氨基苯甲酸对照品适量，精密称定，加水溶解并定量制成每1ml中含对氨基苯甲酸1.0g的溶液，作为对照品溶液。照高效液相色谱法（附录V D）测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇磷酸盐缓冲液（0.05mol/L磷酸二氢钾，0.1庚烷磺酸钠，用磷酸调节pH值至 3.0）（32：68）为流动相；检测波长为279nm，理论板数按对氨基苯甲酸峰计应不低于2000，盐酸普鲁卡因和对氨基苯甲酸之间的分离度应大于2.0。取对照品溶液10l 注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为满量程的20。精密量取供试品溶液与对照品溶液各10l ，分别注

9、入液相色谱仪，记录色谱图。供试品溶液色谱图中如有与对氨基苯甲酸对照品相应的杂质峰，按外标法以峰面积计算，不得过0.5。,对氨基苯甲酸检查方法Ch.P.(2010),注射液: 精密量取本品适量，加水稀释制成每1ml中含盐酸普鲁卡因0.2mg的溶液，作为供试品溶液；精密称取对氨基苯甲酸对照品适量，加水溶解并定量制成每1ml中含对氨基苯甲酸2.4g的溶液，作为对照品溶液。照高效液相色谱法（附录V D）测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇缓冲液（0.05mol/L磷酸二氢钾，0.1庚烷磺酸钠，pH 3.0）（32：68）为流动相；检测波长为279nm，理论板数按对氨基苯甲酸峰计应不低于2000

10、。取对照品溶液10l 注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为满量程的20；盐酸普鲁卡因和对氨基苯甲酸之间的分离度应大于2.0。精密量取供试品溶液与对照品溶液各10l ，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。供试品溶液色谱图中如有与对氨基苯甲酸对照品相应的杂质峰，按外标法以峰面积计算，含量不得过1.2。,对氨基苯甲酸检查方法Ch.P.(2010),二、盐酸氯普鲁卡因注射液中有关物质和光解产物的检查,三、盐酸利多卡因注射液中2,6-二甲基苯胺及其他杂质的检查,（三）盐酸利多卡因注射液中2,6-二甲基苯胺及其他杂质的检查,HCE法:手性分离,HPLC,由于盐酸氯普卡因注射液在生产和贮藏过

11、程中会产生4-氨基-2-氯苯甲酸，影响疗效和成品的颜色，故此需要对降解产物进行检查 1、高效液相色谱法（HPLC） 2、液相色谱与质谱联用法（LC-MS）,例10：盐酸普鲁卡因需检查的特殊杂质是,A 水杨酸 B 对氨基酚 C 有关物质 D 对氨基苯甲酸 E 酮体,练习题,今有3瓶药物分别为盐酸利多卡因（A)、盐酸丁卡因（B)、和盐酸普鲁卡因（C)，但瓶上标签脱落，请采用适当的化学方法将三者区分开。,（一）亚硝酸钠滴定法 (sodium nitrite method) （二）非水溶液滴定法 (non-aqueous titrimetry) （三）分光光度法 ( spectrometry ) （四

12、）HPLC法(chrometography),（一）亚硝酸钠滴定法,Ar-NH2; Ar-NHCOR; Ar-NO2均可采用此法,.,具游离芳伯氨基的药物可用本法直接测定。具潜在芳伯氨基的药物，如具酰胺基药物（对乙酰氨基酚等）经水解，芳香族硝基化合物（如无味氯霉素）经还原，也可用本法测定。,Ar-NHCOR + H2O,Ar-NH2 + RCOOH,H +,Ar-NH2 + NaNO2 + 2HCl,Ar-N2+Cl- + NaCl + 2H2O,(1) 加KBr增加反应速度,重氮化的反应历程为：,1.芳伯氨基的游离程度：碱性越弱，游离程度越强，重氮化反应速度就快。 2.吸电子基团：苯胺环上（

13、尤其是对位），具SO3、NO2、COOH、X，反应加快； 3.推电子基团：苯胺环上（尤其是对位），具OCH2R、CH3、OH，反应减慢；,NaNO2 + HCl,HNO2 + NaCl,HNO2 + HCl,NOCl + H2O,(1),(2),KBr + HCl,HBr + KCl,HNO2 + HBr,NOBr + H2O,生成NOBr量大得多 加快反应速度, KHBr 比KHCl大300倍,.,重氮化速度加快； 重氮盐在酸性介质中稳定； 防止生成氨基偶氮化合物。,(3) 室温(1030 )条件下滴定(15 以下较准),(4) 滴定管尖端插入液面下滴定,最后一滴加入后,搅拌1-5min,再

14、确定终点.,3.指示终点的方法,溶液 检流计,终点前 无过量HNO2 无电流,终点时 过量HNO2 有电流,（1）永停滴定法,淀粉-KI糊剂或试纸,当达到滴定终点时，溶液中稍过量 的NaNO2在酸性条件下氧化KI析出I2，I2遇 淀粉显蓝色。,滴定时，把淀粉-KI试液滴在白磁板上，用玻璃棒蘸取少量被滴定的溶液，在白磁板上划，如果立即出现蓝色即已到滴定终点。, KI在酸性条件下遇光能被空气氧化析出碘，所以，在没有达到终点时，就有可能呈现蓝色，而造成误判。 由于经常蘸取溶液进行试验，可造成滴定液的损失而带来误差。 方法难掌握。,二、非水溶液滴定法 脂烃胺侧链，具弱碱性,盐酸丁卡因、盐酸利多卡因和盐

15、酸布比卡因侧链烃胺的叔胺氮具有弱碱性，均可采用非水溶液滴定法测定含量。,改”冰醋酸+醋酐”,“盐酸溶液,用氢氧化钠滴定注直接滴定,电位指示,两个突跃点体积差”,改用HPLC法,取干燥的供试品适量（以消耗滴定液8ml为度），加入冰醋酸1030ml溶解（必要是可温热使溶解，放冷），若供试品为氢卤酸盐，应加入5%醋酸汞的的冰醋酸溶液35m，用高氯酸滴定液滴定至终点，并将滴定的结果用空白试验校正。,250,例 取标示量为0.3g的对乙酰氨基酚片10片，总重为3.3660g，称出44.9mg，置250ml量瓶中，加0.4氢氧化钠溶液50ml及水50ml，振摇15min，加水至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过。弃去初滤液，精密量取续滤液5ml，置100ml量瓶中，加0.4氢氧化钠溶液10ml，加水至刻度，摇匀，在257nm的波长处测的吸光度为0.583，按C8H9NO2的吸收系数 为715 计算本片剂的标示量%。,A型题,1盐酸普鲁卡因注射液中检查的特殊杂质是 A.水杨醛 B. 间氨基酚 C.水杨酸 D.对氨基苯甲酸 E. 氨基酚 2对乙酰氨基酚中检查的特殊杂质是 A.水杨醛 B. 间氨基酚 C. 对氨基酚 D.苯甲酸 E.苯酚,2 Ch.P.（2010）亚硝酸钠滴定法测定对氨基水杨酸钠的含量时，指示滴定终点的方法为（ ） A. 自身指示终点法 B. 永