第二章 快速的样品前处理技术.ppt

1、第二章快速样品前处理技术，基本概念通用方法固相萃取和固相微萃取，微波样品溶解技术等技术，基本概念，样品前处理=样品分析和测定前的一系列准备工作，包括：样品分选，清洗，均质，分馏，粉碎，均质，消化，提取，纯化，浓缩，衍生化等。萃取：从样品中分离待测组分的过程，如静态法、均质法、振荡萃取法和特殊装置萃取法；待测组分与杂质的分离过程，如固相萃取法、液-液分配法、化学处理法、低温冷冻提纯法等。浓缩、旋转蒸发和氮气干燥。固相萃取和固相微萃取固相半萃取固相微萃取固相微萃取固相半萃取固相微萃取固相微萃取固相微萃取固相微萃取固相微萃取固相微萃取固相微萃取固相微萃取固相微萃取固相微萃取固相微萃取固相微萃取固相微

2、萃取固相微萃取固相微萃取固相微萃取固相微萃取固相微萃取固相微萃取固相微萃取固相在固相萃取过程中，固相对分析物的吸附力大于样品母液的吸附力。当样品通过固相萃取柱时，分析物被吸附在固体表面，其他成分与样品溶液一起通过柱。最后，用合适的溶剂去除分析物。在2003版食品卫生检验方法标准系列中，有很多项目，特别是农药项目的预处理，一般采用固相萃取技术，经典的真空固相萃取设备。固相萃取的分类和一般操作程序，用于正相固相萃取的吸附剂是极性的，取决于目标化合物的极性官能团和吸附剂表面的极性官能团之间的相互作用，包括氢键、键相互作用、偶极-偶极相互作用、偶极诱导偶极相互作用和其他极性相互作用。反相固相萃取中使用

3、的吸附剂和目标化合物通常是非极性的或极性较小的，主要依靠非极性和非极性的相互作用，即范德华力或分散力。离子交换固相萃取是静电吸引固相萃取的一般操作程序，它依赖于目标化合物和吸附剂之间的相互作用：活化吸附剂、装载样品、洗涤和洗脱。课后，请比较一下2003年前后农药残留检测方法标准中的样品前处理步骤，谈谈采用固相萃取后检测时间可以缩短多少。固相萃取操作，固相萃取操作，样品20g，加入内标，剧烈摇动并静置10分钟，萃取，丙酮15毫升，液-液萃取：电磁搅拌2分钟和15分钟；静置分层(时间视情况而定)，加水300毫升氯化钠3克正己烷3.5毫升，小心吸出有机相，在40下用氮气吹干，用乙酸乙酯溶解，气相色谱

4、/质谱，微液-液萃取操作步骤，SPME发展历史，基于固相萃取，快速发展的新型环保样品前处理技术具有易于自动化、易于与色谱、电泳等高效分离检测手段相结合等突出优点。1989年，波里斯津于1993年提出，1993年实现了光纤-SPME的商业化，1996年实现了管内-SPME-气相色谱的商业化，1997年实现了光纤-SPME-高效液相色谱的商业化，1997年实现了光纤-SPME-气相色谱的商业化，1999年实现了管内-SPME-高效液相色谱的商业化，以及帕特桑德拉于2001年提出的SBSE技术，这是SPME SPME管内-气相色谱装置的一种新形式，就像一个微型取样器。它由支架和提取头或纤维组成。萃取

5、头是一根1英寸长的熔融纤维，涂有吸附剂(萃取阶段)，与不锈钢丝相连，并覆盖一根不锈钢细管(以防止纤维断裂)。纤维头可伸出或移进移出钢管，不锈钢细管可穿过橡胶或塑料垫圈进行取样或取样。手柄用于安装或固定提取头，可以永远使用。根据SPEM原理，当萃取达到平衡时，进入萃取阶段的分析物的量为：N=KfsV1 CO2/KfsV1 V2，其中co为萃取前样品中分析物的浓度；Kfs是分析物在萃取相和样品之间的分配系数；V1是萃取相的体积；V2的样品体积萃取原理是：相似相溶出机理，纤维-SPME-高效液相色谱，课后提问，与液-液萃取相比，固相萃取和SPME有什么优势？在应用中，有哪些限制？与液-液萃取相比，固

6、体萃取具有方便、试剂消耗少的优点。缺点是批次间的重复性很难保证固相萃取对液体样品有特别严格的要求。SPME的一次萃取水平远低于普通液-液萃取法，但绝对进样量一般大于液-液萃取法，灵敏度高，易于掌握。SPME的取样、提取和浓缩在一个简单的过程中同时完成。SPME商品纤维品种少，易断，有利有弊。大多数样品在液态下进行定量分析。因此，样品溶解技术的改革仍然是分析化学的一个重要研究课题。微波样品溶解技术是利用微波加速酸消解的技术。速度是常规消解法的10-100倍，具有溶样速度快、溶样效果好、重现性好、操作简单安全、易于控制和自动化、不易污染或损失的特点，微波溶样技术、分子内加热原理、离子传导和偶极旋转

7、机理同时发挥作用。样品消解过程中操作参数的选择非常重要。样品用量、酸用量、消化温度、压力和微波输出功率等因素。磁控管初始温度、加热时间、保持时间和最大输出功率的选择应根据样品与酸溶液反应的严重程度来确定。其他技术，使用含有干粉培养基和冷水可溶凝胶的细菌培养板进行微生物测定，减少了制备培养基的时间。涂条快速取样技术。用疏水网格滤膜过滤样品进行微生物检测时，可以方便地通过分子印迹或亲和层析进行计数并快速捕获目标。说明大肠菌群，1，2，3，4，5，6，平的，凹的，大肠菌群测试条是一个预先准备的含有VRB的培养基系统。覆盖在表面的粘性薄膜可以拦截大肠菌群发酵乳糖产生的气体。培养后，将红点周围有气泡的菌

8、落数作为大肠菌群数。培养物应在24小时和2小时后立即计数，这可通过目测、标准菌落计数、显微镜或自动判读仪进行计数。带有气泡的红色菌落被确认为大肠菌群的数量。圆形区域边缘和边缘以外的菌落不计算在内。当培养区有大量气泡，培养区有大量不明显的小菌落或暗红色时，表明大肠菌群浓度高，需要进一步稀释样品以获得准确读数。，3TM快速拭子，干取样当待测表面潮湿时，1。标记每个拭子，2。扭转管子，将灯泡的末端从拭子管子的接头处分开，以3的角度缓慢而全面地涂抹待测表面。30度，注意每次翻转棉签头的方向，4。取样后，将拭子完全放回试管中。用你的拇指折断它。一听到啪的一声，阀门就打开了，李德恩肉汤流进了管子，浸湿了涂

9、抹棒；6.用力挤压球茎的末端，使李德仁肉汤流入试管；7.在实验室中，充分摇动涂抹棒至少10分钟，以将细菌从涂抹棒中分离出来；8.挤出管壁上胶棒头的内容物，并按照工业上常用的标准方法处理胶棒。9.小心地将试管中的所有内容物倒入3M石化试片上。10.根据包装上的说明培养试件。3 m快速拭子，湿式取样。当待测表面干燥时，1。标记每个涂抹棒。4.扭转管子，将灯泡端与涂抹棒管的接头分开。在5点钟时，缓慢而全面地涂抹待测表面。30度。请注意每次翻转涂抹器头的方向。6.取样后，将涂抹器完全放回试管中。2.用你的拇指打破灯泡里的红色阀门。当你听到撞击声时，阀门打开，李德恩肉汤流入试管，浸透了涂抹器。3.用力挤压球茎的末端，使李德仁肉汤流入试管。7.在实验室中，充分振荡涂抹器至少10分钟。从涂片棒上分离细菌；8.挤出管壁上涂条头上的内容物，按照一般工业标准方法处理并丢弃涂条；9.小心地将试管中的所有内容物倒入3M石化试片上；10.根据包装中的说明培养试件。Hygicult琼脂玻片是一种塑料玻片，两面涂有琼脂培养基，用于特定细菌的生长，并根据欧盟(EU)的相关规定设计，用于检测各种表面、原料和食品原料中是否存在微生物(菌落总数、大肠菌群、霉菌和酵母菌)(其使用