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文档简介
1、干细胞的基础知识和应用,1,学习交流PPT,干细胞(stem cell )是具有自我复制、自我更新和多向分化能力的原始未分化(或不完全分化)细胞,是组织和器官发生、生长、修复和再生的源泉细胞、种子细胞。 在分化过程中,大部分细胞由于高度分化而完全丧失再分裂的能力,最终老化死亡的情况较多。 生物在适应过程中为了弥补这一不足,保留了一部分未分化的原细胞,这种原细胞被称为干细胞。 生理上需要时,这些干细胞可根据发育途径分裂产生分化细胞。 干细胞是什么? 2、学习交流PPT、干细胞的复制与分化3、学习交流PPT、干细胞分化影像4、学习交流PPT、干细胞是起源细胞,是形成人体内各种组织、器官的原型。 干
2、细胞可以成为人体内的任何细胞,在某些条件下可以分化成多个功能细胞。 例如肌肉、骨骼、肝脏、心肌、神经等200多种人体细胞、组织和器官。 干细胞广泛存在于人体的各种组织中。 例如早期胚胎、胎盘及其附属物、脐带血、骨髓血、外周血和成人组织等。 干细胞的特性,5,学习交流PPT,干细胞的用途非常广泛,涉及医学的许多领域。 组织工程:应用细胞生物学、生物材料和工程原理,研究开发用于修复或改善人体病损组织或脏器结构、功能的生物活性替代物再生医学:再生医学研究了生物正常组织特征和功能、创伤修复和再生机制以及干细胞分化机制,寻找有效的生物治疗方法, 研究干细胞的意义: 6、交流PPT,1、其发育阶段不同的分
3、类胚胎干细胞成体干细胞2、按其分化潜力大小分类全能干细胞多能干细胞、干细胞, 胚胎干细胞全能干细胞成体干细胞多能干细胞单能干细胞,7,学习交流PPT的原始程度最高,自我复制和分化活性最强,可分化为机体的所有种类的组织细胞,被认为是临床科学研究中最有价值的素材。 但是,从胚胎中提取干细胞会导致胚胎死亡,严重影响胚胎的发育,因此欧美等国对胚胎干细胞的研究受到社会伦理学的制约。 此外,在临床应用中,胚胎干细胞不能避免肿瘤、畸形等问题,因此胚胎干细胞的临床应用处于停滞状态。 学习胚胎干细胞,8,交流PPT,近年的科学研究表明,成体干细胞也可横向分化为其他类型的细胞和组织,为干细胞的广泛应用提供了基础。
4、 与胚胎干细胞相比,成体干细胞的原始程度和分化活性低,肿瘤畸形等风险低,临床副作用少,是目前临床上最常用的干细胞种类。 学习成体干细胞、9、交流PPT,多能干细胞具有分化多种细胞组织的潜能,但缺乏发育成完整个体的能力,发育潜能受到一定限制。 如“间充质干细胞”是目前临床应用范围最广的干细胞。 临床常用的多能干细胞来源包括脐血、脐血、骨髓、外周血、脂肪组织等。 学习多能干细胞,10,交流PPT,单能干细胞是分化活性最低的干细胞,这样的干细胞只能分化为一种或密切相关的两种细胞。 例如上皮组织的基底层干细胞,肌肉中的成肌细胞。 单能干细胞的提取非常困难,目前在临床上很难广泛应用。学习单能干细胞、11
5、、交流PPT,干细胞在某些条件下可分化为多种功能细胞和组织器官(如神经细胞、软骨细胞、肝细胞、心肌细胞等),以代替体内受损细胞达到功能重建的目的。 干细胞在分化过程中分泌各种细胞因子,促进修复过程的进行。 干细胞可以阻断或降低抗原呈递细胞的免疫活性,抑制t细胞的活性,使免疫系统产生调节作用。 适合自身免疫性疾病的干细胞治疗是指将功能和结构正常的细胞作为“药物”进入患者体内,利用干细胞的生物特性修复受损组织细胞和器官,以达到控制疾病和治愈的目的。 干细胞治疗在功能和结构上不能取代传统的组织器官,具有传统治疗方法难以达到的效果。 干细胞治疗机制,12,交流PPT,各种细胞损伤性疾病:肝硬化、小儿脑
6、瘫、脊髓损伤、中风后遗症、帕金森病、痴呆、皮肤烧伤、心肌梗死等。 免疫系统疾病:糖尿病、红斑狼疮、风湿病等。 血液疾病:(造血干细胞相关)再生障碍性贫血白血病骨髓增生性疾病等。 其他疾病:银屑病、亚健康、抗衰老等。 干细胞可治疗疾病,13,学交流PPT,目前干细胞所治疗的疾病种类有免疫疾病、心脏疾病、肝脏疾病、肺脏疾病、肾脏疾病、代谢疾病、神经疾病、器官移植后移植体宿主反应(GvHD )、人骨相关损伤及病变等干细胞可治疗疾病,14,交流PPT,1,1 体腔输入治疗3、血管介入治疗4、病变部位直接注射根据患者的情况,以一种或多种方式输入。 干细胞常用治疗方法,15,学习交流PPT,1,静脉输入可
7、以在干细胞临床治疗中放置静点用于所有疾病。 2、体腔输入(如中央脑室注射、蛛网膜下注射等)目前学习脑损伤治疗、干细胞常用治疗方法16、交流PPT,3、患病部位注射干细胞:使干细胞直接到达病变部位,提高局部细胞浓度,或使细胞到达原来难以到达的部位。 如股骨头坏死:直接注射关节腔内糖尿病足:沿下肢腓肠肌走向血管方向多点注射脊髓损伤:向损伤部位注射干细胞,干细胞常用治疗方法,17,交流PPT,4,介入治疗是利用现代高新技术手段进行的微创治疗,在血管、皮肤上建立直径数毫米的微通道, 在医学影像设备的引导下,经人体现有通道,将特制的导管、导丝等精密仪器导入人体病灶周围,导入人体病灶周围,目前干细胞在临床
8、上多采用血管内介入治疗器官损伤性疾病。 如肾病、肾功能衰竭:经肾动脉介入肝硬化:经肝固有动脉或门静脉介入糖尿病:经胰背动脉介入(1型和2型均可应用)、干细胞常用治疗方法、干细胞直接放入器官内18、学习交流PPT,干细胞显示出向特定创伤灶转移的特性,具有靶向性学习干细胞治疗的靶向性,19、交流PPT,恢复心肌梗塞修复损伤的心脏组织心血管血液循环功能避免心肌退化坏死避免心肌缺氧障碍增强心肌收缩功能增强心血流出量促进心肌血管增生, 肝脏疾病干细胞分化可成为肝脏细胞,促进肝细胞分裂增殖恢复肝脏正常功能修复肝脏纤维化,增加弹力,降低压力提高肝脏代谢功能,解毒功能降低氧化压力清除自由基,学习干细胞重大疾病
9、治疗成果,20,交流PPT, 脑病修复损伤神经组织修复坏死脑组织修复麻痹的肢体功能是促进血管增生扩张血管降低血压改善语言功能预防脑血管病的发生,糖尿病恢复正常血糖浓度降低糖化血红蛋白、胆固醇、 三酸甘油脂提高新陈代谢功能降低炎症因子浓度提高抗炎症因子浓度促进胰岛素生成提高细胞对胰岛素敏感性增加细胞的血糖吸收速度和能力、干细胞在重大疾病治疗上的成果21、交流PPT自身免疫疾病调节t细胞功能调节APC细胞功能调节b细胞功能调节NK细胞功能(自然杀手细胞) 促进体内正常细胞增殖恢复体内正常抗体功能,癌化疗后损伤脏器组织修复促进正常细胞增殖改善全身血液循环功能恢复红细胞、白细胞、血小板含量功能全面提高
10、造血功能调节自身免疫系统,增强免疫能力避免粘膜细胞损伤产生溃疡,学习干细胞的重大疾病治疗成果,22,交流PPT,在同种干细胞的前提下,细胞越原始,分化活性越高在同等条件下,病灶输入的细胞数越多,临床治疗效果越好。 干细胞体外扩增,可增加细胞数提高疗效,但培养过程对临床治疗也不利。 扩增过程是否必要,根据患者具体情况,根据临床经验判断。 干细胞临床应用规律为:学习交流PPT 23,由于体外细胞生长的微环境与体内不同,培养的细胞具有形态学特征,但无功能。 例如,扩增后的心肌细胞对没有收缩功能的神经细胞没有传导功能。 细胞传代复制后活性弱,接近末端细胞。 培养过程会提高成本。 细胞多次被复制的话会有
11、变异的问题。 体外扩增培养传代的代数不容易控制。 在体外培养中感染率增大。 细胞体外扩增培养存在问题24、学习交流PPT、胚胎骨髓外周血胎盘及附件(脐血、脐带)脂肪的其他相应组织、临床常用干细胞来源25、学习交流PPT、1、具有临床使用安全性2、细胞数多:目前干细胞数不到106以上,临床治疗就没有效果3、细胞活性强:临床最常用干细胞种类中,脐血干细胞活性骨髓干细胞活性外周血干细胞活性,临床使用干细胞应满足的条件,26,交流PPT,4,细胞种类留下所有干细胞,细胞治疗时各工种联合作战,各有分工,综合多兵种作战系统多细胞治疗就像集体军的战斗,就像营养配膳。 国外实验室研究表明:“细胞洗提太干净,不
12、利于临床治疗。“哪个细胞在临床治疗中起作用? 目前研究中,临床使用的干细胞应满足的条件有27,学习交流PPT,脐带血中含有丰富的造血干细胞和间充质干细胞的脐带血中造血干细胞(CD34 )所占的比例与骨髓相似。 而具有更强增殖和分化能力的脐血干细胞(尤其是其中高增殖潜能聚集形成细胞),原始脐血干细胞的自复制、增殖能力、刺激后进入细胞周期的速度及自分泌生长因子的能力也强于骨髓和外周血,学习、丰富人脐血干细胞的特性、28、交流PPT。 原始程度更高,包含免疫源性相对低、缺陷基因和容易导入保存传染病的可能性低的干细胞种类丰富的干细胞,脐血干细胞占优势,29,容易学习交流PPT,产妇不满35岁,分娩过程
13、顺利的妊娠36-42周产妇的发育营养正常的妊娠期没有严重的并发症脐血采集对产妇要求,30,学习交流PPT,1,产妇有输血史2 .孕期少于37周或多于42周3 .胎盘剥离超过12小时,胎膜早破超过24小时4,羊水检查发现染色体异常5,产妇感染,有发热6,胎儿呼吸窘迫,羊水、在任何情况下产妇不应采集脐带血31、学习交流PPT、胎儿右腿出来后,止血钳分别在距脐蒂侧约5cm和8cm处夹住脐带,在止血钳之间切断脐带。 2 .在脐带母体侧断端确定脐静脉穿刺采血部位,沿脐静脉断端的针尖斜面向下穿刺脐静脉,可以用止血钳将针尖固定在脐带上。 脐带血的采集方法、32、交流PPT、3、打开采血包与针尖之间的输液管夹
14、,将脐带血注入采血包,继续轻轻摇动采血包,将抗凝剂与脐带血充分混合,使采血包保持在低位。 为了增加采集量,可以从胎盘侧断端压迫脐带。 采集量一般高于60ml,最好在100ml以上。 4 .将采集的脐血放入4-10冰箱暂时保存,没有冰箱的室内暂时保存不得超过24。 放置15小时以上后不能用于分离。 学习交流PPT、流式细胞术(FCM ),利用流式细胞仪对快速、直线、流动状态的单细胞或生物颗粒进行多残奥、快速定量分析,同时筛选特定群体的现代细胞分析技术。 免疫磁珠法(MACS )是核在磁珠表面包复有免疫反应性的抗体进行抗原抗体反应,在细胞表面形成玫瑰花结,这些磁珠结合的细胞一旦置于强磁场下,就与其
15、他未结合的细胞分组。 密度梯度离心法采用一定的介质在离心管内形成连续或不连续的密度梯度,将细胞悬液或匀浆置于介质顶部,通过重力或离心力场的作用使细胞分层、分离。 负收集法是以不需要的细胞为目标细胞,用Lin抗体络合物收集,残留Lin阴性细胞,再用密度梯度离心法除去残留红血球等,得到干细胞。 常用干细胞分离方法,34、交流PPT、35、交流PPT、1、每次脐血采集50ml以上(不含抗凝剂的量)、小于50ml的脐血不能用于分离。 2 .胎儿出产时胎盘钙化的脐带血不能采用3 .脐带血采集后放置时间超过15小时者不能采用4 .脐带血采集后出现溶血者不能用于细胞分离。、细胞分离对脐带血质量的要求、36、
16、学习交流PPT、1、严禁x射线照射2 .干细胞产品应尽快返送,避免影响细胞活性3 .干细胞输血时必须使用血供器,按输血规则操作4 .输血前、中、后患者体温、脉搏、呼吸, 血压检查5 .回收细胞产品时,首先用0.9%氯化钠20-30ml打孔,开始进口细胞时保持20-30滴/分,30-50滴/分如果没有不良反应就可以增加,在细胞回收过程中每15分钟轻轻摇动细胞袋进行干细胞还原有高度过敏体质或重症过敏史者休克或全身不全生命体征异常及检验者不适合恶性肿瘤患者全身感染或局部重症感染的抗感染恢复后应用凝血功能障碍如血友病患者重症脏器功能障碍者在诊断上尚不明确者个别期望值过高。 学习干细胞应用禁忌,38,交流PPT,建院于1949年被国防部授予“艰苦奋斗二六一医院”称号的三级乙等医院
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