药物血浆半衰期的测定实验报告

1、药物血浆药物血浆半衰期半衰期的测定实验报告的测定实验报告 【实验目的】 掌握药物半衰期的测定方法 【实验原理】 药物消除半衰期是血浆药物浓度下降一半所需要的时 间。其长短可反映体内药物消除速度，根据半衰期可确定给 药间隔时间。按一级动力学消除的药物，其血浆半衰期是一 个固定的值，不受药物初始浓度和给药剂量的影响，仅取决 于值（一级动力学的消除速率常数）的大小。 /=. 磺胺嘧啶（SD）的测定原理：磺胺类药物为氨基苯类化 合物，在酸性溶液中可与亚硝酸钠起重氮反应生成重氮盐， 此盐在碱性溶液中与麝香草酚溶液起偶联反应形成橙红色 偶氮化合物，将该化合物在 525nm 波长下比色，其光密度与 磺胺类药

2、物的浓度成正比（朗伯比尔定律） 。 【实验对象】 家兔。体重 1.52.5kg。 【实验试剂】 10%磺胺嘧啶钠， 肝素， 7.5%三氯醋酸， 0.5%麝香草酚， 0.5%亚硝酸钠，蒸馏水。 【实验器材】 离心机， 分光光度计， 离心管， 试管， 注射器， 移液管， 吸球，烧杯，玻璃棒。 【实验方法】 (1) 取药前血 取家兔 1 只称重，0.5%肝素生理盐水润湿注射器和抗凝 瓶，由耳缘静脉取药前血 2ml（空白对照）于抗凝瓶内。 (2) 给药 由一侧耳缘静脉注射 10%磺胺嘧啶钠溶液 3ml/kg（药物 浓度为 200mg/10ml）准确记录给药结束时间。 (3) 取药后血 分别于给药后 5

3、min 和 35min，取另一侧耳缘静脉血各 2ml 分别置于抗凝瓶内（每次取血后，洗净注射器并用肝素 生理盐水湿润备用） 。准确记录实际采血时间。 (4) 测定血液样本 SD 浓度 3 次血液样本各准确吸取 0.2ml， 分别加至编号的含 7.5% 三氯醋酸 2.8ml 离心管中，混匀。3000r/min，离心 10min。 准确吸取离心管各管上清液 1.5ml，分别至相应编号的 试管中。 各管分别加入 0.5%亚硝酸钠溶液 0.5ml， 充分混匀； 再加入 0.5%麝香草酚溶液 1ml，混匀。 以给药前的空白管作参比， 使用分光光度计在 525nm 波 长处测定各管光密度值，按下列公式计算

4、血中 SD 浓度。 血中血中 SD 浓度（浓度（/）= 样品 样品 标准品 标准品 (5) 半衰期的计算 1/2=0.693 = 2.303 斜率 斜率 = (log1 log2)/ 代入上述公式： /= . ( )/ 公式中 T 为给药后两次取血的间隔时间，1、2分别为 给药后两次取血的血浆药物浓度。 (6) 计算零时浓度（0） = (. /) (7) 计算表观分布容积（） = / 计算本次实验的半衰期、预期零时浓度及表观分布容积。 【注意事项】 1、 采血量要准确。采血时可用食指轻弹兔耳根部，使兔耳 充血后有助于家兔耳缘静脉取血。若耳缘静脉采血不畅， 可用刀片划破耳缘静脉采血或心脏取血。

5、若未能及时采血， 须以实际采血间隔时间代入公式计算。 每次采血应避免采 血器械交叉污染。 2、 离心管及试管要注意标记编号，以免实验操作中混淆。 3、 血液样本 SD 浓度测定时，注意所加溶液的正确顺序。 【思考题】 测定药物血浆半衰期有何临床意义？ 原始数据原始数据 体重：2.7kg 给药：8.1ml 给药结束时间：15：34 第一次取血结束时间：15：52 第二次取血结束时间：16：44 1=18min，2=70.7min，T=52.7min 实验室实验室结果结果 组别组别 OD 值值 5min 35min 1 0.545 0.452 2 0.327 0.270 3 0.753 0.460

6、 4 0.590 0.328 5 0.822 0.924 6 0.920 0.719 7 0.582 0.413 8 0.913 0.784 本组实验数据为第 8 组数据，实验数据处理如下： 1/2= 0.301 (log913log784)/52.7 =231.5min = (. .) =963.5g/ml =60/963.5=0.062l/kg 思考与讨论：思考与讨论： 实验过程中，存在一些因素使药物浓度降低，进而影响 半衰期大小，这些因素可能是： 1. 加三氯醋酸过程中未立即摇匀，出现凝血块，血液样本中 少量药物可能与蛋白结合被沉淀。 2. 给药过程中，有少许药物流落未注入耳缘静脉。 3. 注射器取血、释血过程中残留少许全血于器壁。 此外，采血过程中，2 次采血时长（18min，52.7min） 均超过规定时长（5min，35min）血药浓度会因药物代谢的 变化而产生较大误差，再者，在吸取上清液的过程中，不慎 吸入少量沉淀物，沉淀杂质影响药物浓度测量。 本组药物 SD 浓度值变动不大，可能是比色皿里的溶液 混合不均匀，或是受残余药物的影响，也可能是从吸取上清 液至比色的过程中， 上清液浸于酸性、 碱性溶液的时间较短、 混合程度不够，影响药物相关