药物杂质检查-一般杂质检查

1、药物的杂质检查,引入阿司匹林的检查项,检查什 么？,内容,概 述,解决以下四个问题？,1、什么是杂质？ 2、药物中杂质从哪里来？ 3、杂质如何分类？ 4、杂质的检查方法有哪些？如何计算?,什么是杂质？,1.有毒副作用的物质 2. 本身无毒副作用，但影响药物的稳定性和疗效的物质 3.本身无毒副作用，也不影响药物的稳定性和疗效，但影响药物的科学管理的物质,药物纯度,杂质的来源,生产中引入 原料 中间体 副产物 降解产物,两大来源,贮藏过程中产生 水解 氧化 分解 异构化,杂质的分类,T,氯化物 硫酸盐 铁盐 重金属 砷盐 水分 易炭化物 炽灼残渣 有机溶剂残留等 收载在中国药典的附录中,某一个或某

2、一类 生产或贮藏过程 引入的杂质 收载在正文项下,杂质检查方法,对照溶液比较 平行实验 不知道准确的量,不需要对照溶液 反应的灵敏度 阴性反应,不需要对照溶液 吸光度、旋光度、pH值等实验指标 不超过规定限量,对照法,比较法,灵敏度法,杂质检查方法杂质限量计算,杂质限量计算对照法实例,对乙酰氨基酚中氯化物限量计算,方法：取对乙酰氨基酚2.0g，加水100ml，加热溶解后，冷却，滤过，取滤液25ml，依法检查，所发生的浑浊与标准氯化钠溶液5.0ml(每1ml相当于10g的Cl)制成的对照液比较，不得更浓。 问：氯化物的限量是多少？,限量为0.01%,课堂活动,取葡萄糖4.0g，加水23ml溶解后

3、，加醋酸盐缓冲液(pH4.5)2ml，依法检查，含重金属不得超过百万分之五（5ppm）。问应取标准铅溶液（每1ml相当于10g的pb）多少ml?,2.0ml,一般杂质检查法,一般杂质检查法,葡萄糖中氯化物的检查,1、检查什么杂质、意义 2、采用什么方法？ 3、实验原理？ 4、操作步骤、 结果判定 5、特殊试剂的用途 6、注意事项,如何学习？,葡萄糖中氯化物的检查,葡萄糖中氯化物的检查,氯化物检查法,1. 原理 比浊法氯化物在硝酸酸性条件下与 硝酸银反应, 生成氯化银白色浑浊。 Cl-+Ag+ H+ AgCl,样品管,对照管,1.0mL,用水稀释至50mL,6.0mL,0.60g,0.010%,

4、(浓度：10gCl/ml),操作方法(对照法),3. 结果观察方法 暗处放置5min (避免AgCl分解),氯化物检查法,供试溶液所显乳 光浅于对照溶液,符合规定 （不符合规定）,课堂活动,硝酸在氯化物检查中所起的作用？ 方法中，标准氯化钠的最佳用量是多少ml?为什么？ 简述内消色法的操作过程,假设：葡萄糖中的氯化物限量是0.001%,根据所学的知识，请你设计实验方法（供试品的取样量和标准氯化钠溶液的用量）,为了保证样品管与对照管的反应条件一致,要求样品管与对照管要平行操作平行试验.,平行试验,注意事项及讨论,氯化物检查法,加稀硝酸的目的,加速氯化银混浊的生成,产生较好的乳浊； 避免产生碳酸银

5、、磷酸银沉淀； 避免氯化银氧化成氧化银。,氯化物检查法,用量10ml为宜,有颜色样品的处理内消法,重金属检查法,定义重金属是指在实验条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠作用显色的金属杂质(Ag, Pb, Hg, Cu, Cd, Sn, Bi等），以铅为代表,什么是重金属？,重金属检查法,重金属检查法,2010年版ChP收载3种方法: 第一法 硫代乙酰胺法 第二法 炽灼后的硫代乙酰胺 第三法 硫化钠法,原理： CH3CSNH2 + H2O CH3CONH2 +H2S H2S = 2H+ + S2 Pb2+ + S2 PbS（黄-黑色）,第一法 硫代乙酰胺法,标准液：取Pb(NO3)2，先配成储备液(为防

6、水 解），临用时再稀释成10ugPb/ml 标准液浓度：以1020ugPb/27ml为宜,注意事项：,本法合适的酸度为pH3.0-3.5 供试品溶液有色：在对照管中加少量稀焦糖溶液，（也可加其他无干扰的指示剂等）使两管色调一致。如果外消色法不能消除干扰，可采用内消色法 供试品含有微量Fe3+ ：会氧化H2S析出S，可加VitC 0.5-1.0g，使Fe3+ Fe2+，同时在对照管中加等量的VitC，再依法测定,第二法 炽灼破坏后硫代乙酰胺法,应用范围：适合于含芳环或杂环等能与重金属离子形成配位化合物的有机药物 方法：采用三酸处理，然后按第一法测定 取炽灼残渣项下遗留的残渣（H2SO4处理） 残

7、渣+HNO3加热处理，蒸干 残渣 残渣+HCl 溶解加热蒸干（除残留HCl） 残渣+水溶解，加氨试液调pH至中性移至比色管中, 按第一法检查,标准管同法处理(空白)。 炽灼温度应控制在500600C 含钠或氟有机物（安乃近、诺氟沙星）炽灼时会腐蚀瓷坩埚，改用铂或石英坩埚,第二法 炽灼破坏后硫代乙酰胺法,马弗炉,第三法 硫化钠法,在碱性条件下，以硫化钠为试液，适合于不溶于稀酸而溶于碱的药物 方法：取供试品适量+NaOH+H2O溶解+Na2S试液，与一定量标准铅液同法处理后的颜色比较 注意：硫化钠试液对玻璃有腐蚀，久置产生絮状物，应临用新配,第四法：微孔滤膜法,结果判断： 1、2、3法浅于对照溶液

8、管；4法斑点颜色浅于标准铅斑。,适合于含重金属2-5g或有色溶液的药物的重金属检查,课堂活动及作业,自学：硫酸盐检查法 铁盐检查法 砷盐检查法,自学情况检查,1.硫酸盐检查的目的、方法及检查原理？ 2.硫酸盐检查的对照溶液、浓度、最佳取样量？ 3、盐酸在检查中所起的作用？,1.铁盐检查的目的、方法及检查原理？ 2.铁盐检查的对照溶液、浓度、最佳取样量？ 3.过硫酸铵在检查中所起的作用？,硫酸盐的检查,原理：SO42 + Ba2+BaSO4(白色浑浊) 与一定量标准硫酸钾溶液按同法操作所得结果比较 酸及酸度：加稀HCl使成酸性，可防止BaCO3,Ba3(PO4)2 形成。 SO42的浓度：0.1

9、0.5mg SO4 /50ml为宜，相当于标准硫酸钾溶液（0.1mgSO4/ml ）1.05.0ml。,注意：溶液浑浊或有色的处理方法： 与Cl检查法相似,铁盐检查法,原理：Fe3+ +6SCNFe(SCN)63（红色） 反应在HCl酸性中进行，可防止Fe3+水解 Fe3+的浓度：1050g Fe3+/50ml为宜，相当于标准硫酸铁铵溶液FeNH4(SO4)212H2O 1.05.0ml (10gFe3+/ml) Fe的存在形式： Fe2+无此反应，需加入氧化剂过硫酸铵氧化Fe2+ Fe3+，同时防止硫氰酸铁分解。或加硝酸处理，但需加热煮沸除去NO,供试品,显色，立即与同法制成的对照溶液比较,

10、铁盐检查法,注意事项,标准硫酸铁铵配制时为防止水解，需加适量硫酸 反应可逆，加过量试剂可提高反应灵敏度。同时可消除一些阴离子（Cl，PO43，SO42，枸橼酸根）与Fe3+ 形成有色配位物而引起的干扰 供试品与对照品色调不一致或呈色浅：可加正丁醇或异戊醇提取 环状结构的有机药物：需经炽灼破坏后测定,砷盐检查法,古蔡法,二乙基二硫代 氨基甲酸银法 （Ag-DDC）,古蔡法装置,Ag-DDC法装置,砷盐检查法古蔡法,AsO33+3Zn+9H+ AsH3+3Zn2+ +3H2O AsH3+ 2HgBr2 (试纸) 砷斑 与2ml标准砷溶液同法操作。 砷斑： As(HgBr)3 (黄色) AsH(Hg

11、Br)2(棕色) As2Hg3 (棕黑色),标准砷液（As2O3溶液，1gAs/ml） 药典规定取2ml制备标准砷斑。,KI和SnCl2的作用,KI的作用： AsO43+ I AsO33+ I2 4 I+ Zn2+ ZnI42 SnCl2的作用: I2 + Sn2+ 2 I+ Sn4+ AsO43+ Sn2+ AsO33 + Sn4+ SnCl2 + Zn Zn-Sn齐 SnCl2和KI还可抑制SbH3(锑化氢)的生成,五价砷还原成三价砷,二乙基二硫代氨基甲酸银法(Ag-DDC法),AsH3+ 6Ag(DDC) +3吡啶 As(DDC)3 + 6Ag(胶态) +3吡啶HDDC,显色在2小时内稳

12、定，重现性好 含锑药物不干扰测定 用于砷盐的限量检查和微量砷盐的含量测定,二乙基二硫代氨基甲酸银法(Ag-DDC法),注意事项,检验药品需要进行有机破坏后再进行砷盐检查，标准溶液应照供试品项下同法进行处理 所用仪器与试液用本法检查，无不生成砷班 制备标准砷斑和标准砷对照液，应与供试品检查同时进行,课后作业,准备内容：项目标准、仪器与试药，检测步骤，结果判断,(参考资料：教材P61、中国药典二部；中国药典检验标准操作规范),准备实训项目五 ：葡萄糖中氯化物的检查,溶液颜色检测,控制药品在生产和贮藏中过程中产生的有色杂质,与规定色调色号的标准比色液进行比较,溶液颜色检测,比色用重铬酸钾、比色用硫酸

13、铜、比色用氯化钴,溶液颜色检测,无色用什么作为对照溶液？棕红色2号标准标准比色液如何配制？,“无色”系指供液品的颜色相同于所用的溶剂，“几乎无色”系指浅于用水稀释1倍后相应色调的1号标准比色液,炽灼残渣检查,定义：系指有机药物经炭化或挥发性无机药物加热分解后，高温炽灼所产生的非挥发性无机杂质的硫酸盐。 方法：供试品置恒重的坩埚中，缓缓炽灼至炭化，放冷后加硫酸湿润，低温加热至硫酸蒸气除尽后，于高温（700800）炽灼至完全灰化，放冷，称重，再炽灼至恒重 限量一般控制在0.1-0.2%，取样量为1-2g,马弗炉,对乙酰氨基酚,炽灼残渣检查,干燥坩埚：17.3314g，继续干燥坩埚：17.3312g

14、 装入对乙酰氨基酚总重：19.1834g 炽灼后总重：17.3329g，继续炽灼后总重：17.3328g,请计算!,注意事项,遗留的炽灼残渣需留作重金属检查时， 炽灼温度应控制在500-600C 炽灼至恒重的第二次称重应在规定温度继续炽灼30分钟以上 恒重连续二次称重重量差0.3mg 含氟、钠药物对磁坩埚有腐蚀，应采用铂坩埚,干燥失重检查法,干燥失重：是指药物在规定的条件下经干燥后所减失的重量。主要指水分，也包括其他挥发性杂质。,干燥失重检查法,鼓风烘箱,减压烘箱,扁形称量瓶,减压玻璃干燥器,干燥剂干燥法(常温减压干燥法),本法适用于受热易分解或易升华的药物。 将样品置干燥器内干燥至恒重,常用

15、干燥剂有： 硅胶、硫酸、无水氯化钙、五氧化二磷等。 其中五氧化二磷吸水效力最强，但P2O5吸水后产生H3PO4，若样品对酸不稳定，可能会受影响,有机溶剂残留测定法,残留溶剂：在合成原料药，辅料或制剂生产的过程中使用的，但在工艺中未能完全除去的有机溶剂。,有机溶剂残留测定法,主要的有机溶剂：苯、三氯甲烷、1,4-二氧六环、二氯甲烷、吡啶、甲苯、环氧乙烷,气相色谱仪,有机溶剂残留测定法,色谱系统与系统适用性试验 以直径为0.250.18mm的二乙烯苯-乙基乙烯苯型高分子多孔小球作为固定相，柱温为80170；并符合下列条件： 用待测物的色谱峰计算的N应大于1000； 内标物与待测物的两个色谱峰的R1.5； 每个标准溶液进样5次，所得待测物与内标物峰面积之比的RSD5%； 若以外标法测定，所得待测物峰面积的RSD10%,有机溶剂残留测定法,1、什么是顶空进样法？ 2、什么时候选择顶空进样法进样？,顶空进样装置,注意事项,内标物的选择：二氧六环与吡啶、苯和甲苯、三氯甲烷与1，2-二氯乙烷可互为内标 进样方法选择：用溶液直接进样法测定时，药物本身会给系统带来干