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文档简介
1、复习基因工程专题,基因工程,通俗地说,就是按照人们的意思提取一种生物的某些基因并加以改造,放入另一种生物的细胞中,定向地改造生物的遗传特性。基因工程概念,DNA重组技术或基因接合技术,体外、遗传重组,人类需要的生物类型和生物产品,定向改造特性,物种边界破裂,切割接合导入检查表达,DNA重组技术的基本工具,“分子手术刀”-“分子缝合针”-“分子缝合针”,1,来源:3,角色:4,结果:两个茄子端形成,可用于目的基因和载体的切割,2,特性:限制酶酶,不是酶。1,限制酶“分子手术刀”,A,T,磷酸二酯键,粘性末端,粘性末端,EcoRI限制酶切割,平面端平面端,SmaI限制酶切割,在识别序列的中心轴上限
2、制酶切割时切割的DNA两个单链切割是扁平的。这种切削称为平头端。范例1。对基因工程内限制性内切酶的以下说明是()A的限制性内切酶只能识别特定脱氧核苷酸序列B限制内切酶的活性。c限制性内切酶能识别和剪切RNA D限制性内切酶。原核生物,C,1,种类:2,作用部位:磷酸二酯(粘端),(粘端和端),两个DNA片段必须具有徐璐互补的粘端才能聚合。DNA连接酶缝合可以“缝合”粘性末端之间的缝隙。、DNA连接酶和DNA聚合酶是同一种吗?a t g,c,a,a,t,t,a,a,t,t,t,DNA聚合酶的作用可以催化磷酸二酯键的形成。都是蛋白质。不需要。形成完整的重组DNA分子,形成,在现有核酸片段上添加单个
3、脱氧核苷酸,磷酸二酯结合,DNA相关酶,1下图显示了DNA分子在不同酶的作用下发生的变化。图中,限制性核酸内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、海选酶作用的确切顺序依次为()、A B C D、C,目的基因,2,作为常用载体,质粒,噬菌体衍生物,动植物病毒,3,作为载体,在宿主细胞内必须具备的条件有多个限制酶切割点,便于与外源基因连接。用于重组DNA检测和识别的特殊遗传标记基因,标记基因的存在,可以用含有青霉素的培养基来识别。有可与克隆和插入目的基因一起克隆的切割部位,有暴露的质粒,简单的结构,独立于细菌的准核DNA,有自我复制能力的小双链环DNA分子。,装载最多的体质,前所未有的1。关于染色体和
4、质粒叙述的正确的是:()A染色体和质粒化学的本质都是DNA B染色体和质粒都只存在于原核细胞中的C染色体和质粒都与生物的遗传相关的D染色体和质粒都是基因工程共同载体,C,2,基因工程基本操作程序,编码区,非编码编码区下游,编码蛋白,没有启动子就不能转录基因。RNA聚合酶:可以识别启动子上的结合部位,并识别结合的蛋白质。终结器:基因末端的特殊DNA片段会阻碍RNA聚合酶的移动,并从DNA模型链中分离出来,从而结束转录。(阿尔伯特爱因斯坦、美国电视电视剧、美国电视电视剧、成功、编码区、非编码区、非编码区、)真核细胞的基因结构,编码蛋白质的顺序称为埃克森,知识点2:基因工程基本操作的第4阶段,1,获
5、得目的基因,2,构建基因表达载体,3,将目的基因引入受体细胞,4,目的基因检测和鉴定,1,目的基因主要是基因库构建方法,(1)直接分离法(总法),某种生物的单链mRNA,单链互补DNA,双链cDNA片段,储存在受体上,连接到载体上2。基因组DNA文库与cDNA文库的比较,2 .基因组文库和一些基因文库的比较,小,大,无,是,无,是,某些生物的某些基因,某些生物的所有基因,是,某些基因,概念:PCR全部,前提条件:_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。原料:_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
6、、氢键、单链DNA、双链、DNA链、变性、退火、扩展三阶段曲线、变性:9095双链DNA解体加热单链DNA退火:5560部分冷却引物和模板单链DNA的特定补充部分匹配和耦合扩展:7075加热4茄子脱氧核苷酸、(c)人工合成获取目的基因,人工合成,(基因序列已知的较小),DNA合成器,质粒,目的基因,限制酶处理,2。基因表现矢量的组成:它们的作用是什么?A,目的基因,B,启动子,C,终止符,D,标记基因又利用DNA连接酶连接目的基因和载体。两种酶作用的化学键都是磷酸二酯结合启动子(DNA片段)开始密码子(RNA)。终结器(DNA片段)告诉我们如何终止密码子(RNA),第三,将目的基因导入受体细胞
7、,(1)转换:(2)方法,将目的基因导入植物细胞,目的基因导入动物细胞,目的基因导入微生物细胞。和在受体细胞内维持_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _的过程,受体细胞,稳定,表达,(1)农杆菌转化法,1,植物细胞中有目的基因,(2)基因枪法,(3)花粉管通道法,被子植物,方法:糙米司法程序:目的基因表达载体纯化,受精卵(受精卵)糙米公司受精卵将新型动物,2,目的基因导入动物细胞,用Ca2处理,细菌细胞壁通透性增加,4,目的基因的检测和鉴定,检查,导入检查:目的基因是否引入受体细胞,方法,DNA分子杂交、表达检测、转录检测分子杂交、翻译检测抗原抗体杂交、分子检测方法、含有鉴定目的基因的
8、DNA片段标记为放射性同位素等,可以制作探针。使探针和转基因生物基因组杂交,出现杂交带,表明染色体插入染色体DNA。基因工程基本操作程序摘要,获取目标基因,在基因库中使用PCR化学方法对基因表达载体的目的基因、启动子、终止符、标记基因、目标基因导入受体细胞农杆菌转换法,显微司法目的基因检测和鉴定检查:插入与否,转录,翻译鉴定:1,已知序列信息的情况牙齿过程是通过在细胞内起作用的作用实现的。DNA解旋,解旋酶,PCR,DNA克隆,氢,(3)温度降低时,引物和模板端结合,在DNA聚合酶的作用下沿引物键延伸,最终合成两个DNA分子,牙齿过程的原料遵循以下原则:(4)BD是抗虫棉的栽培过程,过程中常用
9、的方法是确认目的基因(抗虫基因)在被引入受体细胞后是否能稳定和表达遗传。要做检查和鉴定工作。请写下对个体生物学水平的鉴定过程。4茄子脱氧核苷酸,碱基互补配对原则,农杆菌转换方法,允许害虫吞噬基因操作。第三,基因工程应用节目、疾病抵抗、抵抗、生长速度、质量、药物、器官移植、转基因动物进入哺乳期后,可以分泌乳汁,生产必要的药品,这称为乳腺生物反应器或乳腺生物反应器。刘邦生物反应器,刘邦生物反应器的优点:产量高;质量好,容易提取低成本。将药物蛋白、刘邦蛋白基因的启动子、微注射、受精卵、1、基因治疗概念:基因治疗、正常基因导入患者体内,发挥其表达产物的功能,达到治疗疾病的目的,是治疗遗传病的最有效手段
10、。(将特定外源基因导入有基因缺陷的细胞,达到治疗疾病的目的),2,例如,将腺苷酸脱氨酶基因转移到患者的淋巴细胞,然后将牙齿淋巴细胞转移到患者体内。,治疗严重的复合性免疫缺乏症,第三,原则,患者细胞中既包含缺陷基因,又包含通过引入基因工程的正常基因,因此患者体内两个基因都存在并可以表达。正常基因的表达产物掩盖缺陷基因的表达产物,治疗有基因缺陷的疾病。4,基因治疗类型,5,基因治疗发展现状:初步临床试验阶段,基因诊断,概念,放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子作为探针,利用DNA分子杂交原理对测试样本的遗传信息进行鉴定,达到了检测疾病的目的。D,对基因工程应用的以下叙述,()A基因治疗正常基因诊断有基因缺陷的细胞B基因的基本原理是,DNA分子杂交C基因探针只能检测水体中的一个病毒D原核基因。不能用于真核生物的遗传改良。4、蛋白质工程的兴起、1、蛋白质工程的兴起原因、基因工程产品基因工程原则上,这些天然蛋白质是生物在器官进化过程中形成的,其结构和功能符合特定物种的生存
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