气相色谱法测定血清中丙戊酸钠浓度.ppt

1、气相色谱法测定血清中丙戊酸钠浓度,主讲人：毛琼琼 2012年3月30日 彭海洲 宋飞,丙戊酸钠 简介,分析背景,分析步骤,思考题,谢谢 观看,参考文献,丙戊酸钠,常用剂型,原发性大发作和 失神小发作的首选药 广谱抗癫痫药,片剂：200mg规格 糖浆剂：300ml规格,注射剂: 每瓶内含400mg近白色 的无菌丙戊酸钠冻干粉, 随附1支4ml注射用水,丙戊酸钠Sodium Valproate 别名 抗痫灵,丙戊酸钠 简介,分析背景,分析步骤,思考题,谢谢 观看,参考文献,分析背景,监测方法很多, 目前以免疫测定法 高效液相色谱法(HPLC) 等,缺点,找一种分析方法可以满足临床检测血丙戊酸钠浓度

2、的要求,临床上使用的大多数 抗癫痫药物, 均需要进行治疗药物 监测( TDM),抗癫痫药物丙戊酸 钠,操作程序复杂, 分析流程长, 费用昂贵, 不利于临床推广 应用。,药物分析人员,气相色谱法GC,测定血清中丙戊酸钠浓度,丙戊酸钠 简介,分析背景,分析步骤,思考题,谢谢 观看,参考文献,仪器与试剂 样品处理 色谱条件,GC对血清中丙戊酸钠浓度分析步骤,线性关系与检测限 精密度 回收率,讨论,GC-15A 气相色谱仪, 氢火焰检测器,C2R4A 色谱工作站(shimadzu 产品) 、 LXJ2 离 心沉淀机(上海医疗器械三厂),仪器,样品,仪器与试剂,丙戊酸钠提取液 丙戊酸钠标准溶液,试剂,高

3、纯氮气和高纯氢气。 硫酸、三氯甲烷(长沙试剂公司) , 丙戊酸钠(VPA) 、苯酚 (Phenol ,Sigma 公司产品) 。,GC-15A 气相色谱仪,氢火焰检测器,离心沉淀机,样品处理,色谱条件,取3 ml 全血于5 ml 速凝管内,离心, 取上层血清0. 5 ml 于5 ml 的玻璃离心管内,加50l 5 mol/ L 的H2SO4和0. 5 ml 提取液,加盖,振荡提取1 min ,3 000 r/ min 离心5 min。取1l 氯仿液于气相色谱仪上进样(图1 图4) 。从图1 可知,6 min 保留时间(RT) 便可以完成血清丙 戊酸钠浓度的检测,炉温170 ,氢火焰检测器 温度

4、220 , 进样器温度220 , 氢气流速40 ml/ min , 氮气 流速35 ml/ min , 空气流速500 ml/ min,讨论,本研究中丙戊酸钠和内标苯酚的峰距较大, 不利于控制气相色谱仪工作时各参数的微小变动所产生的误差。,建立气相色谱法定量测定血清中抗癫痫药丙戊酸钠浓度的关键,在于寻找合适的内标准物质。,为注意将收集到的临床标本 置于4 冰箱中保存,实验证明 此条件下,一周内对样品的 测定结果没有影响,在加入丙戊酸钠提取液, 离心时常常由于样品中蛋 白质含量过高,仍不能分离, 此时可用微量加样器沿壁搅动, 再离心,以达到分离的效果。,使用微量进样器时, 应该保持干燥, 否则会

5、使测定的峰变宽, 延迟出峰时间,参考文献, 1 朱伊. 高效液相色谱法测定人血清中丙戊酸钠含量分析J . 福 建医药杂志,2001 ,23 (4) :1272128. 2 陈坚,方维军,吴芳,等. 高效液相色谱法测定丙戊酸血药浓度 J . 上海医院药学, 2000 ,11 (3) :33235. 3 程玲,罗雯红,李慧,等. 高效液相色谱法测定癫痫病人血清中 丙戊酸的浓度J . 汕头大学医学院学报,2000 ,13 (3) :73274. 4 张敬军,俞丽云,瞿治平. 高效液相色谱法测定癫痫病人血清中 丙戊酸的浓度J . 中华神经科杂志,1999 ,32 (1) :57258. 5 郁健, 王

6、广基,杜春波. 高效液相色谱法测定癫痫病人血清中丙 戊酸的浓度J . 中国药科大学学报, 1998 , 29 (1) :45246. 6 郑惠良,祁元明,杨莹. 高效液相色谱法测定癫痫病人血清中丙 戊酸的浓度J . 河南医科大学学报,1997 ,32 (4) :78279. 7 Kreher U , Darius J , Wien F. Establishing individual metabolite patterns for patients on valproate therapy J . Drug Metab Phar2 macokinet , 2001 ,26 (122) :992107. 8 Gopaul SV , Farrell K, Abbott FS. Gas chromatography/ negative,丙戊酸钠 简介,分析背景,分析步骤,思考题,谢谢 观看,参考文献,思考题,怎样寻找合适的 内标准物质？,当你从事