浆膜腔积液细胞病理学检查专家共识.ppt

1、浆膜腔积液细胞病理学检查专家共识,包头肿瘤医院病理科 高洋,共识的目的,细胞学诊断在识别良性或恶性病因所致的浆膜腔积液的检查中起着至关重要的作用。 恶性浆膜腔积液中，细胞学检查有助于确定肿瘤的组织学类型、部位和分期，并借助免疫组化和分子病理学等辅助检查指导临床精准治疗。 浆膜腔积液诊断有时候是患者进行病理诊断的唯一标本来源。 中华医学会病理学分会细胞病理学组制定了本专家共识，旨在提高我国浆膜腔积液细胞病理学的规范化、标准化检查水平，为患者的诊治提供更为准确、有效的细胞病理学依据。,样本类型,本共识所指的浆膜腔积液主要包括：胸腔积液； 腹（盆）腔积液； 心包积液； 胸、腹（盆）腔冲洗液,样本送检

2、要求与保存,1.样本送检量：建议临床尽可能提取100ml以上的浆膜腔积液送检， 如果临床可以取到的样本量少于100ml，则应全部送检。 2.存放容器：应存放于硬质不吸水密闭洁净容器，不建议使用软质引流袋存放送检。 3.送检时间：（1）建议浆膜腔积液离体后30min内（短途运输最长不超过2h）， 暂时不能送检应将标本冷藏于1-4度冰箱，不可冷冻。 （2）胸、腹（盆）腔冲洗液应立即送检，不建议冷藏。 4.标本通常不需要抗凝和预固定处理，但血性浆膜腔积液建议使用3U/ml肝素抗凝。 5.重复送检：同一样本短期（一个月）内一般送检3次。 6.申请单：信息完整、临床资料详实。包括：临床诊断、相关病史、治

3、疗史及影像学表现。 7.拒收任何申请单信息不完整，标签不当，及未使用适当容器存放的标本，各实验室可以指定相应拒收政策。,样本的制作,1.大体观察：细胞技术须对标本进行大体评估及记录包括： （1）标本量：mL/L （2）颜色：无色，淡黄、黄色、棕色、红色;乳糜性，脓性，出血或其他。 （3）质地：浆液性，黏液性，凝胶状，柏油样或其他 （4）是否凝固。 2.离心沉淀：（1）建议用50ml一次性尖底离心管离心处理； （2）送检样本静止放置15-30min后取底部液体50-100ml进行离心处理； （3）推荐使用具有自动平衡功能的垂直离心机；初次离心2500-3000r/min，5min （4）沉淀的血

4、液含量大于沉淀物的1/2时，建议加入5%-10%冰醋酸处理5-10min后 离心，再用磷酸盐缓冲溶液（PBS）清洗离心2次。,样本的制作,3.标本制作.(1)直接涂片：a：轻柔弃净上清液，使得沉淀物中残留的液体尽可能少； b： 用塑料或玻璃吸管等不吸水工具提取沉淀物置于预先做好标记的玻 片上，直接涂片，或用另一张载玻片平行/十字交叉对拉涂片。 c：沉淀物丰富时（2ml），选择上1/3沉淀物进行涂片制作 d：每例每次涂片2张。 (2)液基制片: a: 沉淀物量较多时（2ml）吸取沉淀物上1/2放入液基保存瓶进行固定 等处理，量较少时（2ml）则将沉淀物全部放入瓶中固定； b：按照不同的液基制片方

5、法作涂片1-2张。,样本的制作,（3）标本储存：制片完成后将剩余标本放入4度冰箱保存，直到发出最后报告。 保存剩余标本可用于重复制片，制作细胞块或用于其他检查。 报告完成后，应根据生物废弃管理政策，将储存标本丢弃。 （4）细胞块: a：细胞快是进一步进行免疫组织化学、分子病理等检测的良好平台。 b：确保常规涂片或液基制片等制作工作基本完成后剩余的样本中进行制 作。一般来说涂片或液基制片完成后离心沉淀物大于0.5ml建议进行 细胞块制作。 c:常用制作方法：琼脂凝集细胞块、血浆凝血酶凝集细胞块及直接固定凝 集等制作方法。,固定与染色,浆膜腔积液标本通常使用湿固定后的HE或巴氏染色和空气干燥后Ro

6、manowsky类染色，同一样本可以按需求同时制作。 （1）立即固定：进行HE/巴氏染色的涂片需要立即固定，不推荐空气干燥、热风干燥、 烘烤，加温方法处理后再固定，在沉淀物含水量很低的情况下，直接涂 片后立即固定细胞脱落量极少，可以在很大程度上提高制片染色质量而 又不影响诊断结果。 (2) 固定试剂: 95%乙醇、3.7%中性缓冲甲醛、甲醇等均可固定。 （3）固定时间:涂片固定时间15min，细胞蜡块固定时间2h (4)单人单缸:推荐一例样本使用一个固定容器。 （5）淋巴造血系统来源细胞为主病变需要瑞士染色时，推荐空气干燥固定。,样本评估,1 涂片(包括液基制片)评估： a：细胞固定良好，染色

7、后细胞核、细胞质及细胞团结构清晰； b:含数量不等的淋巴细胞和/或组织（5/HPF，术中冲洗液除外），并可见数量不等的间 皮细胞； c：若含有不典型细胞，无论细胞多少，应属于合格涂片。 2 细胞块评估： a：保存良好的淋巴细胞、组织细胞、间皮细胞； b：若含有肿瘤细胞，应至少有1个5个肿瘤细胞的细胞团或者 单张切片可辨认的肿瘤细胞数量50个， 肿瘤细胞50个常常导致免疫、分子检测评估困难；至少可连续切片15张。,辅助检查,1.ICC/IHC: a：浆膜腔积液是进行ICC/IHC及分子病理学检测有效样本来源，其检测结果与组织学样本 的相关具有一致性。 b: 进行ICC/IHC检测前应对样本的涂片及细胞块切片进行评估，并确定是否合适做 ICC/IHC检查。 c：鉴别腺癌与增生的间皮细胞：间皮:Calretinin CK5/6 D2-40 WT-1 Des 癌：不同部位特异抗体TTF-1 NapsinA CA125 WT-1 CDX-2 Villin,辅助检查,2 分子病理学检查： （1）单片涂片肿瘤细胞数量原则上应该100个，同时送检细胞中肿瘤细胞比例50%以上； （2）单张细胞蜡块切片中含有肿瘤细胞数量应100个，切片厚度5微米，数量应10张； 肿瘤细胞比例2