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文档简介

1、实验一,寄生虫粪便检查法,1,一、目的要求,掌握粪便中寄生虫虫卵检查的饱和盐水漂浮法; 应用显微镜观察粪便中虫卵的形态结构。,2,二、方法概述,用以检查蠕虫卵、原虫的包囊、滋养体和卵囊。方法简便,连续作3次涂片,可提高检出率。 1、蠕虫卵检查 2、原虫检查 1)活滋养体检查 2)包囊的碘液染色检查 3)卵囊检测 4)隐孢子虫卵囊染色检查:改良抗酸染色法,(一)直接涂片法,3,4,(二)浮聚法,原理:利用比重较大的液体,使原虫包囊或蠕虫卵上浮,集中于液体表面。常用的方法有三种: 1、饱和盐水浮聚法 2、硫酸锌离心浮聚法 3、蔗糖离心浮聚法,5,虫卵比重与漂浮液比重,6,饱和盐水漂浮法操作示意图,

2、自粪便不同处挑取如蚕豆大小的粪块,置于盛有少量饱和盐水的漂浮管中,2. 将粪便捣碎,与盐水搅匀,再加饱和盐水,3. 将满时,改用滴管,加至略高于管口但不超出为止,4. 取洁净载玻片一张盖在管口上,静止30分钟左右,5. 如图垂直向上提起载玻片,6. 敏捷地翻转,覆以盖片镜检,7,(三)沉淀法 原虫包囊和蠕虫卵的比重大可沉集于水底,有助于提高检出率。但比重较小的钩虫卵和某些原虫包囊则效果较差。 1、自然沉淀法 2、离心沉淀法 (四)漂浮-沉淀法 该法的原理是利用粪便中各种虫卵及粪渣中其它成份比重的差别,将不同比重的虫卵分别集中进行检查,即先按漂浮法检查比重较小的虫卵,然后将管中上层液倒掉,取沉淀

3、物检查不能上浮而沉在下面的比重较大的卵,所以,该法可用于检查比重大小各异的寄生虫卵。,8,(五)拭子检查法 适用于在肛周、皮肤产卵(蛲虫),或常在肛门附近发现虫卵(带绦虫)的虫卵检查法。 1、棉签拭子法 2、透明胶纸法,9,漏斗幼虫分离法(贝尔曼法)。取粪便15-20g,放在漏斗内的金属筛上,漏斗下接一短橡皮管,管下再接一个小试管。加入40到淹没粪球为止,静置1-3小时。此时大部分幼虫游走于水中,并沉淀于试管底部。取试管底部沉渣制成涂片镜检。 平皿法。取被检粪球3-4个,放于平皿中,加适量40温水,浸泡10-15min后,除去粪球,留下的液体在低倍显微镜下检查。,(六)粪便内蠕虫幼虫检查法 1

4、、幼虫分离法:网尾线虫、类圆线虫 2、粪便内虫卵培养法:圆形线虫目 3、毛蚴孵化法:,10,结肠小袋纤毛虫 Balantidium coli,十二指肠贾第虫 Giardia duodenalis,球虫,隐孢子虫,11,肝片形吸虫虫卵,日本血吸虫虫卵,蛭形巨吻棘头虫,12,膜壳绦虫虫卵,犬复孔绦虫卵,猪带绦虫虫卵,细粒棘球绦虫虫卵,莫尼茨绦虫虫卵,13,犬鞭虫卵,钩虫卵,犬弓首蛔虫卵,鸽毛细线虫卵,球虫卵囊,肉鸽蛔虫卵,猪蛔虫卵,14,测微尺的使用,通常的镜台测微尺是中央部分刻有精确等分线的载玻片,一般将lmm等分为100格,每格长l0m,是专门用来校正目镜测微尺的。,通常的目镜测微尺是一块圆形

5、玻片,在玻片中央把5mm长度刻成50等分、把10 mm长度刻成100等分或将1mm长度刻成100等分。,15,测微尺的使用,16,漏斗架2个/组;漏筛6个/组;小烧杯(50ml)12个/组;500ml烧杯2个/组;100mL烧杯1个/组;青霉素瓶6个/组;离心管6个/组;滴管1个/人;饱和盐水1瓶/组;甘油水1瓶/组;100mL量筒1个/组;小方瓷盘1个/组;擦镜纸1平皿/组;小棉块1份/组;载玻片、盖玻片1份/组;离心机、小天平各1台;镊子2个/组;显微镜;试管架1个/组;动物粪便1份/班;50mL烧杯两个用于配平。,一)、实验用品,三、试验内容,17,1. 每2人操作1份饱和盐水漂浮法静置滤液 30分钟; 2. 直接涂片法(每2人操作1份); 3. 离心沉淀法(每2人操作1份); 4. 继续“1”未完的操作。,二)实验安排,18,六、注意事项 1.高倍镜下观察必须加盖玻片 2.采用直接涂片法时,不要涂得太多,必须分散开,均匀 3.观察寄生虫卵前,需校对目镜每格的

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