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文档简介

1、专题八生物技术实践,水、碳源、氮源、无机盐,配制培养基灭菌 接种培养,尿素,稀释涂布平板法,纤维素,刚果红,无氧,3035 ,让豆腐长毛霉,加卤汤装瓶,细胞的全能性,脱分化和再分化,pH、温度、光照,水蒸气蒸馏法,压榨法,萃取法,纸层析法,走进高考 1.PCR 产物中加入二苯胺试剂,加热变蓝说明有目的DNA产生(2015江苏,23D)() 2.用稀释涂布平板法培养计数,应选择有30300菌落数的平板(2015四川,3D) () 3.醋酸菌在无氧条件下利用乙醇产生醋酸(2014广东,4B)() 4.用纸层析法提取菠菜绿叶中的色素和鉴定胡萝卜素提取粗品(2014四川,14C)() 5.先供氧进行果

2、醋发酵,然后隔绝空气进行果酒发酵(2013江苏,14B)() 6.培养基分装到培养皿后进行灭菌(2013江苏,18A) () 7.用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列(2013江苏,22B)() 8.用洋葱进行DNA 粗提取和鉴定实验时,加入洗涤剂后用力进行快速、充分的研磨(2013江苏,4A)() 9.尿糖试纸含有固定化的葡萄糖酶和过氧化氢酶,可以反复使用(2012江苏,17C)() 10.腐乳制作所需要的适宜温度最高(2011江苏,3A)(),【自我校对】 1.变蓝说明有DNA产生,但不能说明一定是目的DNA。 2. 3.用醋酸菌酿醋时需要持续通气,即利用醋酸菌的有氧呼吸。 4

3、.纸层析法可用来分离色素,而不能提取色素。 5.进行果酒、果醋发酵实验,要先进行隔绝空气果酒发酵,再供氧进行果醋发酵。 6.在配制培养基的过程中要先灭菌后倒平板。 7.PCR法扩增目的基因只需要知道基因两端的序列,设计合适的引物即可。 8.加入洗涤剂后研磨动作要轻缓、柔和。 9.尿糖试纸由于使用后不能将反应物和酶分开,而不能再次使用。 10.酵母菌酒精发酵适宜温度是1825 ,醋酸菌醋酸发酵的适宜温度是3035 ,腐乳制作中豆腐长出毛霉的适宜温度是1518 。,考点一,考点二,考点三,考点四,固体,液体,选择,鉴别,平板划线法,稀释涂布平板法,灼烧,干热,活菌计数法,显微镜直接计数,考点一,考

4、点二,考点三,考点四,2.选择培养基的选择因素 (1)培养基中缺乏氮源时,可以分离微生物,因为非固氮微生物不能在此培养基上生存。 (2)当培养基的某种营养成分为特定化学成分时,也具有分离效果。如石油 是时,可以抑制不能利用石油的微生物的生长,使能够利用石油的微生物生存,达到分离能消除石油污染的微生物的目的。 (3)改变微生物的,也可以达到分离微生物的目的。如将培养基放在高温环境中培养只能得到耐高温的微生物。,固氮,唯一碳源,培养条件,考点一,考点二,考点三,考点四,例1:(2014课标全国理综,39)为了调查某河流的水质状况,某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量,并进行了细菌分离等工作。回答

5、下列问题。 (1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间,这样做的目的是;然后,将1 mL水样稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为。 (2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时,接种环通过灭菌,在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是。,考点一,考点二,考点三,考点四,(3)示意图A和B中,表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。 (4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并

6、混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养。结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。其原因是:振荡培养能提高培养液中的含量,同时可使菌体与培养液充分接触,提高的利用率。,考点一,考点二,考点三,考点四,解析:为了检测培养基灭菌平板是否合格,应对空白平板先行培养一段时间。每升水样中的活菌数为(39+38+37)30.11001 000=3.8107(个)。对接种环应进行灼烧灭菌。为了将聚集的菌体逐步稀释以获得单个菌落,在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线。A表示的是平板划线法接种培养后得到的结果,B表示的是用稀释涂布平板法接种后得到的结果。 答案:(1)检测培养

7、基平板灭菌是否合格3.8107 (2)灼烧将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落 (3)B (4)溶解氧营养物质,考点一,考点二,考点三,考点四,考点一,考点二,考点三,考点四,考点一,考点二,考点三,考点四,考点一,考点二,考点三,考点四,对点训练1 1.(2015江苏南京5月调研)下图表示培养和纯化X细菌的部分操作步骤,下列叙述正确的是() A.步骤操作时,倒好平板后应立即将其倒置,防止水蒸气落在培养基上造成污染 B.步骤接种环和试管口应先在火焰上灼烧,接种环冷却后再放入试管中蘸取菌液 C.步骤沿多个方向划线,使接种物逐渐稀释,培养后可根据出现的单个菌落计数 D.步骤是将培养皿放在恒温培养箱

8、中培养,一段时间后所得到的都是X细菌的菌落,考点一,考点二,考点三,考点四,解析:步骤操作时,倒好平板后应待其冷却凝固后,立即将其倒置,防止水蒸气落在培养基上造成污染,A项错误;步骤接种环和试管口应先在火焰上灼烧,接种环冷却后再放入试管中蘸取菌液,B项正确;步骤沿多个方向划线,使接种物逐渐稀释,培养后可出现单个菌落,但平板划线法不能用于计数,C项错误;步骤是将培养皿放在恒温培养箱中培养,一段时间后所得到的不一定都是X细菌的菌落,D项错误。 答案:B,考点一,考点二,考点三,考点四,2.(2015北京东城区期末)下列有关微生物实验的叙述,不正确的是() A.获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染 B

9、.平板划线法可用于微生物的计数 C.分离不同的微生物要采用不同的稀释度 D.观察菌落的特征可以用来进行菌种的鉴定 解析:微生物培养过程中要进行无菌操作,防止外来杂菌的入侵,以获得纯净的培养物,A项正确;平板划线法可用于微生物的分离,B项错误;土壤中各类微生物的种群数量是不同的,稀释的目的是使每个微生物个体充分分离,以便在平板培养时能得到由单个微生物个体生长而来的菌落,因此分离不同的微生物要采用不同的稀释度,C项正确;每一种微生物在一定条件下形成固定的菌落特征,因此观察菌落的特征可以用来进行菌种的鉴定,D项正确。 答案:B,考点一,考点二,考点三,考点四,2C2H5OH+2CO2,CH3COOH

10、+H2O,小分子肽+氨,甘油+脂肪酸,2C3H6O3,玫瑰红色,基酸,考点一,考点二,考点三,考点四,无氧,有氧,有氧,3035 ,常温,果酒,果醋,加盐,加卤汤,发酵,考点一,考点二,考点三,考点四,例2:(2015山西四校联考)近年来,纪录片舌尖上的中国引发全民关注美食的热潮,其中多次讲述了利用不同微生物的发酵作用制作的美味食品。请分析回答下列问题。 (1)在果醋制作时,运用醋酸菌在供应和糖源充足时,将糖分解成醋酸;在糖源不充足时,也可以利用酒精生成醋酸,请写出该过程的化学反应式:。 (2)腐乳制作的流程是:让豆腐上长出毛霉加盐腌制加卤汤装瓶密封腌制。用盐腌制时,应注意控制;配制卤汤时,要

11、使卤汤中酒的含量控制在%左右。 (3)制作泡菜的原理是。蔬菜在腌制过程中,会产生亚硝酸盐。在条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生反应后,与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成色染料。,考点一,考点二,考点三,考点四,解析:(1)在果醋制作时,运用醋酸菌在供应氧气和糖源充足时,将糖分解成醋酸;在糖源不充足时,也可以利用酒精生成醋酸,反应式为C2H5OH+O2 CH3COOH+H2O。 (2)腐乳制作的流程是:让豆腐上长出毛霉加盐腌制加卤汤装瓶密封腌制。用盐腌制时,应注意控制盐的用量,配制卤汤时,要使卤汤中酒的含量控制在12%左右。 (3)制作泡菜的原理是乳酸菌在无氧的环境下大量繁殖,将葡萄糖分解成乳酸

12、。蔬菜在腌制过程中,会产生亚硝酸盐。在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。 答案:(1)氧气C2H5OH+O2 CH3COOH+H2O (2)盐的用量12 (3)乳酸菌在无氧的环境下大量繁殖,将葡萄糖分解成乳酸盐酸酸化重氮化玫瑰红,考点一,考点二,考点三,考点四,考点一,考点二,考点三,考点四,考点一,考点二,考点三,考点四,考点一,考点二,考点三,考点四,对点训练2 1.(2015江苏徐州、连云港、宿迁三市联考)下列关于制作葡萄酒和葡萄醋的叙述,正确的是() A.制果酒最快捷的途径是先制果醋,再制果酒 B.榨汁前,先将新鲜葡

13、萄进行冲洗后再去枝梗 C.无氧条件下,醋酸菌能将酒精直接变为醋酸 D.整个制作过程中,应杜绝微生物的生长繁殖 解析:果醋是在果酒的基础上接种醋酸杆菌进行发酵产生,A项错误。榨汁前,先将新鲜葡萄进行冲洗后再去枝梗,减少杂菌进入葡萄果肉内,B项正确。醋酸菌是需氧菌,应在有氧的条件下发酵,C项错误。整个发酵过程中必须要有酵母菌或者醋酸菌生长繁殖,D项错误。 答案:B,考点一,考点二,考点三,考点四,2.(2015辽宁大连二模)某校同学在实验室开展生物技术实践活动。请回答下列有关问题。 (1)A组同学制作泡菜。在泡菜腌制的过程中,要注意控制腌制的时间、和食盐的用量;最后要向坛盖边沿的水槽中注满水,这一

14、操作的目的是。 (2)B组同学制作腐乳。在制作腐乳过程中,在腐乳表面往往会有一层致密的皮,这层皮实际上是微生物的,对人体无害。 (3)C组同学制作蓝莓果酒与果醋。某同学对自己的发酵装置定时通过充气口充气,该同学是在制蓝莓果。另一位同学在蓝莓果汁中直接加入某品牌活性酵母,之后先向发酵罐中通入一段时间的无菌空气,通入无菌空气的目的是。 (4)在蓝莓果酒制作过程中,在变酸的酒的表面观察到的菌膜是由大量繁殖而形成的,其可在缺少糖源时将乙醇变为,然后变为醋酸。,考点一,考点二,考点三,考点四,解析:(1)在泡菜腌制的过程中,要注意控制腌制的时间、温度和食盐的用量等;最后要向坛盖边沿的水槽中注满水,这样可

15、以保证坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境。 (2)在制作腐乳过程中,在腐乳表面往往会有一层致密的皮,这层皮实际上是微生物的匍匐菌丝,对人体是无害的。 (3)果酒发酵时需要密封条件下,果醋发酵需要通气,根据题意,第一位同学通过充气口充气,该同学在制作蓝莓果醋;由于酵母菌在有氧条件下进行有氧呼吸,可以大量繁殖,因此另一位同学加入酵母菌后通入无菌空气的目的是使酵母菌繁殖。 (4)变酸的酒的表面与氧气接触,醋酸菌能够大量繁殖,因此观察到的菌膜是由醋酸菌繁殖形成的;醋酸菌可以在缺少糖源时,将乙醇转变为乙醛,进而氧化为乙酸。 答案:(1)温度保证坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境 (2)匍匐菌丝 (3)醋在有氧条件下

16、,使酵母菌迅速繁殖,数量增加 (4)醋酸菌乙醛,考点一,考点二,考点三,考点四,水蒸气 蒸馏法,NaCl,无水Na2SO4,压榨法,压榨、过滤、静置,萃取法,溶解在有机溶剂,萃取、过滤,考点一,考点二,考点三,考点四,例3:(2015山东济宁二模)下面是与植物芳香油的提取相关的问题,请回答下列问题。 (1)玫瑰精油的提取可使用上面左图所示装置,这种方法叫法;蒸馏时收集的蒸馏液(填“是”或“不是”)纯的玫瑰精油。 (2)橘皮精油的提取原料是橘皮,但橘皮易焦糊,宜采用法提取橘皮精油。,考点一,考点二,考点三,考点四,(3)胡萝卜素是色的结晶。从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的是法,加热时应该注意控制,一

17、般情况下,提取胡萝卜素时,提取效率与原料颗粒的含水量成比。 (4)将提取的胡萝卜素粗品通过纸层析进行鉴定,上面右图为鉴定结果示意图,请据图回答。A、B、C、D四点中,属于标准样品的样点是。 解析:(1)从图中装置可以看出,玫瑰精油的提取方法为蒸馏法;蒸馏后得到的蒸馏液不是纯的玫瑰精油,而是油水混合物。(2)橘皮易发生焦糊,因此应该采用压榨法提取橘皮精油。(3)胡萝卜素是橙黄色的结晶;从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的方法是萃取法;由于高温时胡萝卜素会分解,因此加热时注意控制好温度和时间;提取胡萝卜素时,原料中的含水量会影响提取效率,因此提取效率与含水量成反比。(4)分析题图可知,两侧的为标准样品,即

18、A、D点。 答案:(1)蒸馏不是(2)压榨(3)橙黄萃取温度和时间反(4)A、D,考点一,考点二,考点三,考点四,考点一,考点二,考点三,考点四,考点一,考点二,考点三,考点四,对点训练3 1.下列与芳香油提取相关的叙述,错误的是() A.玫瑰精油适合用水蒸气蒸馏法提取,原因是玫瑰精油易挥发、难溶于水、化学性质稳定 B.当蒸馏瓶中的水和原料量一定时,影响精油提取量的主要因素有蒸馏时间和温度 C.如果蒸馏过程中不进行冷却,则精油提取量会下降 D.从薄荷叶中提取薄荷油时不能采用从玫瑰花中提取玫瑰精油的方法 解析:玫瑰精油属于芳香类化合物,具有芳香类化合物的通性,即易挥发、难溶于水、化学性质稳定等性

19、质,A项正确;蒸馏时间和温度可影响精油提取量,B项正确;蒸馏时玫瑰精油随水蒸气一起蒸馏出来,如果不进行冷却,部分精油会随水蒸气蒸发而流失,C项正确。薄荷油与玫瑰精油化学性质相似,同样可以采用水蒸气蒸馏法提取,D项错误。 答案:D,考点一,考点二,考点三,考点四,2.许多植物含有天然香料,如薄荷叶中含有薄荷油。现用薄荷叶提取薄荷油。回答下列问题。 (1)薄荷油是挥发性物质,提取薄荷油时应选用 (填“鲜”或“干”)薄荷叶作原料,其原因是。 (2)用萃取法提取薄荷油时,采用的溶剂是,原理是。 (3)用水蒸气蒸馏法提取薄荷油时,在油水混合物中加入NaCl的作用是,常用于分离油层和水层的器皿是,分离出的

20、油层中加入无水Na2SO4的作用是,除去固体Na2SO4的常用方法是。,考点一,考点二,考点三,考点四,解析:(1)薄荷油易挥发,干燥过程中会使薄荷油挥发掉,因此应选择鲜薄荷叶作为原料。(2)薄荷油易溶于有机溶剂,因此萃取时所选用的溶剂必须是有机溶剂,如酒精、石油醚、乙醚或戊烷等。(3)加入NaCl可以增加盐的浓度,使分层更明显;分离油层和水层的器皿一般选用分液漏斗;无水Na2SO4是干燥剂,可以用来吸收油层中的水分;除去固体Na2SO4最简单的方法是过滤。 答案:(1)鲜薄荷油易挥发,干燥过程中会使薄荷油挥发掉 (2)酒精、石油醚、乙醚或戊烷等薄荷油易溶于有机溶剂 (3)增加盐的浓度,使分层

21、更明显分液漏斗吸收油层中的水分过滤,考点一,考点二,考点三,考点四,1.植物组织培养 (1)脱分化:由的植物组织或细胞产生的过程。 (2)愈伤组织:细胞排列而无规则,是一种的 呈的。 (3)再分化:脱分化产生的继续培养,重新分化出 和 等器官的过程。 (4)植物组织培养的理论基础:植物细胞的。 (5)基本过程:离体的植物组织 移栽成活。,高度分化,愈伤组织,疏松,高度液泡化,无定形状态,薄壁细胞,愈伤组织,根,芽,全能性,愈伤组织,丛芽,生根,考点一,考点二,考点三,考点四,2.DNA的粗提取与鉴定 (1)提取原理:利用DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的中溶解度不同进行分离。在2 mol/L

22、的该溶液中溶解,过滤除去不溶的杂质,再调节该溶液浓度为0.14 mol/L使析出,过滤除去溶液中的杂质。DNA不溶于酒精,而等杂质分子溶于酒精。 (2)鉴定原理:在沸水浴条件下,DNA遇试剂会被染成。 3.多聚酶链式反应扩增DNA片段 (1)PCR技术的原理:利用了原理。通过控制来控制DNA双链的解聚和结合。 (2)PCR反应的条件:一定的,DNA模板,分别与两条模板链相结合的两种,四种,耐热的,同时控制使DNA复制在体外反复进行。细胞内DNA复制与细胞外DNA复制必需的酶是。,NaCl溶液,DNA,DNA,蛋白质,二苯胺,蓝色,DNA热变性,温度,缓冲液,引物,脱氧核苷酸,DNA聚合酶,温度

23、,DNA聚合酶,考点一,考点二,考点三,考点四,4.血红蛋白的提取和分离 (1)分离方法法和电泳法。 (2)纯度鉴定一般用方法对血红蛋白进行纯度鉴定。 5.酶的应用 (1)酶的活性是指酶催化一定化学反应的能力。酶促反应速率用单位时间内、单位体积中量或量来表示。 (2)固定化酶和固定化细胞是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术,包括、和法。,凝胶色谱,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,反应物的减少,产物的增加,包埋法,化学结合法,物理吸附,考点一,考点二,考点三,考点四,例4:图甲为月季花药中的花粉在适宜培养基上培养产生花粉植株的两种途径,图乙是植物激素对愈伤组织分化影响的示意图。请据图

24、回答下列问题。,考点一,考点二,考点三,考点四,(1)图甲中表示花粉培养过程中的过程,X表示。由花粉得到一个完整植株的过程体现了花粉细胞的。 (2)图甲中的两条途径之间并没有绝对的界限,主要取决于培养基中的种类和浓度配比。实验操作过程中,需要对月季花蕾进行处理,以防止污染。 (3)为提高花药培养的成功率,应选择处于期的花粉进行培养。选择花药时,确定花粉发育时期的方法有和。 (4)结合图乙分析,在图甲过程中,若愈伤组织没有形成芽,但分化成了根,其原因可能是;若要获得更多的愈伤组织,培养基中两种激素的含量应该是。,考点一,考点二,考点三,考点四,解析:本题考查植物组织培养的相关知识,意在考查识图能

25、力和分析能力。(1)由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织或胚状体的过程叫作脱分化,由愈伤组织重新分化成根或芽等器官的过程叫作再分化。由单个植物细胞得到完整个体的过程体现了植物细胞的全能性。(2)图甲中的两条途径之间并没有绝对的界限,主要取决于培养基中激素的种类和浓度比例。实验操作过程中,需要对月季花蕾进行消毒,以防止污染。(3)一般来说,在单核期,细胞核由中央移向细胞一侧的时期,花药培养成功率最高。通过镜检可以判断花粉发育的时期,确定花粉发育时期最常用的方法有醋酸洋红法,某些植物花粉细胞核不易着色,需采用焙花青铬矾法。(4)由图乙可知,培养基中植物激素的种类及其浓度配比会影响愈伤组织分化的方向,具体结合图示和题干信息回答即可。,考点一,考点二,考点三,考点四,答案:(1)脱分化胚状体全能性 (2)激素消毒 (3)单核醋酸洋红法焙花青铬矾法 (4)培养基中生长素多,细胞分裂素少细胞分裂素中等量,生长素少,考点一,考点二,考点三,考点四,对点训练4 1.(2015江苏南通5月调研)下图是利用鸡血粗提取DNA的基本操作,下表中操作目的不能实现的是(),考点一,考点二,考点三,考点四,解析:在DNA粗提取实验中,鸡血中加

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