3、叶绿体色素.ppt_第1页
3、叶绿体色素.ppt_第2页
3、叶绿体色素.ppt_第3页
3、叶绿体色素.ppt_第4页
3、叶绿体色素.ppt_第5页
已阅读5页，还剩8页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

1、实验4 叶绿体色素的提取、分离、理化性质和叶绿素含量的测定 实验目的：掌握植物中叶绿体色素的成分分离和定性、定量分析的原理和方法。 一、实验原理,1、溶解性。叶绿素和类胡萝卜素均不溶于水而溶于有机溶剂，常用95%的乙醇或80%的丙酮提取。,2、吸附性。滤纸对Chl b、Chl a、叶黄素的胡萝卜素的吸附能力不同(？)，当用石油醚作推动剂时，其在滤纸上的移动速度不同，可相互分离。,？ ？ ？ ？,+ 2KOH,+ 2KOH +CH3OH +C20H39OH,3、皂化反应。叶绿素是二羧酸酯，与强碱反应，形成绿色的可溶性叶绿素盐，就可与有机溶剂中的类胡萝卜素分开。,？,？,4、取代反应。 在酸性或加

2、温条件下，叶绿素卟啉环中的Mg+可依次被H+和Cu+取代形成褐色的去镁叶绿素和绿色的铜代叶绿素。 H+取代Mg2+, Cu2+ (Zn2+)取代H+ 。,褐色,绿色,5、叶绿素受光激发，可发出红色荧光，反射光下可见红色荧光。,透射光下呈绿色,反射光下呈红色,6、定量分析。叶绿素吸收红光和蓝紫光，红光区可用于定量分析，其中645和663用于定量叶绿素a,b及总量，而652可直接用于总量分析。,a,b,Relative absorbtance,Waverlength(nm),材料： 菠菜。,三、方法和结果： 1定性分析： 鲜叶5g+95%30ml（逐步加入）,磨成匀浆 ,过滤入三角瓶中,观察荧光现

3、象 透射光 色，反射光 光。,色素分离 在滤纸中心缓慢滴入30滴提取液 略干后滴入石油醚直到接近滤纸边缘 用笔注出成分和颜色结果附于实验报告中。,皂化反应 加KOH数片剧烈摇均，加石油醚5ml和H2O 1ml 分层后观察 上层呈 色，为 ，吸收 光。 下层呈 色。为 。吸收 光。,取代反应（1） 加醋酸约2ml，变褐（ 叶绿素）取1/2加醋酸铜粉加热变 色， 为 叶绿素。,取代反应（2）： 鲜叶2-3cm2，加Ac-AcCu 20ml加热。观察： min变为 色的 叶绿素， min后，变为 色的 叶绿素。,2叶绿素定量分析： 鲜叶0.1g，加1.9mlH2O，磨成匀浆，各取0.2ml加80%丙酮4.8ml,摇匀，4000转离心3min,上清液在645，652，663测定OD，计算Chla,Chlb 和Chl总量的值。 四、结果计算 Ca(mg/L)=12.7OD663-2.69 OD645 Cb (mg/L) =22.9OD645-4.68 OD663 CT (mg/L) = Ca+ Cb=OD6521000/34.5,Chla含量(mg/g.FW)= （Ca(mg/L)/1000） 2/ 0.1 5/ 0.2 Chlb含量(mg/g.FW) = （Cb(mg/L)/1000） 2/ 0.1 5/

人人文库> 全部分类> 生活休闲 > 科普知识

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论