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文档简介

1、实 验 二 重金属污染对植物叶绿素含量的影响,实验目的,掌握叶绿素含量的测定 了解重金属污染对叶绿素含量的影响 了解在重金属胁迫条件下的变化趋势,实验原理,植物叶绿素分叶绿素a和叶绿素b,其含量的高低是反映植物光合作用能力的一个重要指标 叶绿素含量的变化可以反映污染对植物光合作用的影响,实验仪器与材料,仪器:研钵、滤纸、漏斗、5 mL移液管、分光光度计等 材料:小麦 试剂:丙酮(80%) 、石英砂、氯化铬(Cd 2+)系列溶液(0、5、10、25、50mg/L),实验步骤1:实验材料培养,将大小比例均匀的种子用蒸馏水浸泡、吸胀后,移入铺有2层滤纸的培养皿中,置入光照培养箱中培养(22 25),

2、实验步骤2:分组染毒处理,在种子长出2片真叶后,分别用5个不同浓度的重金属氯化铬溶液处理 每组3个平行处理,.,实验步骤2:分组染毒处理,每天用蒸馏水冲洗1次,再用原组重金属溶液培养 培养1周后,即可用,实验步骤3:叶片中叶绿素提取,取新鲜植物叶片0.1g (5株等长植物) 剪碎,放入研钵中,加入80%丙酮2.5mL和少量(3 4粒)石英砂研成糊状,再加3mL 80%的丙酮,继续研磨至组织变白,实验步骤3:叶片中叶绿素提取,在暗处静置3 5min后,用一层滤纸过滤到30mL烧杯中 用滴管吸取80%丙酮将研钵和滤纸周围洗脱色素 待滤纸和残渣全部变白后,用80%丙酮定容至20mL,实验步骤4:测定吸光度,先用少量色素提取液清洗比色皿2 3次,然后将色素提取液倒入比色皿中 80%丙酮作空白对照 在波长分别为663nm、645nm条件下测定提取液的吸光度。如果浓度较高,适当稀释后比色定量。,计算叶绿素含量,叶绿素a和b及总叶绿素的浓度分别为: Ca、Cb和CT,可根据下式计算: Ca=12.7A663-2.69A645 Cb=22.9A645-4.68A663 CT=8.02A663+20.21A645 式中:A663、A645分别为提取液在波长663nm、645nm下的吸光度。,数据处理与实验结果分析:,每个处理组的平行测定结果用平均数标准误( SE)表示,用One-Way ANOV

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