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文档简介

1、微生物学实验,基础医学院 显微形态实验室微生物学实验室,实验三、免疫学及病原学各论,一、实验内容,一)酶联免疫吸附分析方法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测人尿液中绒毛膜促性腺激素(chorionic-gonadotropin hormone ,HCG)。 二)镜下观察参与特异与非特异免疫反应的免疫细胞(中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞)。 三)镜下观察钩端螺旋体、结核杆菌。,一)熟悉应用ELISA进行尿液检测的方法及原理。 二)准确识别镜下免疫细胞及钩端螺旋体、结核杆菌。,二、实验目的,三、实验材料,一)HCG检测试剂盒,人尿液(正常人尿液、

2、孕妇尿液),蒸馏水,记号笔。 二)示教切片,显微镜,四、实验原理,一)ELISA双抗夹心方法,此方法是检测大分子抗原的常用的方法。,一)按照试剂盒说明进行,阳性尿液显蓝色。 二)参与免疫应答的免疫细胞,五、方法与步骤,1.固有性(非特异性)免疫应答,概念:是生物体在种系发育和进化过程中借遗传因素而形成的免疫防御功能 特点:先天性、非特异性、相对稳定、反应迅速、方式单一、无记忆性,单核巨噬细胞,(monocytes and macrophages),2.适应性(特异性)免疫应答, 概念:是机体在生活过程中通过接触某种抗原(antigen)物质而产生的一系列免疫功能 特点:获得性、特异性、不稳定性

3、、多样性、记忆性、可转移性 组成:免疫器官、免疫细胞、免疫分子 类型:体液免疫应答、细胞免疫应答,免 疫 细 胞,凡是参与免疫应答或与免疫应答有关的细胞,通称为免疫细胞(immunocyte) 包括造血干细胞、T细胞、B细胞、吞噬细胞、NK细胞、抗原呈递细胞,单核细胞体积较大,蹄状核(左,普通光镜)透射电镜显示其高尔基体发达、粒体丰富、胞浆颗粒明显(中)扫描电镜显示腹腔巨噬细胞粘附于玻璃表面(右),普通光学显微镜下观察Giemsa染色血涂片中性粒细胞呈淡藕荷色,多叶核,胞浆中含有大量的细胞颗粒透射电镜下其胞浆颗粒清晰可辨,在普通光学显微镜下观察Giemsa染色的血涂片嗜碱性粒细胞胞浆中布满深蓝色细胞颗粒 透射电镜下胞浆颗粒中充满致密物质,在普通光学显微镜下观察Giemsa 染色的血涂片 嗜酸性粒细胞胞核为双叶状,胞浆中含有大量深红色细胞颗粒 透射电镜下其胞浆颗粒呈结晶状,淋巴细胞( Lymphocytes ),未活化淋巴细胞直径67微米,浆/核比例很小(左,普通光镜) 投射电镜显示未活化淋巴细胞胞核致密,胞浆中细胞器很少(右),钩端螺旋体 纯培养物(镀银染色),E花环实验,淋巴细胞转化试验,小吞噬试验 中性粒

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