《医学微生物学》教学课件：第十四章螺旋体

1、,第14章螺旋体 Spirochaete,教学大纲,掌握内容 钩端螺旋体致病性 梅毒螺旋体致病性 了解内容 诊断检查法及防治原则,螺旋体 （Spirochaete）,一类细长、柔软、呈螺旋状弯曲、运动活泼的原核细胞型微生物。 细胞壁含脂多糖和胞壁酸 有核质 以二分裂形式繁殖 对抗生素敏感 对人和动物致病 钩端螺旋体属 密螺旋体属 疏螺旋体属,钩端螺旋体属：螺旋非常细密、规则，一端或两端弯曲呈钩状 密螺旋体属：螺旋细密规则，两端尖 疏螺旋体属：螺旋稀疏不规则呈波浪状,第一节 钩端螺旋体属,形态结构与染色 螺旋细密而规则 镀银染色法染成棕褐色,螺旋细密、规则，形似细小珍珠排列的细链。一端或两端呈钩

2、状。运动活泼 ,常使菌体呈C、S或8字型 革兰染色阴性，不易着染 Fontana镀银染色法染成棕褐色 运动活泼,1.形态与染色,一、生物学性状,培养特性 营养要求复杂，常用Korthof培养基(含蛋白胨、磷酸盐、10%兔血清） 适宜生长温度为2830 钩端螺旋体在人工培养基中生长缓慢,1-2周才可见。 需氧或微需氧。,抵抗力 热抵抗力弱，601min即死亡。 0.2%来苏、1:2000升汞、1%石炭酸经1030min被杀灭。 对青霉素、庆大霉素敏感。 在湿土或水中可存活数月,抗原构造与分类 (1) 抗原分类 属特异性蛋白抗原只存在于钩体属中 群特异性抗原脂多糖 型特异性抗原多糖蛋白复合物 根据

3、抗原性不同问号钩体分25个血清群、273个血清型 我国已发现致病性钩体至少19群，74型 (2)DNA分类 问号状钩体分7个基因种,致病物质 溶血素 不耐热，对氧稳定。破坏红细胞膜而溶血。 细胞毒因子（CTF） 内毒素样物质（ELS） 毒性作用与内毒素相似（脂多糖），但活性较低。可使动物发热，出现炎症与坏死。 脂酶、脱氢酶等,所致疾病,钩端螺旋体病-一种人畜共患传染病,传染源,传播途径,鼠和猪,经粘膜或破损皮肤进入; 经胎盘垂直传播,临床表现,疾病特点,起病急、高热、乏力、全身酸痛、眼结膜充血、腓肠肌压痛、表浅淋巴结肿大,临床表现 高热、全身酸痛 眼结膜充血、腓肠肌压痛 表浅淋巴结肿大 可出现

4、休克、黄疸、出血、心肾功能不全、脑膜炎，以肺大出血最为凶险,免疫性,可获得对同型钩体较持久的免疫力 以体液免疫为主,三、微生物学检查法,1.病原体检测 发病10天内取血液;1周后取尿液;有脑膜刺激者取脑脊液 直接镜检-有无钩体存在 分离与鉴定-接种至Korthof培养基，置28孵育。 阳性标本：在2周内可见培养液呈轻度混浊暗视野显微镜检查有则用已知诊断血清鉴定其血清群和血清型。 阴性标本:分离培养应连续观察4个月，仍无生长者。 动物接种 幼龄豚鼠或金地鼠腹腔 分子生物学方法：PCR 和 ELASA,2.血清学诊断,病初和发病后第34周各采血清一次。有脑膜刺激 症状者采取脑脊液 方法: 显微镜凝

5、集试验(MAT)-抗原抗体结合发生凝 集 间接凝集试验 以乳胶 (聚苯乙烯)或活性炭微粒为载体， 吸附钩端螺旋体可溶性抗原作为指示物,四、防治原则,防鼠、灭鼠，加强对带菌家畜的管理。 在常年流行地区，对易感人群和与疫水接触者宜接种包含当地流行株在内的多价钩端螺旋体疫苗。 治疗：首选青霉素,第二节 梅毒螺旋体属（T.pallidum ） 苍白密螺旋体苍白亚种,一、生物学性状 形态与染色： 两端尖直,8-14个规则螺旋 3-4根内鞭毛,运动活泼 革兰染色阴性，不易着染 Fontana镀银染色法染成棕褐色,不能在无活细胞的人工培养基中生长繁殖 在家兔上皮细胞培养中能有限生长，繁殖慢。 人工培养至今尚

6、未解决。,培养,抵抗力极弱,对温度和干燥特别敏感。4C 3天,40C 2小时. 对常用化学消毒剂亦敏感，1%2%石炭酸内数分钟就死亡。 对青霉素、四环素、红霉素或砷剂均敏感。,致病性与免疫性,致病物质 外膜蛋白-粘附宿主细胞和抗吞噬作用 粘多糖-使内皮细胞间的连接被解离和破坏 所致疾病-梅毒 人是梅毒的唯一传染源 获得性 - 性接触传播，输血或经体表伤口(少见) 先天性 -母体胎盘胎儿,获得性梅毒,期（初期）梅毒：感染性极强，破坏性小 感染后3周左右局部出现无痛性硬下疳，多见于外生殖器，一般48周后，常自愈。 期梅毒：感染性强，破坏性小 发生于硬下疳出现后28周。苍白亚种螺旋体血症，全身皮肤、

7、粘膜常有梅毒疹，全身淋巴结肿大，有时亦累及骨、关节、眼及其他脏器。 期(晚期)梅毒：感染性小，破坏性大 发生于感染2年以后，亦可长达1015年的。病变可波及全身组织和器官。基本损害为慢性肉芽肿，局部组织坏死。损害常进展和消退交替出现。皮肤、肝、脾和骨骼常被累及。可危及生命。,期（初期）梅毒,期梅毒,期梅毒,期(晚期)梅毒,先天性梅毒（胎传梅毒）：流产、早产或死胎；梅毒儿（马鞍鼻、先天性耳聋、楔状齿、间质性角膜炎等）,以细胞免疫为主 潜伏期长，属有菌免疫,免疫性,三、微生物学检查法,1.标本 期梅毒-硬下疳渗出液 期梅毒-梅毒疹渗出液或局部淋巴结抽出液 2.显微镜检查-运动活泼的密螺旋体 3.血

8、清学诊断,非特异性：非密螺旋体抗原试验 抗原(正常牛心肌的心脂质)血清中的反应素(抗脂质抗体) 适用于大量过筛 特异性：密螺旋体抗原试验 抗原（Nichols株螺旋体）螺旋体特异抗体 优点：特异性强，可用作梅毒证实试验 常用方法：FTA-ABS试验和MHA-TP试验 其他：PCR和免疫印迹（westen blot）,免疫印迹（westen blot）,PCR电泳图,防治原则,加强性卫生的宣传教育和严格社会管理 早期确诊并彻底治疗 青霉素治疗,第三节 疏螺旋体属,伯氏疏螺旋体(B.burgdorferi),伯氏疏螺旋体是莱姆病（Lyme）的病原体。,疏螺旋体属（borrelia）,伯氏疏螺旋体

9、回归热疏螺旋体 奋森螺旋体,伯氏螺旋体,螺旋稀疏而两端稍尖，运动活泼 Giemsa染色法染色呈淡紫色,致病性,莱姆病 人畜共患病，是一种自然疫源性传染病 储存宿主：鼠类和鹿 传播媒介：硬蜱,致病性,临床表现 丘疹经330d潜伏期，在叮咬部位可出现一个或数个慢性移行性红斑(ECM) （） 早期 乏力、发热、关节炎等 晚期 慢性关节炎、神经系统异常,免疫性,人和动物感染伯氏螺旋体，可产生特异性抗体,主要靠血清学试验和分子生物学技术来诊断 特异性抗体检测 ELISA 间接免疫荧光法 ,微生物学检查,防治原则,避免硬蜱的叮咬 疫苗的使用 口服四环素、羟氨苄青霉素等,回归热螺旋体,传播媒介为节肢动物 虱流行性回归热 蜱地方性回归热 临床表现 高热、肝脾肿大 回归热,回归热疏螺旋体形态 银染色，2000,回归热是由多种疏螺旋体引起的急性传染病。其临床特点为急起急退的高热，间隔个周，全身肌肉酸痛，1次或多次复发，