第14章 铁皮石斛快速繁育.ppt

1、第14讲 铁皮石斛的繁育技术,石斛简介 铁皮石斛的价值 铁皮石斛的繁育 铁皮石斛的物候观察,1. 石斛简介,石斛又名石斛兰，为兰科石斛属植物。原产地亚洲热带和亚热带，澳大利亚和太平洋岛屿，全世界约有1500余种。我国约有76种，其中大部分分布于西南、华南、台湾等地。是我国古文献中最早记载的兰科植物之一。由于其花形、花姿优美，艳丽多彩，种类繁多，花期长，有一定的观赏价值。因此，在国际花卉市场上占有重要的位置。,紫瓣石斛,小黄花石斛,小双花石斛,球花石斛,美花石斛,密花石斛,铁皮石斛,铁皮石斛是所有石斛中的极品，它因表皮呈铁绿色而得名。又名铁皮枫斗或枫斗. 铁皮石斛等少数品种之嫩茎，扭成螺旋状或弹

2、簧状，晒干，商品称为耳环石斛。 除了前面讲述的观赏价值外，铁皮石斛更重要的是其独特的药用价值，一般以其茎和花入药。 中国药典记载: 石斛，属补益药中的补阴药，益胃生津，滋阴清热。有”神仙草”的传说.,古老传说 相传在两千多年前，秦始皇身边有一个叫徐福的术士，有一天徐福做了奇异的梦，梦见在浩瀚飘渺的大海中有一座仙山，山上开着一朵奇葩，有一天来了两位仙子，她们笑吟吟的对那颗奇葩说：“恳请紫楹仙子赐予救命仙丹”，说完从头发上取下一支银簪，往奇葩的花瓣上轻轻拔出一颗玉露放入一只拇指粗细的玉环中，然后一起道谢：“多谢紫楹”。随即两位仙子化成羽毛随风飘逝。徐福看傻了，呆呆地伸出手想去摸一下那棵奇葩，猛然间

3、电闪雷鸣，狂风大作，一条蛟龙自天而降，张开血盆大口怒斥徐福：“大胆狂徒，此乃天下第一至阴至纯之宝物，食之可起死回生，长生不老，岂是尔等福薄之辈可享之者？”说完作吞噬状。徐福顿时被吓得魂飞魄散，转身拔腿狂奔，一不小心跌入万长深渊，霎时惊醒，全身虚汗淋漓，原是南柯一梦。 此后一连数日徐福茶饭不思，有一天，他鼓足勇气，把梦中情形奏知秦始皇，自称愿去梦中仙山，为皇帝求长生不老之仙草。秦始皇自统一天下后，唯恐一日西去，千秋万代之基业入他人之手，于是广招天下探求长生不老之药。现在得知徐福所奏，惊喜万分，立即颁旨令徐福带三千童男童女横渡东海，求长生不老之药。无奈大海茫茫，徐福一干人最终还是徒劳无功，有去无回

4、，滞留东瀛岛。传说中随去的三千童男童女就成了今天日本国的祖先。而徐福梦中所见的“紫楹仙子”就是后世的滋阴极品-被历代帝皇争相企求的无上宝物，居“中华九大仙草”之首的“野生铁皮石斛”，其中的“紫楹”即“滋阴”之意也。千年仙草-铁皮石斛的故事，被人们代代相传，一直到今天。,2. 铁皮石斛的药用价值,铁皮石斛位居“中华九大仙草”之首，而且是惟一的补阴良药。 “中华九大仙草” ：铁皮石斛、天山雪莲、三两重人参、百二十年首乌、花甲之茯苓(F Lng） 、苁蓉、深山灵芝、海底珍珠、冬虫夏草。一千多年前的道家典籍道藏 本草纲目拾遗：赞铁皮石斛为 “滋阴补益珍品”，“强阴益精。久服，厚肠胃，补内绝不足，平胃气

5、，长肌肉。,从前有一个富户，家里只有一个女儿。后来雇了个做工的，这个人很勤快，富户的女儿喜欢上了他，但是富户很生气，把他撵走了。 打工的走了以后，富户把女儿也关了起来，不让他们见面。过了半年的光景，这女的得了麻疯病，家里人怕传染，就把她送到山里去了，那打工的知道了，也住到山里，给她买东西做饭伺侯她。大麻疯病人浑身都不象样子了，他也不嫌。 后来他也传染上了，怎么办呢？这年冬天他们正出来晒太阳，看到山底下有两个小兔正在抢吃一个松木上的疙瘩。男的就下去，想逮住小兔拿来吃，可是一到山下兔子就没了，天天如此，最后，他想了个法儿才把小兔逮住了。他们扒了兔皮饨了一大锅，连肉带汤全吃了。吃了以后他们就象瘫了一

6、样，出了一身冷汗，全身的烂皮都脱下去了。他俩的病竟然一下子都好了！他们很奇怪，于是找了个名医来看看兔子到底吃的是些什么东西。医生看后，发现原来是一种生长了千年成了精的草药，这种草药名叫茯苓，因为它有驱风除湿的功效，所以后人常用治疗水肿，皮肤病等疾患。,花甲之茯苓,茯苓,2.1 药用成分,经过国家药检局检验中心分析，主要的成分为石斛多糖、石斛碱、石斛酚、石斛胺，总氨基酸，还有特殊的菲类、联苄类抗癌成分。其中石斛多糖含量高达22%。 1993年，浙江医科大学进行药理测试证实，铁皮石斛有显著提高机体免疫功能，抗衰老，刺激唾液分泌、抗疲劳、耐缺氧等方面的作用。 2000年，经浙江卫生防疫站检测表明有辅

7、助抑制肿瘤的作用。,2.2 功效特点,主治： 病后伤阴，阴虚干咳，声音嘶哑，虚火牙痛，心 悸失眠，盗汗自汗 眼燥目糊，手足心热，神疲烦倦，腰膝酸软，记忆力衰退，大便干结，体弱多病 烟酒过度，夜生活过度，劳累过度等引起的机体不适,2.3 不同石斛品种的药用价值及价格差异,石斛种类繁多，因其来源、生长环境及有效成分的差异较大，其药用价值相差也比较远。 沿用以来一直以黄草石斛为差，以铁皮石斛(枫斗)的药用价值为最高。 目前黄草石斛干品的价格约100元/kg， 鲜铁皮石斛价格约是其20倍（2000-8000元/kg），而干铁皮石斛则超过100倍，可见其价格相差巨大。 目前市场价格几百元一斤的铁皮石斛肯

8、定是假货。 （因为每500克铁皮枫斗的生产成本要近万）,石斛花开忙采摘 市场很俏价格好,铁皮枫斗干品,近似品种中 齿瓣石斛(商品名为紫皮)、细茎石斛(商品名为铜皮)、构状石斛、马鞭石斛、束花石斛等与铁皮石斛大小类似，炮制后容易混淆，常常冒充铁皮石斛(枫斗)出售。 临床使用时一定要注意品种的差别，仔细权衡这相关效用的差别与费用的巨大差距。,注意！,1、鲜吃。洗净去衣直接食用。 2、煎汤鲜铁皮石斛洗净去衣切碎或拍破加水入锅 文火先煎煮2个小时以上，连渣食用。 3、泡茶洗净去衣后切薄片，加清水若干，武火 煮沸再文火煮30分钟或直接沸水冲饮，连渣食用。4、入膳洗净去衣切碎或拍破和鸡鸭等一起文火 炖60

9、分钟，连渣食用。5、浸酒洗净去衣切碎拍破、单味或和其他物料 一起浸入40度以上酒中，3个月后即可食用。 铁皮石斛耐久煮，因此在煎药时，应先煎12h后，再与其他药一起煎煮，以免造成不必要的浪费。,2.4 铁皮石斛的食用方法及注意事项,上等人才有资格享受哦！,鲜食铁皮石斛茎,铁皮石斛的花，开水冲泡后的照片,保存注意事项：,新鲜的铁皮石斛，常温条件下放在通风的地方，放3个月不会腐烂。在冰箱，可以放更长的时间，在冰箱保鲜盒，能保质150天左右。, 石斛碱能引起豚鼠、家兔等动物中等程度的血糖升高, 大剂量能抑制心脏，降低血压，抑制呼吸。因此，在临 床上要注意用量,避免医疗事故发生。 石斛性微寒。对于脾胃

10、虚寒的人来说，大量服用后会 引起消化不良或腹泻；石斛具有生津、滋阴的作用， 比较适合阴虚的人服用，脾虚湿盛者大量服用会滋腻 碍胃，引起消化不良。 感冒初期不宜吃，由于铁皮石斛偏于滋腻，服用后不 利于感冒的治疗。 根据中药的配伍原则，铁皮石斛不宜与寒水石、巴豆、 炒僵蚕等中药同时使用。,食用时注意事项,3. 铁皮石斛的繁育,石斛对环境要求十分严格，大多分布在海拔450900 m的温凉高湿地带，受小环境内的相对湿度、温度、光照等气候因子影响。一般生长于疏林中树干上或石灰岩地区岩石上，海拔可达1 600 m 。 由于对其生长环境需求不甚了解，人工栽培较为困难，长期以来依赖于野生资源。 近年来药品生产

11、企业在云南思茅、西双版纳等地大量收购使得野生铁皮石斛资源濒临灭绝， 因此被濒危野生植物国际贸易公约认定为保护物种，我国二级保护濒危植物(姚能昌, 2004)。,在野生状态下，铁皮石斛繁殖速率低下、生长缓慢； 由于其神奇的药用价值，随之带来的巨额经济效益，迫使人们对其掠夺性采挖，使其野生资源日益减少，远远不能满足国内外市场经济发展和临床医学的需要， 因此，铁皮石斛人工种植展现了良好的前景。,目前,铁皮石斛的主要人工种植地为云南、浙江、福建、广东等地。 相对于其它地区云南夏无酷暑,冬无严寒的气候条件,使得其种植产量远远高于其他地区。 Eg：经过多年比较，云南普洱市种植的铁皮石斛产量与浙江、广东、四

12、川等种植地区相比，可增加051倍左右，每年生长期长达10个多月，采收周期由3年缩短至1年半左右(普洱市委政研室, 2008)。,3.1 铁皮石斛种苗生产,目前铁皮石斛主要是通过组织培养技术来繁殖种苗。 种苗的价格也因品种不同而差异较大，最高可达到30元/株，平均20左右元/瓶。,3.2 铁皮石斛组织培养技术,铁皮石斛组织培养用的外植体主要有种子、原球茎、人工种子及无菌苗幼苗茎段等。 再生植株获得的方式主要有以下几种： （1）种子原球茎小植株； （2）种子原球茎愈伤组织丛芽生根苗； （3）种子原球茎无菌苗茎段小植株； （4）种子愈伤组织原球茎小植株； （5）原球茎人工种子幼苗； （6）茎尖愈伤组

13、织丛芽生根苗等。,3.2.1不同因素对铁皮石斛种子萌发的影响,A. 种龄 研究铁皮石斛26个月种龄的种子时发现，种龄愈长，萌发时间愈短，萌发率愈高。 曾宋君等12在改良N6培养基中培养铁皮石斛种子发现，幼胚胚龄在60 d以下时，种子萌发率很低，随着胚龄的增长，其萌发率逐渐升高，萌发期逐渐缩短，但到达一定的胚龄后，萌发期差异并不显著。 总之，不同种龄的种子萌发率不一样，组织培养应采用健康、老熟的种子。,B. 培养基,铁皮石斛种子可以在N6、改良N6、1/2N6、MS、1/2MS、SH、KS、White等多种培养基上萌发，但是不同的培养基对铁皮石斛种子萌发的影响程度是不一样的。 曾宋君等研究认为，

14、在SH、改良N6、MS、KS、自制PT培养基中，铁皮石斛最适宜的培养基为改良N6或自制PT培养基。 赵天榜等认为，在N6、MS、SH等14种培养基中，除B5外，其他所有基本培养基对铁皮石斛种胚成苗率的影响均优于其减半培养基；其中以N6最好，SH、MS次之。,C. 激素,不同类型的激素对铁皮石斛种子萌发的影响不同，有的起促进作用，有的起抑制作用； 同种激素不同浓度对铁皮石斛种子萌发的影响表现亦有所不同，一般表现为低浓度促进、高浓度抑制。 研究表明，一定浓度的NAA可促进种子的萌发，适合胚的萌发和生长，但过高起抑制作用；6-BA对胚萌发后的生长起抑制作用；2，4-D对胚的萌发起抑制作用；ABA有抑

15、制种子萌发和抑制植物生长的作用；KT、IAA对胚萌发和成苗的影响不大，当浓度过高时对胚萌发起抑制作用。,D. 添加物与碳源,蒋慧萍等研究发现，在播种培养基中加入适宜浓度的6-BA、椰子汁和马铃薯泥，均能提高萌发率和原球茎发生率，并加快萌发速度和生长速度；添加5%香蕉泥和20%马铃薯提取物的1/2MS培养基可明显提高种胚的萌发率； 曾宋君等发现，在改良N6+NAA0.2 mg/L的最适培养基上添加白糖、片糖，胚萌发效果比添加蔗糖好，这可能是因为白糖、片糖中含有适合胚萌发和成苗的矿质元素的缘故。 在组织培养过程中适当添加活性炭，可以吸附代谢过程中产生的废弃物，防止组织褐变，并刺激胚胎的发生与生根。

16、,实例：,白美发等研究认为，N6对铁皮石斛幼苗的增殖效果最好，增产率达1 619.0%，B5次之，1/2MS较差，MS最差。 蒋林等认为，1/2MS+NAA1.0 mg/L+KT0.2mg/L比较适合原球茎的增殖。 陈兆贵等发现，铁皮石斛原球茎增殖的最佳培养基为MS+NAA1.0 mg/L+6-BA1.0 mg/L+KT1.0 mg/L，35 d增殖倍数达到5倍。 总之，针对不同品种，其最佳的诱导原球茎和增殖培养基配方不尽相同，一般以种子为外植体，以N6（或MS)+ NAA（0.2-1.0）mg/L+ mg/L+KT（0.2-1.0） mg/L+活性炭（0.1-0.3）%培养基效果较好。,3.

17、3 组培苗炼苗与移栽,铁皮石斛的组培技术已经相当成熟，现今最大的障碍是组培苗的驯化移栽技术。下述原因成为了铁皮石斛推广种植的最大障碍： 铁皮石斛本身的生境（温凉高湿） 生产成本投入较大，一般种植者很难承受。 需要多年的经验积累或者经过专门的培训。 生长缓慢，一般需3年，云南需1.5年。,组培瓶苗,刚移栽的铁皮石斛,种植了一年的组培苗,3.3.1 瓶苗驯化,将瓶苗置于温室通风低光处炼苗驯化710 d，并逐渐增加光照从面适应温室环境。,3.3.2 移栽,用镊子小心将小苗从瓶中取出,用清水洗净根部附着的培养基，然后使用1 000倍甲基托布津浸泡5 min，稍晾干。 以纯水草基质，1.5寸塑料软杯，每

18、杯种植2株。移栽后2周内遮光70%50%，逐渐增强光照。 前期不浇水，只喷叶面水，种植后35 d喷1次1 000倍多菌灵预防病害。 移栽20 d后用花多多NPK为94515稀释3 000倍液进行叶面施肥12次促进生根，当出现新根后开始施肥，生长期施用1 500倍液的花多多311与222交替使用，每1015 d喷1次，成活率达100%。,种植8个月单株茎数4.15条，最长茎达12.50 cm，茎粗0.45cm，节长1.36 cm，叶长5.32 cm，叶宽1.2 cm，生长健壮。,人工自然繁育,主要是通过铁皮石斛枝条的扦插繁殖，操作相对简单，但繁殖效率较低。耗时费力，且效果不显著，使用相对较少！

19、略讲,4. 铁皮石斛的物候观察,4.1形态特征 铁皮石斛的茎丛生，圆柱形，直立，铁绿色，有明显的节和纵槽纹，基部稍窄；高几厘米至几十厘米不等，节间略膨大，节部稍缢缩，黑褐色并具明显光泽。叶少数，互生于茎上部，无柄，叶片长圆状披针型；叶鞘膜质，紧抱节间，灰白色；叶面与叶鞘均具淡紫色斑点。,总状花序生于具叶或无叶茎的上部节上，花25朵，淡黄绿色或淡黄色。果实为蒴果，长卵状，蒴果种棱为3棱，色暗绿至青绿色，布有棕褐色斑点；种子小而多，种皮是一层透明的薄壁细胞，有加厚的环纹，种皮含大量空气；种内胚发育不全或不成熟，无胚乳。根附生于岩石上，为无分枝的气生根，扁圆，白色，绿色或灰白色、灰袍色，粗1 mm左右，长度与株高一般。,4.2生长特性,1.2.1生长环境铁皮石斛多生长于海拔4001 600 m之间、年平均气温1218、相对湿度60%75%、透光度60%左右、生长季节温度2028、冬季气温912、无霜多雾、年降雨量5001 000 mm的常绿阔叶林中。 铁皮石斛自然结实率很低，何平荣等认为平均自