生物安全管理与防护

1、生物安全管理与防护,生物安全管理与防护,生物安全管理与防护,主要内容,实验室感染史 生物安全管理现状与意义 这几个概念你了解吗 生物安全柜的分类和正确使用 几个误区要关注 生物安全防护的要点,生物安全管理与防护,实验室相关 性感染 Laboratory associated infections,实验室感染,实验室获得 性感染 Laboratory acquired infections,又称,实验室感染简史,生物安全管理与防护,实验室感染简史,1886年 Koch报告第一例霍乱病的实验室感染：德国柏林的一名学生在处理霍乱弧菌培养物时被感染并发病 1893年 Reincke报告第一例实验室伤寒

2、感染 1899年 Birt和Lamb报告第一例布氏杆菌引起的实验室获得性感染 1905年 Johnston报告第二例布氏菌实验室感染并作了评价,生物安全管理与防护,1931年 Findlay报告第一例实验室感染肝炎的 病例 1932年 有报告实验室工作人员被恒河猴咬伤 后患猿猴疱疹病毒性脑炎，这是该病毒感染 人类的第一例 1943年 在巴西的黄热病实验室，两周内8名 实验室人员发生了委内瑞拉马脑炎 1967年 在德国有26名实验室人员因接触黑尾 长猴的血液和组织而感染一种病毒 (马堡病 毒)，最终有9人死亡,实验室感染简史,生物安全管理与防护,1969年 尼日利亚北部一家医院3名护士感染砂粒

3、病毒，其中2人死亡。这是该病毒感染人的首次报 告 （1951、1965、1976）美国实验室相关感染调查 5000个实验室 累计感染总数：3921例 与已知事故相关的80%（气溶胶？） 最常报告的感染：乙型肝炎、肺结核、伤寒、委内瑞拉马脑炎、布鲁氏菌病,实验室感染简史,生物安全管理与防护,1999年 Walker等报告实验室人员感染率 19941995年为16.2人/10万年 19881989年为82.7人/10万年 2003年后 新加坡、台湾和北京先后发生了实验 室人员感染SARS-CoV的报告 2004年 中国CDC病毒所形态室SARS-CoV感染 事件导致9人感染，其中1人死亡，747人

4、被隔离,实验室感染简史,生物安全管理与防护,实验室感染的证据分析,宋、杨均在同一实验室工作，该室一直从事SARS-CoV工作 封锁病毒所后，未再出现任何SARS病人 第二代病例魏某胸水中分离到SARS-CoV，其全基因序列与实验 SARS-CoV高度同源 宋、杨从未接触过野生动物 宋、杨潜伏期内北京没有任何其他SARS病例 主要原因：病毒灭活不彻底，灭活方法没有进行有效的评 评价，没有规定对每一批病毒的灭活效果进行监测和质控 责任追究： 13名处级以上领导被免职名处级以上领导被免职,生物安全管理与防护,生物安全目标,促进致病微生物/化学毒物/放射线/ 基因的安全操作并教育人们在下述环 境安全操

5、作： 实验室 调查现场 生产设施 医疗卫生设施 最终目标：实验室安全事件零发生！,生物安全管理与防护,生物安全管理与防护,生物安全管理与防护,生物安全管理与防护,我国的实验室生物安全管理现状,以上立法工作对促进和加强我国生物 安全起到了重要的指导作用，使得实验室的 生物安全相关工作有法可依!,生物安全管理与防护,我国的实验室生物安全管理现状,2008年9月8日，评审“十一五”国家科技支撑计 划重点项目“实验室生物安全关键技术和标准的 研究”课题，内容涉及实验室空气污染防护、实 验室感染性污水安全输送、实验室污染空气实时 监测、实验室实时监控网络、实验室污染物泄漏 以及实验室外环境样本采集等六个

6、研究方向,生物安全管理与防护,建立生物安全实验室、加强实验室的生物安全 管理，对于我国的实验室生物安全、生物防护 （国防）、传染病预防与控制、动物防疫、出 入境检验检疫、医院感染控制和实验室网络建 设等，均具有十分重要的意义：1、为建立和管理病原微生物和其他研究生物安 全平台提供保障 2、为医院感染控制提供科学、安全的平台 3、为加强各实验室对突发公共卫生事件应对能 力提供科学、安全的实验平台,生物安全实验室的重要意义,生物安全管理与防护,实验室生物安全防护 biosafety protection for laboratories 实验室工作职员所处理的实验对象含有致病的微生物及其毒素时，通

7、过在实验室设计建造、使用个体防护设置、严格遵从标准化的工作及操纵程序和规程等方面采取综合措施，确保实验室工作职员不受实验对象侵染，确保四周环境不受其污染。 微生物危害评估 hazard assessment for microbes 对实验微生物和毒素可能给人或环境带来的危害所 进行的评估。,生物安全管理与防护,由人为操作或人类活动而导致生物体或其产物对人体健康和生态环境 的现实损害或潜在风险。这里的危害包括对操作者、其他相关人员、 环境和其他生物的危害,生物因子将要或可能形成的危害，是伤害概率和严重性的综合。又称生物风险,生物安全管理与防护,F 由动物、植物、微生物等生物给人 类健康和自然环

8、境可能造成不安全 的防范;包括由现代生物技术的开 发和应用可能产生的负面影响所采 取的有效预防和控制措施,避免危险生物因子造成实验室人员暴露、向实验室外扩散并导致危害的综合措施,生物安全管理与防护,生物安全实验室（biosafety laboratory ) 是指通过防护屏障和管理措施，从事传染性物质操作的实验室， 包括:研究用实验室、动物实验室、临床检验实验室、公共卫生实验室、传染病监测实验室等,生物安全管理与防护,什么是生物安全柜？,生物安全柜 (BiologicalSafety Cabinet, BSC) 指防止操作者和 环境暴露于实验过程中产生的生 物气溶胶的负压过滤排风柜。 它是实验

9、室最基本也是最重要的 安全设备。,生物安全管理与防护,I级生物安全柜 class biosafety cabinet 至少装置一个高效空气过滤器对排气进行净化，工作时柜正面玻 璃推拉窗打开一半，上部为观察窗，下部为操纵窗口，外部空气 由操纵窗口吸进，而不可能由操纵窗口逸出。工作状态时保证工 作职员不受侵害，但不保证实验对象不受污染。 II级生物安全柜 class biosafety cabinet 至少装置一个高效空气过滤器对排气进行净化，工作空间为经高 效过滤器净化的无涡流的单向流空气。工作时正面玻璃推拉窗打 开一半，上部为观察窗，下部操纵窗口。外部空气由操纵窗口吸 进，而不可能由操纵窗口逸

10、出。工作状态下遵守操纵规程时既保 证工作职员不受侵害，也保证实验对象不受污染。 III级生物安全柜class III biosafety cabinet 至少装置一个高效空气过滤器对排气进行净化，工作空间为经高 效过滤器净化的无涡流的单向流空气，正面上部为观察窗，下部 为手套箱式操纵口。箱内对外界保持负压可确保人体与柜内物品 完全隔尽。,生物安全管理与防护,物理抑制设备 physicalcontainmentdevice 用物理或机械方法防止致病微生物逸出的设备。 高效空气过滤器HEPA(high efficiency particulate air)filter 在额定风量下，对粒径大于即是

11、0.3m的粒子 捕集效率在99.97%以上及气流阻力在245Pa以下 的空气过滤器。,生物安全管理与防护,实验室感染又称实验室相关性感染(laboratory associated infections)，或实验室获得性感染(laboratoryacquired infections) 其中由于微生物气溶胶所致的实验室感染占有重 要地位。有研究表明已知原因的实验室感染只占全部感染的18， 不明原因的实验室感染却高达82。对不明原因的实验室感染的 研究表明，医学实验室的许多操作可以产生气溶胶，由于其气溶 胶分子小，易漂浮在空气中，大多数可能是病原微生物形成的感 染性气溶胶在空气扩散而污染实验室的

12、空气，当工作人员吸人了 污染的空气，便可以引起实验室相关感染。在病原微生物实验室 中，产生的微生物气溶胶可分为两大类：一类是飞沫核气溶胶， 另一类是粉尘气溶胶。 微生物气溶胶的定义 是指液体或固体微粒均匀地分散在气体中形成的相对稳定的悬浮 体系。微生物气溶胶是一群形体微小，构造简单的单细胞或接近单细胞的生物悬浮于空气中所成的胶体体系。粒子大小在0.01100m，一般为0.130m。,生物安全管理与防护,2、微生物气溶胶的特点 ）生物气溶胶无色无味、无孔不入，不易发现，实验人员在自然呼吸中不知不觉吸入而造成感染。若治疗控制不及时会造成严重后果。 ）与其自然感染的疾病相比，有些微生物气溶胶感染的症

13、状不典型， 病程复杂，难以及时诊治，影响预后。 ）有些气溶胶感染只有呼吸道粘膜免疫才有预防作用，非呼吸道免 疫途径预防作用效果欠佳。现有常规疫苗的预防效果不理想，如肺 炭疽。 ）呼吸道传播的传染病的微生物特别是高致病性病毒常常发生变异， 尤其是其抗原性、致病性都可能发生改变，在空气中存活力增强。 ）气溶胶传播容易发生病原体在人与人、人与动物、动物与动物之 间的传播。 ）可以远距离或较远距离传播，这是其与其他传播途径的显著区别， 也是气溶胶传播难以预防的另一重要原因。,生物安全管理与防护,气溶胶的产生,任何形成液体薄膜和引起明显 压力差的操作均可产生 细菌接种环接种、注射器、移 液管、离心机、标

14、本混匀、匀 浆、振荡、开启培养皿、标本 涂片、倾倒和泼洒 86.6%实验室操作可产生气溶胶,生物安全管理与防护,如何减少或杜绝气溶胶对人体危害呢,标准预防 规范操作 科学使用离心机 根据实验室级别配置相应级别的生物安全柜 合理的建筑布局和流程 使用警示标识,生物安全管理与防护,生物安全标识 凡是盛装生物危害物质的容器、运输工具、进行生物危险物质操作的仪器和专用设备等都必须粘贴标示有相应危害级别的生物安全标识。 生物安全标识的使用 在生物安全实验室入口的明显位置必须张贴生物危害标志。标志上应明确标示实验室生物安全水平等级，实验室生物安全责任人、紧急联系方式等。,生物安全管理与防护,生物安全柜（B

15、SCs） 英文全称： Biosafety cabinets。 用途：保护操作人员、环境和实验物品 提醒：应与“超净工作台”区分开 种类：共分级、级和级三种。 级分类：分为A1、A2、B1和B2四型。,生物安全管理与防护,BSC排气循环排处连接,所有生物学污染的管道均为负压状态。,生物安全管理与防护,HEPA过滤器(high-efficiencyparticulate air filters)：高效空气滤过器。 洁净空气是通过HEPA过滤器从生物安全柜排出 HEPA 过滤器可滤掉99.97%的直径为0.3微米的颗粒；但化学气体或烟雾可通过HEPA过滤器,生物安全管理与防护,生物安全柜的定期检测,

16、由专业人员定期检测（建议年检），主要以三 方面为例： 进气流流速检测（除A1型外，应不低于0.5m/s） 气流模式检测 过滤器防漏检测,生物安全管理与防护,生物安全柜的定期检测,气流模式检测合格标准： 工作区的下沉气流没有死点或回流 整个工作开口区烟雾都是向内流动 从外部进入的烟雾不会直接进入操作区域 操作区的烟雾不会自前窗上沿或边缘逃逸,生物安全管理与防护,生物安全柜的定期检测,HEPA过滤器摘除后需要在至少1000的温度下焚 烧。在焚烧之前推荐进行下述处理： 在摘除前用喷漆喷头给过滤器的裸露表面喷雾。 在摘除过程中将过滤器“装袋”。,生物安全管理与防护,亚太地区三分之一实验室 的生物安全柜

17、处于不安全状态！,生物安全管理与防护,误区一 追求高大上，生物安全柜 选型不当,生物安全管理与防护,生物安全柜的分类,所有,生物安全柜级,别一定是经NSF认证的。,生物安全管理与防护,生物安全柜的分类,一级二级三级 所有的生物安全柜级别一定是经NSF认证的。,生物安全管理与防护,级生物安全柜的细分及特征,级生物安全柜有4种类型：,生物安全管理与防护,级生物安全柜的细分及特征,由,强化的安全,性能， 级A2型是研究实验室最常用的生物安,柜,于易于使用,生物安全管理与防护,2020/9/16,误区二 专业知识欠缺， 生物安全柜安装问题多,生物安全管理与防护,合适的安装地点,远离门、可打开的窗、空调

18、通风口、风扇、 实验室内人员走动频繁处。 排气区尤其容易造成气流干扰。 安全柜顶部和天花板间至少保持40cm。,生物安全管理与防护,误区三 有了生物安全柜，一切就 “OK”？,生物安全管理与防护,BC的“灵魂”气流平衡（气流 稳定性）,下降气流流速测试,流入气流流速测试,生物安全管理与防护,生物安全柜的操作技术,物品平行摆放原则 & 不同样品柜内移动原则,洁净物,污染物,避免震动原则,缓慢移动原则,明火使用原则,生物安全管理与防护,正确使用生物安全柜,个人防护 安全柜内物品摆放原则 紫外灯的使用 尽量避免使用明火 操作宜缓慢 柜内移动物品时应尽量避免交叉污 染 避免震动 操作结束后选用合适的消

19、毒剂清洁 安全柜内表面 安全柜只有在工作正常时才能使用,生物安全管理与防护,本生灯 ,不能在生物安全柜内使用明火；,使用明火将造成气流动荡，破坏HEPA过滤 气源吹向台面的模式。,红外高温灭菌器 ,生物安全管理与防护,误区四 生物安全柜监控成“空白”,生物安全管理与防护,生物安全柜临床应用、维护与保养,下列情况时，应对生物安全柜进行现场检测： 生物安全实验室竣工后，投入使用前，生物安全柜已安装完毕 生物安全柜被移动位置 对生物安全柜进行检修 生物安全柜更换HEPA过滤器后 生物安全柜一年一度的常规检测,生物安全管理与防护,生物安全柜的监测,设备,人员,环境,人员、试验品和环境保护的微 生物挑战

20、测试； 下降气流流速测试；,流入气流流速测试； 工作舒适度有关标准； 高效过滤器完整性测试； 柜体泄漏的测试。,生物安全管理与防护,生物安全柜临床应用、维护与保养,维护与保养： 每次实验结束后应对工作室进行清洗和 消毒。 过滤器一旦受损，应及时更换。 高效空气过滤器有一定的使用寿命，随 着使用期的延长，细菌和尘埃积聚在过 滤器上，会导致高效空气过滤器压力损 失的增大。高效空气过滤器的使用寿命 到期后，应立即更换。由于过滤器可能 带有污染物，操作时应注意安全防护， 最好请专业人员来更换。,生物安全管理与防护,1.可能产生致病微生物气溶胶或出现溅出的操作均应在生物安 全柜(级生物安全柜为宜)或其他

21、物理抑制设备中进行，并 使用个体防护设备。 2.处理高浓度或大容量感染性材料均必须在生物安全柜(级生 物安全柜为宜)或其他物理抑制设备中进行，并使用个体防护设备。 上述材料的离心操作如果使用密封的离心机转子或安全离心 杯，且它们只在生物安全柜中开闭和装载感染性材料，则可 在实验室中进行。 3.当微生物的操作不可能在生物安全柜内进行而必须采取外部 操作时，为防止感染性材料溅出或雾化危害，必须使用面部 保护装置(护目镜、面罩、个体呼吸保护用品或其他防溅出保 护设备)。,二级生物安全防护实验室 安全设备和个体防护,生物安全管理与防护,4 . 在实验室中应穿着工作服或罩衫等防护服。离开实验室时， 防护

22、服必须脱下并留在实验室内。不得穿着外出，更不能携 带回家。用过的工作服应先在实验室中消毒，然后统一洗涤 或丢弃。 5. 当手可能接触感染材料、污染的表面或设备时应戴手套。如 可能发生感染性材料的溢出或溅出，宜戴两副手套。不得戴 着手套离开实验室。工作完全结束后方可除去手套。一次性 手套不得清洗和再次使用。,生物安全管理与防护,实验室设计和建造的特殊要求,1.每个实验室应设洗手池，宜设置在靠近出口处。 2.实验室围护结构内表面应易于清洁。地面应防滑、无缝隙。 3.实验台表面应不透水，耐腐蚀、耐热。 4.实验室中的家具应牢固。为易于清洁，各种家具和设备之间应保持一定间隙。应有专门放置生物废弃物容器

23、的台(架)。 5.实验室应有可开启的窗户，应设置纱窗。 6.在实验室所在的建筑内应高压蒸汽灭菌器，并按期检查和验证，以保证符合要求。 7.应设置洗眼设施，必要时应有应急喷淋装置。 8.实验室门宜带锁、可自动关闭，门有可视窗。 9.实验室出口应有在黑暗中可明确辨识的标识。 10. 应通风，如使用窗户自然通风，应有防虫纱窗。,生物安全管理与防护,二级生物安全防护实验室操作要点,1.实验室人口须贴上生物危险标志，注明危险因子、生物安全级别 、负责人姓名和电话、进人实验室的特殊要求及离开实验室的程 序； 2.禁止非工作人员进人实验室。参观实验室等特殊情况须经实验室 负责人批准后方可进入； 3.禁止在工

24、作区饮食、吸烟、处理隐形眼镜、化妆及储存食物； 4.接触微生物或含有微生物的物品后，脱掉手套后和离开实验室前 要洗手； 5.以移液器吸取液体，禁止口吸； 6.制定尖锐器具的安全操作规程； 7.按照实验室安全规程操作，降低溅出和气溶胶的产生； 8.每天至少消毒一次工作台面，活性物质溅出后要随时消毒；,生物安全管理与防护,9. 所有培养物、废弃物在运出实验室之前必须进行灭活，如高压 灭活。需运出实验室灭活的物品必须放在专用密闭防漏的容器内储存、运输及消毒灭菌； 10.如有条件工作人员应接受必要的免疫接种 (如卡介苗等)； 11.必要时收集从事危险性工作人员的基本血清留底，并根据需要 定期收集血清样

25、本，应有检测报告，如有问题及时处理； 12.将生物安全程序纳入标准操作规范或生物安全手册，由实验室 负责人专门保管，工作人员在进入实验室之前要阅读规范并按 照规范要求操作； 13.工作人员要接受有关的潜在危险知识的培训，掌握预防暴露以 及暴露后的处理程序。每年要接受一次最新的培训； 14.实验设备在运出修理或维护前必须进行消毒； 15.人员暴露于病毒时，及时向实验室负责人汇报并记录。,生物安全管理与防护,为何需使用生物安全柜?,考虑对操作人员，操作样品，操作环境的保护。 美国国家卫生研究院NIH标准与美国国家疾病控制中心CDC 实验室生物安全级别标准中要求： 应用于临床、诊断、教学、研究、或者

26、生产设施，开展有 关内源性和外源性病源的工作，若因暴露而吸入该病源, 会引发严重的、可能致死的疾病。,1.需使用ClassII级生物安全柜 2.实验人员受过专业训练 3.应有管道化的排气系统，排出的空气不再循环至建筑 物内的任何其他区域。 4.建议生物安全柜每年经过测试和确证,生物安全管理与防护,生物安全设备分类,1.超净台 2.抽风橱 3. CLASS I 一级生物安全柜 4.CLASS II 二级生物安全柜 5. CALSS III三级生物安全柜（又称手套柜）,生物安全管理与防护,1、超净台,正压柜 气 流 从 顶 部 或 底 部 经 过 过 滤 器 后 从 操 作 区 正 面 流 向 工

27、 作 台 面 ， 被 样 品 污 染 的 气 流 排 出 柜 外 ， 没 有 循 环 气流。 超净台保护样品不受污染， 适用于普通实验室或1级生 物安全水平中对人员和环 境无保护要求的实验。,1、超净台,生物安全管理与防护,2、CLASSI一级生物安全柜,全柜, 负压柜 气流经操作人员向内进入工作 台面，被污染的气流通过HEPA过 滤器外排出柜外，没有循环气流。 CLASS I级BSC保护操作人员和 环境不受污染，适用于生物安全 水平中对实验样品无保护要求的 实验。,生物安全管理与防护,3、CLASSII 二级生物安全柜,层流负压柜 它们可以安全的保护样品、人员和环境。 II 级生物安全柜分为

28、A型（30%排在室内）和 B型； B型中又分为B1 （70%接管道外排） B2（100%接管道外排）B3（30%接管道外排）,生物安全管理与防护,CLASSIIA生物安全柜,进入气流最低流速平均为0.38米/秒)； 30%气流经HEPA过滤后外排在室内； 被污染的管道和气流通道为正压状态,生物安全管理与防护,生物安全柜空气流向,生物安全管理与防护,CLASSII B1生物安全柜,进入的气流最低流速平均为0.5米/ 秒； 70%气流通过专用的管道经HEPA过滤 后接管道外排至室外； 所有受生物污染的管道和气流通道 均在负压状态下或被负压的管道或气 流通道包围。,生物安全管理与防护,CLASSII

29、B2生物安全柜,进入气流最低流速平均为0.5米/秒； 所有向内进入的气流和向下的气流均 通过HEPA过滤后排到室外而不在柜内 循环，也不能排入实验室；100%接管 道外排。 所有的被污染的管道和气流通道都在 负压状态下或被直接外排的负 压管道 或气流管道所包围。,生物安全管理与防护,CLASS II B3生物安全柜,进入的气流最低流速为0.5米/秒； 外排到室外的气流（30%）经过HEPA高 效过滤； 所有经生物污染的管道和气流通道均 为负压状态； 与CLASS II A型气流方向相同，但与 CLASS A型不同的是，它30%外排气是接管道排到室外的。,生物安全管理与防护,II级生物安全柜 A

30、irflow,生物安全管理与防护,4. CLASSIII生物安全柜（手套柜）,全封闭的、气密结构的通风柜； 通过橡胶手套进行操作； 柜内保持至少120Pa的负压； 供气通过HEPA抽入内； 外排的气流经过双层HEPA过滤或经HEPA后 再经燃烧处理。 CLASS III 型BSC适用于BSL3、BSL4的生 物实验。,生物安全管理与防护,生物安全装置异同,生物安全管理与防护,级、级和级生物安全柜的区别,生物安全管理与防护,根据保护类型的需要选择适宜的生物安全柜,生物安全管理与防护,对各级生物安全水平实验室的要求,生物安全管理与防护,洁净台,生物安全管理与防护,洁净工作台,1、环境空气工作台过滤

31、样本直接吹向操 作者排入室内 2、保护产品，不保护操作人员及操作环境 3、通过样本的空气过滤对直径大于0.3微米的颗 粒，过滤效率99.9%无医院药房或无菌设备的组装。,生物安全管理与防护,生物安全柜,1、环境空气进入工作台过滤样本高效 过滤排入室内或室外 2、经过样本的空气及排放出的空气均经过滤， 对直径大于0.3微米的颗粒，超高效过滤器的过 滤效率为99.999%。 3、采用负压装置，形成气幕防护屏障，保护操 作人员安全应用于有一定生物危险的操作。,生物安全管理与防护,洁净工作台生物安全柜,1、环境空气（流动/排出方式） 2、使用目的（产品、操作人、环境） 3、空气滤过能力 4、气幕屏障

32、5、应用,生物安全管理与防护,实验室生物安全的个人防护,生物安全管理与防护,微生物实验室生物安全防护,1、临床微生物实验室中引起实验室获得性感染的 微生物种类： 细菌：布鲁菌、铜绿、结核、肠道致病菌等 病毒：经血、呼吸道传播的病毒，其他病毒 真菌：二相真菌、孢子菌等 其他：衣原体、钩端螺旋体等 寄生虫：弓形体、疟原虫、血吸虫等,生物安全管理与防护,2、引起微生物实验室中工作人员发生实验室获得 性感染的途径： 经空气传播：吸入（气溶胶、实验物） 经口传播：“手口”，食入 直接接种：针刺、划伤或咬伤 黏膜接触：（眼结膜） 节肢动物媒介：蚊、蜱、跳蚤等,生物安全管理与防护,3、临床微生物实验室中引起

33、微生物感染机体 的方式： 接触损伤皮肤和黏膜： 吸入： 食入： 接触感染动物：,生物安全管理与防护,4、微生物实验室中病原微生物危险度评价依据： 对人或动物毒性的强弱： 特定病原体是否存在国内： 引发临床症状轻重、病程长短、预后情况 潜伏、慢性、不典型难诊断，无法预防,生物安全管理与防护,5、微生物实验室中病原微生物危险度分 类标准： 级危险：个体/群体极大危害 级危险：个体极大危害/群体极小 级危险：个体中度危害/群体较小 级危险：个体/群体没有或极小,生物安全管理与防护,国家根据实验室防护水平，将实验室分为一级、二级、三级、四级。 临床诊断、检测检验工作可以在二级实验室中进行。 但是，发现

34、高致病性病原微生物的其病原学的分离鉴定工作应当转移到三级以上的实验室中进行。,生物安全管理与防护,实验室生物安全防护分级,一级生物安全防护实验室，简称BSL1或P1 二级生物安全防护实验室，简称BSL2或P2 三级生物安全防护实验室，简称BSL3或P3 四级生物安全防护实验室，简称BSL4或P4,生物安全管理与防护,一级生物安全防护实验室,安全设施和个体防护： 一般无须使用生物安全柜等专用安全设备 工作人员在实验室应穿工作服，带防护眼镜 工作人员手上有皮肤破损或皮疹时应戴手套,生物安全管理与防护,实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人或环境 具有中等潜在危害的微生物 包含微生物举例

35、,麻疹病毒 乙型肝炎病毒 衣原体,沙门氏菌 HIV血清学检测 志贺氏菌,二级生物安全防护实验室,生物安全管理与防护,BSL-2 实验室,生物安全管理与防护,二级生物安全防护实验室,设计和建造的特殊要求： 消毒设施（高压灭菌锅、化学消毒装置等） 洗眼装置 可自动关闭的门锁 门口有发光指示装置 换气装置（3-4次/小时）,生物安全管理与防护,满足一级实验室 (标准微生物操作规程) 各 款要求，在此基础上特别注意： 1. 制定出入制度 2. 实验室人口贴上生物危险标志 3. 制定实验室特定的生物安全操作规则 4. 每年一次最新培训制度,二级生物安全防护实验室 特殊微生物操作规程,生物安全管理与防护,

36、5. 使用塑料器材代替玻璃器材 6. 禁止用手处理破碎的玻璃器具 7. 培养基、组织、体液及其它具有潜在危险性的废弃物须放在防漏的容器中储存、运输及消毒、灭菌,生物安全管理与防护,8. 用过的针头禁止折弯、剪断、折断、重新盖帽， 禁止用手直接从注射器取下。 9. 用过的针头必须直接放入防穿透的容器中。 10.非一次性利器必须放入厚壁容器中并运送到特 定区域消毒，最好进行高压消毒,生物安全管理与防护,11.工作人员应接受必要的免疫接种和检测 (如乙型 肝炎疫苗，卡介苗等) 12.必要时收集从事危险性工作人员的本底血清 13.严格执行实验室工作人员年度采血检测 HIV 抗体 和备案制度。每半年进行

37、一次 HIV 抗体检测，并 保留样品 14.对从事艾滋病实验室工作的人员，因工作中意外 事故造成HIV 职业暴露者，所在单位应负责解决 抗病毒及其它相应治疗的医疗费用,生物安全管理与防护,15.实验设备在运出修理或维护前必须进行消毒 16.人员暴露于感染性物质时，及时向实验室负责人汇 报，并记录事故经过和处理方案 17.禁止将无关动物带入实验室,生物安全管理与防护,二级生物安全防护实验室,安全设施和个体防护： 处理以下致病微生物时应在生物安全柜 (级) 中进 行 ，包括:高浓度容量有喷溅可能性 上述材料的离心操作如使用密封的离心机转子或安全离 心杯，且只在生物安全柜中开闭，可在实验室中进行 级

38、生物安全柜必须每年进行一次年度现场检测,生物安全管理与防护,当微生物的操作不可能在生物安全柜内进行时，须使 用面部保护装置 应有相应的SOP 在实验室中应穿着工作服或罩衫等防护服，不得穿着 外出。用过的工作服应先在实验室中消毒，然后统一 洗涤或丢弃 当手可能接触感染材料、污染的设备时应戴手套。如 可能发生感染性材料的溢出或溅出，宜戴两副手套。 不得戴着手套离开实验室，工作完全结束后方可除去 手套。一次性手套不得清洗和再次使用,生物安全管理与防护,下列操作必须在P2实验室或全排式生物安全柜中进行： 1、含漱液、血清和血液等样品的诊断检测 2、溶解、固定或用其他方法处理灭活的病毒和(或) 有传染性

39、的病毒基因片段 3、常规的细菌和毒素检查 4、可能产生气溶胶的样品处理 5、临床样品的包装、分装 6、离心管和离心机转头的封闭和开启,生物安全管理与防护,实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于 主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病 的致病微生物及其毒素。通常已有预防的疫苗 包含微生物举例,结核分枝杆菌 鼠疫杆菌 Q热病原体 澳大利亚立克次氏体,牛分枝杆菌 炭疽杆菌 HIV(血清学检测除外) 加拿大立克次氏体,三级生物安全防护实验室,生物安全管理与防护,BSL-3 实验 室,生物安全管理与防护,三级生物安全防护实验室,必须安装级或以上生物安全柜，感染性材料的 操作应在生物安全柜

40、中进行。 当操作不得不在柜外进行时，必须个体防护与使 用物理抑制设备综合防护措施 在进行感染性组织培养、有可能产生感染性气溶 胶的操作时，必须使用个体防护设备（如呼吸保 护装置等）。 入室工作前/后有专用更衣室，室内有必备品（消 毒剂、冲洗液、药品等）。 排除的空气不循环，实验室内负压,生物安全管理与防护,下列操作必须在P3实验室中进行： 1、 用细胞培养的方法分离病毒 2、收集或浓缩病毒或其培养产物 3、用活病毒或病毒的全基因接种动物 4、咽拭子样品的诊断检测,生物安全管理与防护,P3实验室示意图,生物安全管理与防护,实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人体 具有高度的危险性，通

41、过气溶胶途径传播或传播途径不明， 目前尚无有效的疫苗或治疗方法的致病微生物及其毒素 与上述情况类似的不明微生物，也必须在四级生物安全防护 实验室中进行，带有充分数据后再决定此种微生物或毒素应 在四级还是在较低级别的实验室中处理 包含微生物举例 黄病毒埃博拉病毒(主要为接触传播) 中欧蜱传脑炎病毒,四级生物安全防护实验室,生物安全管理与防护,四级生物安全防护实验室,在级生物安全柜中进行操作。 入室必须换上全套实验室服装。 实验室必备的配套装置与装备。,生物安全管理与防护,BSL 4,被戏称 为 “魔鬼 实验室” 分为 五个区 共有 10道门,生物安全管理与防护,粘膜污染：用大量流水或生理盐水彻底冲洗污染 部位 衣物污染：尽快脱掉污染的衣物，进行消毒处理 污染物泼溅： 发生小范围污染物泼溅事故时，应立即进行消