2021年药学毕业设计(论文)开题报告范本

1、药学毕业设计(论文)开题报告范本 课题名称 HPLC法测定伏立诺他有关物质和含量的研究 vorinostat (商品名Zolinza) 是Merck 公司开发的世界上第一个抑制组蛋白脱乙酰基酶( his2tone deacetylase ,HDAC) 的新型抗癌药物,该药于xx 年10 月6 日获得美国FDA 批准上市,用于其他药物治疗时或治疗后仍不能治愈、或恶化、或病情反复情况下的转移性皮肤T 淋巴细胞瘤。vorinostat 化学名: N-羟基-N苯基辛二酰胺;英文名: N-hydroxy-N-phenyloctane-diamide vorinostat 属于组蛋白去乙酰化酶抑制剂类抗肿

2、瘤药物,低浓度( IC50 86 nmolL - 1) 即可以有效抑制组蛋白脱乙酰酶HDAC1 、HDAC2 、HDAC3 和HDAC6 的活性,抑制组蛋白次乙酰化,因而从基因水平调控细胞周期,阻断癌细胞基因复制,并激活其凋亡基因,达到抑制和杀灭癌细胞的效果。但vorinostat 的抗癌机制仍在深入研究之中,其具体作用机制尚不完全清楚6 - 7 。两项临床试验证明了vorinostat 的安全性和有效性,其中包括107 名接受其他药物治疗后又复发的CTCL 患者。按皮肤损伤改善标准评分等级的判断,接受Zolinza 治疗的患者中30 %有所改善,疗效平均持续168 d。 一些生物学数据已经证

3、明了vorinostat 在皮肤癌，前列腺癌治疗中的有效性。而且近年研究vorinostat 不仅可以单独作为肿瘤治疗药物,还可以与其它抗癌药物联合用药, 减少对正常细胞的毒性,具有增效作用。可与转录调节因子(如52 杂氮222 脱氧胞苷、视黄酸、mRNA 转录抑制剂flavopiridol)51- 53 、凋亡受体配体(如阿霉素、长春新碱、依托泊苷、多紫杉醇)54- 56、化疗药物(如抗代谢药吉西他宾、全反式维甲酸) 57,58以及激酶抑制剂、放射线等联合用药。近年来研究发现vorinostat 还可影响到有丝分裂、DNA 复制和修复以及调控非组蛋白的蛋白质乙酰化程度。但是该药用于临床治疗癌

4、症仍然需要解决一些问题如: 抑制剂对HDAC 酶系的选择识别作用、选择最佳药用剂量、治疗周期以及寻找更多可以促进这种药抑制作用的物质等。毋庸置疑,随着对HDACIs 抗癌机理的深入研究,vorinostat 将会有广阔的应用前景。 伏诺立他目前在国内还没有上市，我们准备仿制该品种，建立该药的质量标准，用建立的标准对原料和制剂进行有关物质和主药含量进行研究。 根据破坏试验的结果，结合伏立诺他合成工艺，建立伏立诺他有关物质检查方法，并对其进行方法学验证。 1.仪器与药品 Waters 996光电二极管阵列检测器，Waters Empower色谱工作站，试药及其中间体均由南京海纳医药科技公司提供 2

5、. 色谱条件的建立 2.1检测波长的选择 取伏立诺他适量,用流动相制成每1ml含15g的溶液,照分光光度法(中国药典xx年版二部附录 A)在200400 nm波长范围内扫描测定 2.2系统使用性试验 色谱柱:Diamonsil C18 ( 250 mm 4. 6 mm, 5m)色谱柱为分析柱;乙腈- 0.1%磷酸溶液(三乙胺调PH3.0)为流动相，不断调节流动相比例，梯度洗脱，流速为1.0 ml min- 1 , 检测波长为241nm, 柱温30, 进样量: 20l。 根据合成工艺,伏诺立他成药中可能引入一系列的合成中间体及原料还有杂质，取本品可能带入的杂质、中间体分别加流动相适量溶解;另取杂

6、质中间体及伏立诺他适量,用流动相制成适宜浓度的溶液,精密吸取杂质，中间体与吡非尼酮混合溶液各20 l,分别进样，考察分离度，理论塔板数，及拖尾因子，再根据具体条件进行调整，选出最适合的条件。 2.3专属性试验 取供试品,进行高温、光照、酸、碱、氧化破坏试验。 热降解溶液的配制:取本品20 mg,置25 ml量瓶中,置140高温4 h后,用流动相溶解并稀释至刻度; 光降解溶液的配制:取本品20 mg,置25 ml量瓶中,用流动相制成每1 ml含吡非尼酮0. 8 mg的溶液,置紫外灯光下48 h; 酸降解溶液的配制:取本品20 mg,置25 ml量瓶中,加2molL - 1盐酸溶液5 ml,放置4

7、 h,用2 molL - 1氢氧化钠溶液调至中性,加流动相稀释定容; 碱降解溶液的配制:取本品20 mg,置25 ml量瓶中,加2molL - 1氢氧化钠溶液放置4 h,溶液颜色变黄,另加2 molL - 1盐酸溶液调至中性,加流动相稀释定容; 氧化破坏溶液的配制:取本品20 mg,置25 ml量瓶中,加过氧化氢5 ml,避光放置4 h,用流动相稀释定容。照高效液相色谱法,取上述各溶液各20l进样,记录结果，进行分析 2.4线性范围： 精密称取伏立诺他对照品约15 mg,置50ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,作为贮备液。分别精密量取贮备液1、2、3、4、5 ml置10 ml量瓶中,

8、加流动相稀释至刻度,摇匀。分别取溶液20l分别注入色谱仪,记录色谱图,量取峰面积,由溶液浓度(C) 对峰面积(A)线性回归。 2.5检测限：取空白基线一段,计算其噪音峰高,再将伏立诺他样品溶液用流动相稀释适当浓度进样,使其峰高为噪音峰高的3倍,记录检测限。 2.6精密度试验 2.6.1 进样精密度：取标准曲线项下高、中、低三种浓度的溶液,分别重复进样5 次,以峰面积来考察精密度。 2.6.2中间精密度：选择不同人员,分别测定同一批样品的含量。 2.7重复性试验：分别取同一批样品, 6份,精密称定,照样品测定项下操作,计算含量。 2.8稳定性试验：照标准曲线项下的方法配制高、中、低三种浓度 的溶

9、液,分别于0、1、2、4、6、8 h测定。考察其稳定性 2.9含量测定：取本品适量,精密称定,用流动相制成每1ml含50g的溶液,作为供试品溶液,精密量取20l,注入液相色谱仪,记录色谱图,量取峰面积;另取经干燥至恒重的伏立诺他对照品适量,同法测定,按外标法以峰面积计算,即得。 2.10有关物质测定：取本品适量,精密称定,用流动相制成每1 ml含0.5mg的溶液,作为供试品溶液;精密量取供试品溶液1 ml,置100 ml量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀,作为对照溶液。精密量取对照溶液20l,注入液相色谱仪,调节检测灵敏度,使主成分色谱峰的峰高为满量程的10% 25%;再精密量取供试品溶液和对照

10、溶液各20l,分别注入液相色谱仪,记录色谱图至主成分峰保留时间的4倍。供试品溶液色谱图中如有杂质峰,最大单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的1 /2 ( 0.5% ) ,各杂质峰面积总和,不得大于对照溶液主峰面积( 1% )。 【1】胡 杨，陈国华，吴 燕，杨尚彦.伏诺立他的合成J.中国医药工业杂志，xx，40(7)：481-482. 【2】黄小平，徐江. 组蛋白去乙酰化酶抑制剂类抗癌药VorinostatJ.化工中间体，xx，06：11-13. 【3】Sakajiri S, Kumagai T, Kawamata N, et al. Histone deacetylase inhibitors profoundly decrease proliferation of human lymphoid cancer cell lines J. Exp Hematol, xx,33(1): 53-61. 【4】Robert A.Parise, Julianne L.Holleran, Jan H.Beumera, Suresh Ramalingama, Merrill J. Egorin. A liquid chromatographyelectrospray ionization tandem mass spectrometric assay for quant