兽医药物分析.PPT

1、兽医药物分析,Veterinary Drug Analysis,贺利民,828808,专业背景知识,药理学 药物化学 药剂学 药物分析,兽 医,无机化学 有机化学 物理化学 分析化学,化 学,第一章 绪 论,基本要求,明确 兽医药物分析的性质、任务 及其发展趋势。,3. 明确全面控制药品质量的意义。,2. 掌握药品质量标准的定义，熟悉我国兽药典的基本内容,了解国外主要药典。,4. 明确药物分析课程的基本内容,第一节 药物分析的性质和任务,一、药物和药物分析,1） 药物（Drug) 是用于治疗、预防或诊断疾病，有目的地调节人的生理机能并规定有适应症、用法和用量的物质。

2、,是一种特殊商品 Drug 包括化学原料药、抗生素、生化药品及其制剂，放射性药品、血清制品和诊断药品，中药材、中成药等,第一节,2） 兽药 是指用于畜禽等动物的药物, 包括能促进动物生长繁殖和提高生产性能的物质。,第一节,3） 药物分析学,是一门采用化学的、物理的或物理化学的方法和技术，研究药物及其制剂的的化学组成和测定药物组分含量的原理和方法的综合性应用学科。是药学科学的重要组成部分。,第一节,4） 药物分析的内容,检测药物的性状 鉴定药物的化学组成 检查药物的杂质限量 测定药物的含量,第一节,5） 药物分析常用的方法,容 量 法,化学分析法,重 量 法,仪器分析法,光 谱 法,色 谱 法,

3、电 化学 法,物理常数测定法,第一节,光谱分析法,质谱法（ MS ） 高效毛细管电泳（HPCE） 电感耦合等离子体原子发射光谱 (ICP-AES ) 气（液）质联用（ GC/LC-MS ） 傅立叶变换红外分光光度法 FT-IR,其他分析法,第一节,是各种联用技术的开发，分析过程实时化、连续化、自动化及智能化。,6） 药物分析的发展趋势,第一节,二、药物分析的任务,1. 基本任务 （1）药物成品的化学检验工作 （2）药物生产过程的质量控制 （3）药物贮存过程的质量考察 （4）临床药物分析工作,第一节,2. 为相关学科的研究开发提供必要的配合和服务,3. 不断改进和提高药物分析技术，创立新的药物分

4、析方法。,第一节,第二节 药品质量标准与药典,一、质 量,质 量：指产品所具有的、能鉴别是否符合规定的特性。 Quality: 产品或服务满足明确或隐含需要的特征和特性的综合。,第二节,二、药品质量,药品质量特性：疗效确切，使用安全、毒副作用小、稳定性好，有效期长、给药方便、价格便宜、包装适合、便于贮存、运输和使用。 有效性和安全性,三、药品质量标准,药品质量标准是国家对药品质量、规格及检验方法所作的技术规定，是药品生产、供应、使用、检验和药政管理部门共同遵循的法定依据。,第二节,兽药的质量标准，是国家为了使用兽药安全有效而制订的控制兽药质量规格和检验方法的规定；是兽药生产、经营、销售和使用的

5、质量依据，也是检验和监督管理部门共同遵循的法定技术依据。,第二节,兽药的质量标准，一般应包括以下内容： 兽药名称、结构式及分子式、含量限度、理化性状、鉴别项目及方法、含量测定方法、检查项目及方法、作用与用途、用法与用量、注意事项，制剂的规格、贮藏等,第二节,1.中国兽药典及中国兽药规范,2. 行业标准：兽药暂行质量标准、 进口兽药暂行质量标准（中兽监）,我国现行兽药品质量标准,第二节,3. 地方标准：广东省兽药标准汇编,是国家关于药品标准的法典，是国家管理药品生产与质量的依据，和其他法令一样具有约束力。,第二节,四、 药典,（二）内 容,药典的内容一般分为凡例、正文、附录和索引四部分。,现行药

6、典一般分为一、二两部。另还专门出版配套资料，如药品红外光谱集。,（一） 基本结构,1）凡例（General Notices） 是解释和使用药典、正确进行质量检定的基本原则，把一些与标准有关的共性问题用条文加以规定，以避免在全书中重复说明。,2）正文（Monographys） 是药典的主要内容，为所收载具体药品或制剂的质量标准。,3） 附录（Appendix） 附录部分记载了制剂通则，兽用生物制品通则，一般鉴别试验，一般杂质检查方法，有关物理常数测定法，通用分析法，试剂配制法等内容。,4）索引（Index） 中文索引（汉语拼音索引）和英文名称索引。,（三）国外药典,1) 美国药典与美国国家处方集

7、 美国药典 The United States Pharmacopoeia，缩写USP，目前为25版，即USP 25 美国国家处方集 The National Formulary，缩写NF，目前为22 版，即NF（22）,2002年起，二者合并为一册。 如2003年版缩写为 USP（26）-NF（21） USP（25）-NF（20）系2002年亚洲版，为亚洲版药典首版 Labelling供兽药用,3) 日本药局方 缩写JP，目前为14 版，即JP（14）,2) 英国药典 British Pharmacopoeia，缩写BP，目前为2000 年版，即BP（2000）， 第三卷收载兽医药品,4)

8、欧洲药典 European Pharmacopoeia，缩写Ph.Eup，目前为第四版。欧洲药典为其27成员国认可，与本国药典具有同样约束力，并且互为补充,5) 国际药典 The International Pharmacopoeia， 缩写Ph.Int，目前为第四版，由世界卫生组织（WHO）颁布,第三节 兽药质量标准的制订,药品标准是检验药品质量的技术性法规。制订、颁布和执行兽药标准我国由农业部负责。,1、制（修）订兽药质量标准的原则,质量第一的原则，确保药物的有效性和安全性是前提条件 临床内服药严于外用药；注射药严于口服药 考虑生产实际，既要保证质量，又有利于促进生产 应遵循国家兽药标准工

9、作管理办法,2、制（修）订兽药质量标准的基础,新药质量研究工作及其资料 （临床用药品质量标准和起草说明书； 生产用药品质量标准和起草说明书） 是制订药品质量标准的基础,3、制订兽药质量标准的内容,3、修订兽药质量标准的内容,第四节 全面控制药品质量的科学管理,GCP 药品临床试验管理规范（良好药品临床试验规范）1999.9.1 GMP 药品生产质量管理规范 1999.8.1 GSP 药品经营质量管理规范（良好药品供应规范）2000.7.1 GLP 药品非临床研究质量管理规范（良好药物实验研究规范）1999.11.1 GAVP 中药材生产质量管理规范,主要参考书 药物分析 安登魁主编 药物分析

10、冯芳主编 现代药品检验学 人民军医出版社 药物分析及应用 马广慈主编 生物药物分析 何华主编,体内药物分析 张君仁等主编 中药制剂分析 魏璐雪主编 中药分析学 王强主编 药物分析(杂志) 中国药品生物制品检定所 药典通讯(杂志) 药典委员会,第一节 药品检验的程序,一般包括：取样、检验（性状、鉴别、检查、含量测定）、出具检验报告。,第二章 药物分析基本知识,一、基本程序,1、取样（Sampling） 指从一批产品中，按取样规则抽取一定数量具有代表性的样品。 要考虑取样的科学性、真实性与代表性 (Random); 对相关情况进行详细登记。,取样量 设样品总件数为x（按批计）,2、检验（Analy

11、sis) 原则上按相应标准（规定）进行性状检测、鉴别、检查及含量测定； 获得的检验数据应完整、真实； 试验记录要保存3年以上，备查。,3、出检验报告（Assay report) 是对药品质量的评价，结论要明确、依据充分； 内容（抽样情况、样品检验、结论） 三级签名（章）,为保证实验数据的准确、可靠、公正，国家规定向社会提供公正数据的产品质量检验机构，必须通过计量认证。,第二节 计量认证知识,1） 计量认证 是指计量行政部门对有关技术机构计量检定、测试的能力和可靠性进行的考核和证明。,计量检定、测试设备的性能； 工作环境和人员的操作技能； 相关管理制度。,考核内容,2）药分中常用的法定计量单位,

12、我国1984年开始实行法定计量单位（以SI为基础）， 1985年颁布的计量法,药典中常用的法定计量单位,SI的基本单位,分析,受各种主客观因素影响和限制（分析人员操作技术水平、仪器和试剂、分析方法等），任何测定结果都不是绝对准确的，与真值之间总是存在差异误差（error)。,第三节 误差及数据处理,分析,1）误差 = 测量结果-真值 = 测量结果-总体均值+总体均值-真值 = 随机误差+系统误差 测量结果是被测量的最佳估计 测量不确定度？,随机变量的总体特征值和样本估计量,2）有效数值及其运算,（1）有效数字定义 k 10m （1k 10的任意数） M为自然数， k的位数即是有效数字位数,（2

13、）有效数字的运算,加减运算：18.3 + 1.454 6 + 0.876 （小数点位数） 18.3 + 1.45 + 0.88 = 20.6320.6 乘、除等：1.10.326 80.103 00 （有效数字位数）1.10.3270.103=0.037 0 0.037,（3）数值修约,GB/T 8170-1987 （数值修约规则-繁） A. 只有一个数最接近拟修约数 1.150 0011.1；1.2（0.1间隔） B. 有两个数同等接近拟修约数，只有为修约间隔偶数倍的那个数才是修约数。 1.025 1.05； 1.00（5间隔修到3位） （21倍） (20倍）,（4) 数值的舍入规则,8 7

14、65.43 8 765 （被舍数字第一位5） 1 234.5 1 234；8 765.5 8 766（奇偶规则） 1 234.6 1 235；9 876.54 9 877（被舍数 字后5）,（5) 测量结果中离群值的剔除,Grubbs准则 1 求平均值 2 求标准偏差si 3 求残差vi=xi-x平 4 若vig(n)s(xi)，则xi为离群值 g(n)为临界系数，查相应g(n)表 Dixon准则,验证药分方法的目的是证明所采用的方法适合于相应检测的要求。,第四节 药物分析方法的验证,1）需验证的项目 鉴别试验方法、杂质定量或限度检查方法、原料药或制剂中有效成分含量测定的方法以及制剂中其他成分

15、（如降解产物、防腐剂等）的测定方法、溶出量测试方法,2）验证的内容 准确度、精密度 检测限、定量限 线性、线性范围 耐用性、专属性,1) 准确度(accuracy) 指测量结果与被测量的真值或参考值之间的接近程度。 一般以回收率（%）表示； 或与经典方法进行t检验评价。,2） 精密度(precision) 不同领域概念不一，故在VIM中未定义。 在化学领域中，精密度指在规定的条件下所获得的测量结果之间的一致程度。（重复性、重现性） 一般用偏差、标准偏差S或RSD表示。,3） 检测限和定量限(LOD、LOQ) 指样品中被测物能被检测出的最低量。 指样品中被测物能被定量测定的最低量。,目视法：用已

16、知浓度的被测物，试验出能可靠地目视出特定现象的被测成分的最低浓度或量。 信噪比法 LOD: 31 或 21 LOQ: 101,4) 专属性(specificity) 指在其他成分（杂质、降解产物、辅料等）可能存在下，所采用分析方法能准确测定出被测物的能力，是方法抗干扰程度的量度。,5) 线性和线性范围(linearity) 线性：指在一定的浓度范围内，测试结果与式试样中被测物年度呈正比的关系程度。 线性范围：指能达到一定精密度、准确度和线性的前提下，测试方法所适用的高、低限浓度或量的区间。,6) 耐用性（ruggedness) 指在测定条件有小的变动时，分析相同样品所测定试验结果的重现程度，旨

17、为常规检验提供依据。,药品质量标准分析方法的验证项目和内容,1. 物理常数测定的意义 测定结果不仅对药品具有鉴别意义，也反映药品的纯度，是评价药品质量的主要指标之一。 构成法定药品质量标准，测定方法收载于药典附录。,第五节 物理常数测定法,2. 常用物理常数 包括溶解度、沸点、熔点、凝点、相对密度、比旋度、折光率、黏度、吸收系数、碘值、皂化值和酸值等,第五节,2.1 溶解度 准确称（量）取一定量供试品，加入一定量溶剂，在25 2，每隔5min振摇一次，30min内观察溶解情况一般看不到溶质颗粒或液滴时，认为完全溶解。,第五节,第五节,2.2 熔点 指一种物质按规定方法测定，由固体自开始熔解至全

18、部熔解的温度范围。,第五节,2.3 比旋度 旋光度（）：指偏振光的平面向左或向旋转的度数。 比旋度：一定波长和温度下，偏振光透过长1dm，浓度为1g/mL旋光物质的溶液,测得的旋光度。,第六节 理化测定法,是相对生物学测定（效价测定）而言，指以分析化学为基础的药物理化测定法,第六节,1. 化学分析法 以物质的化学反应为基础的分析方法，由重量分析法和滴定（容量）分析法组成。,1.1 重量分析法（挥发法、萃取法和沉淀法）,是称取一定重量的供试品，采用某种物理或化学变化使被测组分从样品中分离出来并转化为一定的称重形式，再根据被测组分和供试品的重量，计算组分的含量。(Trouble & time, a

19、ccuracy),1.2 滴定分析法（直接、返、间接法）,是由滴定管加入已知准确浓度的滴定液至被测物溶液中，使之与被测物计量反应，根据被测物所消耗标准溶液的体积和浓度，计算被测物的含量。 (Simple & fast, unsensitive),第六节,2. 仪器分析法 以物质的物理和化学性质为基础的分析方法。因需要特殊仪器而得名。 (Sensitive,information more),第六节,2.1 光学分析法 吸收光谱法： UV-Vis,IR,AAS,NMR 发射光谱法： AFS,MFS,MS,火焰光度,旋光、折光,第六节,2.2 色谱分析法 HPLC、GC、TLC、PC 经典柱色谱

20、高效毛细管电泳法 （Separate & analysis，杂质鉴别、检查）,2.3 电化学分析法 电位滴定法、电流滴定法 2.4 热分析法 热重量分析法、差示扫描热分析法,第六节,3. 方法的选择,第六节,对高纯度的原料药测定，采用准确度高的化学分析法 对含量较低，有干扰的制剂分析，采用灵敏和专属的仪器分析 复杂工艺生产的头孢类药物HPLC 分析方法是相辅相成的（非水滴定）,2.1 性状（Description） 性状项下记述药品的外观、臭、味和一般的稳定性情况，以及物理常数等。,第一节 药品检验的程序,例：苯甲酸 性状 本品为白色有丝光的鳞片或针状结晶或结晶性粉末；质轻；无臭或微臭；在热空

21、气中微有挥发性；水溶液显酸性反应。本品在乙醇、氯仿或乙醚中易溶，在沸水中溶解，在水中微溶。 熔点 本品的熔点（附录 C）为 121124.5。,2.2 鉴别（Identifcation） 判断已知药物及其制剂的真伪；采用一组（二个或几个）试验项目全面评价一个药物。,第一节,例：苯甲酸 鉴别 （1）取本品约0.2g，加4%氢氧化钠溶液15mL，振摇，过滤，滤液中加三氯化铁试液2滴，即生成赭色沉淀。 （2）本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集233图)一致,2.3 检查(Detection) 包括有效性、均一性、纯度要求及安全性四个方面。 纯度要求即药物的杂质检查，亦称限度检查、纯度检查（D

22、etection of Impurities）,第一节,2.4 含量测定（Assay）,判断一个药物的质量是否符合要求，必须全面准确测定有效成分的含量， 综合考虑鉴别、检查与含量测定三者的检验结果。,第一节,2.5 检验报告(Assay report) 必须有检验人员、复核人员及部门负责人签名或盖章，以及检验单位盖章 。,第一节,1. 供试品情况（名称、批号、规格、数量、来源、外观、包装等）；,（一）原始记录 完整、真实、具体、清晰,2. 日期（取样、检验、报告等）；,3. 检验情况（依据、项目、操作步骤、数据、计算结果、结论等）；,4. 若需涂改，只可划线，重写后要签名；,5. 记录完成后，

23、需复核 复核后的记录，属内容和计算错误的，由复核人负责；属检验操作错误的，由检验人负责。,检 查 溶液颜色 = 0.02,符合规定,炽灼残渣 6# 16.5572g + 样1.0124g 700放置45 17.5693g,符合规定,鉴 别 样0.2g + 1滴NaOH T.S.黑色,符合规定,性 状 白色粉末,符合规定,含量测定,碘液0.1026mol/L,符合规定,0.00 22.95mL,（二） 检验报告书 完整、简洁，结论明确。除无操作步骤外其它内容同原始记录。,1. 全面检验均符合质量标准,（三） 结论,如： 本品为“氯羟吡啶”；符合中国兽药典（2000年版）的规定。,2. 全面检验后有个别项目不符合规定,本品为“葡萄糖”；检“乙醇溶液的澄清度”不符合规定，其他各项检验均符合中国药典（2000年版）的规定。认为可改作“口服葡萄糖”用，但不得供制备注射剂用。,3. 全面检验后不合药用者，或虽未全面检验、但主要项