新人教版高中生物选修1DNA的粗提取与鉴定

1、名校名 推荐DNA的粗提取与鉴定教学目的1初步掌握 DNA粗提取和鉴定的方法。2观察提取出来的DNA物质。实验原理1 DNA在 NaCl 溶液中的溶解度是随NaCl 的浓度变化而改变的。 DNA在 014mol/L 的 NaCl溶液中的溶解度最低，据此可使溶解于NaCl 溶液中的 DNA析出。2 DNA不溶于酒精溶液， 但细胞中某些物质可以溶于酒精溶液，据此可提取杂质较少的 DNA。3 DNA二苯胺沸水浴蓝色（用于 DNA的鉴定）实验步骤1材料制备0.1G/ml 柠檬酸钠 100ml500ml 烧杯玻璃棒搅拌 1000r/min离心 2min吸去上清液活鸡血 180ml即得鸡血细胞液（也可将上

2、述烧杯置于冰箱中，静置一天使鸡血细胞自行沉淀）2方法步骤取血细胞液 5-10ml 20ml 蒸馏水，玻璃棒沿一个方向快速搅拌（1）提取血细胞核物质纱布过滤，滤液中含 DNA和其他核物质，如蛋白质原理：血细胞的细胞膜、核膜吸水胀破，玻璃棒快速搅拌机械加速血细胞破裂（2）溶解核内 DNA：滤液 2mol/LNaCl 溶液 40ml，玻璃棒沿一个方向搅拌（3）析出含 DNA的粘稠物：向上述溶液中缓缓加入蒸馏水，并轻轻地沿一个方向搅拌，出现丝状物，当丝状物不再增加时，停止加水（此时NaCl 溶液相当于稀释到 014mol/L ）（4）滤取含 DNA的粘稠物：用多层纱布过滤，含DNA的粘稠物留在纱布上（

3、5）DNA粘稠物再溶解：20ml2mol/LNaCl溶液 50ml 烧杯，上述粘稠物缓慢搅拌 3 min（6）过滤含 DNA的 2mol/LNaCl 溶液：用 2 层纱布过滤，滤液中含DNA（7）提取含杂质较少的 DNA：上述溶液 95%酒精，缓慢搅拌，出现乳白色丝状物，用玻璃棒将丝装物卷起。（8）DNA鉴定：实验关键：1名校名 推荐本实验成功的关键是获取较纯净的DNA，因此应注意：1充分搅拌鸡血细胞液。DNA存在于鸡血细胞核中。将鸡血细胞与蒸馏水混合以后，应用玻璃棒沿一个方向快速搅拌，使血细胞加速破裂，并释放出DNA2沉淀 DNA必须用冷酒精。实验前必须准备好大量95%的酒精，并在冰箱中（

4、5以下）至少存放 24 小时。3正确搅拌含有悬浮物的溶液。在第（ 3）、（ 5）步骤，玻璃棒不要直插烧杯底部，且搅拌要轻缓，以便获得较完整的 DNA分子。在步骤（ 7），要将玻璃棒插入烧杯溶液中间，用手缓慢转动 5-10min 。【同类题库】在“ DNA的粗提取与鉴定”的实验中分别使用2molL、014mol L、 2mol L、 0015molL 的氯化钠溶液，其作用分别是（A）A溶解、析出、溶解、溶解C溶解、溶解、析出、溶解B析出、溶解、析出、溶解D溶解、析出、溶解、析出下列图示中能反映DNA溶解度与 NaCI 溶液浓度之间关系的是（C）DNA在下列哪种浓度的 NaCl 溶液中溶解度最低（

5、 B）A 2 00mol/LB 0 14 mol/L C0015 mol/L D010 mol/L在 DNA的粗提取过程中，初步析出DNA和提取较纯净的 DNA所用的药品的浓度和名称分别是（ B）01 g/ml 的柠檬酸钠溶液200mol/L 的 NaCl溶液 014 mol/L 的 NaCl溶液体积分数为 95%的酒精溶液 0 015 mol/L的 NaCl 溶液 0 04 mol/L 的 NaCl 溶液ABCD与析出 DNA粘稠物有关的叙述，不正确的是（C）A操作时缓缓滴加蒸馏水，降低 DNA的溶解度B在操作 A 时，用玻璃棒轻缓搅拌，以保证 DNA分子完整C加蒸馏水可同时降低 DNA和蛋

6、白质的溶解度，两者均可析出D当丝状粘稠物不再增加时，此时NaCl 的浓度约为 0.14mol/L.（多选）下列有关“ DNA粗提取”的操作中，正确的是（ABCD）A在鸡血细胞液中加入蒸馏水B在“析出 DNA粘稠物”时，要缓缓加入蒸馏水，直至溶液中粘稠物不再增多C在用酒精凝集 DNA时，要使用冷酒精D用玻璃棒搅拌时要沿一个方向“ DNA的粗提取与鉴定实验”中有三次过滤：（1）过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液。（2）过滤含粘稠物的 0.14mol/L NaCl .（3）过滤溶解有 DNA的 2mol/L NaCl.以上三次过滤分别为了获得（A）2名校名 推荐A含核物质的滤液、纱布上的粘稠物、含 DN

7、A的滤液B含核物质的滤液、滤液中 DNA粘稠物、含 DNA的滤液C含核物质的滤液、滤液中 DNA粘稠物、纱布中 DNA D含较纯的 DNA滤液、纱布上粘稠物、含 DNA的滤液为获取较纯净的 DNA，采集来的血样可用蛋白酶处理，然后用有机溶剂除去蛋白质。下列有关叙述，正确的是（ D）A除去血浆中的蛋白质B除去染色体上的蛋白质C除去血细胞表面的蛋白质D除去血细胞中所有的蛋白质在“DNA的粗提取与鉴定实验”中，和“使用蛋白酶从染色体中提取DNA”中的蛋白酶具有相似作用的物质是（ D）A NaCl 溶液B蒸馏水C柠檬酸钠D冷却的酒精DNA不溶于下列何种溶液（ D）A NaCl 溶液BKCl 溶液CMg

8、Cl溶液D酒精溶液下列不同浓度的 NaCl 溶液中，使DNA析出最彻底和溶解度最高的是（A） 0.14mol/L 2mol/L 0.25mol/L 0.015 mol/LA和B和C和D和下列操作中，对 DNA的提取量影响较小的是（ B）A使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂，放出DNA等核物质B搅拌时，要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动C在析出 DNA粘稠物时，要缓缓加入蒸馏水，直至溶液中粘稠物不再增多D在用酒精沉淀 DNA时，要使用冷酒精，甚至再将混合液放入冰箱中冷却E在 DNA的溶解和再溶解时，要充分搅拌在“ DNA的粗提取与鉴定实验”中：（1）实验中两次使用蒸馏水，第一次目的是，第二次目的是。（2）说

9、明不同浓度的 NaCl 溶液的作用：2mol/L NaCl 的作用；0.14mol/L NaCl的作用；0.015 mol/L NaCl的作用；（3）提纯 DNA的原理是，所用试剂为。搅拌要，目的。（4）能否用哺乳动物血液代替？简述理由。 （1）使血细胞吸水破裂，溶解细胞核内的 DNA；降低 NaCl 溶液的浓度，降低 DNA分子在 NaCl 溶液中的溶解度析出 DNA分子（ 2）溶解含 DNA的核物质；使含 DNA的丝状粘稠物析出DNA分子；进行 DNA鉴定（ 3）DNA不溶于酒精溶液，但细胞中某些盐类蛋白质可溶于酒精溶液； 95%的冷却酒精；轻缓、同方向；保持 DNA分子的完整性（ 4）不

10、能，成熟的哺乳动物红细胞没有细胞核 此实验中有几次用玻璃棒搅拌，每次搅拌的方向是一致的；但每次搅拌的强度不同，请就此予以说明。（1）提取鸡血细胞核内物质时，应搅拌，目的是。（2）向含核物质的2mol/L NaCl溶液滴加蒸馏水析出DNA粘稠物时，应搅拌，目的是。（3）DNA粘稠物再溶解于2mol/L NaCl溶液时，应搅拌，目的是。3名校名 推荐（4）用 95%的冷却酒精提取含杂质较少的DNA时，应搅拌，目的是。 （ 1）快速；加速血细胞破裂（2）轻缓；尽量保持 DNA分子的完整性（ 3）轻缓；尽量保持DNA分子的完整性（ 4）轻缓；保持 DNA分子的完整性 以下是有关 DNA的粗提取实验的阅

11、读材料：a核酸极不稳定，在较为剧烈的化学、物理因素和酶的作用下很容易降解。在制备DNA时要加入 DNA酶（水解 DNA的酶）的抑制剂柠檬酸钠，以除去Mg，防止 DNA酶的激活。b核酸中的 DNA和 RNA在生物体内均以核蛋白（由核酸和蛋白质组成）的形式存在，DNA核蛋白在 1 mol/L NaCl 溶液中溶解度很大，但在 0.14mol/L NaCl溶液中溶解度很低；而 RNA核蛋白溶于 0.14mol/L NaCl 溶液。c用苯酚处理，可使蛋白质变性，且留在苯酚层内；在DNA溶液中加入 25 倍体积，浓度为 95%的酒精，可将 DNA分离出来。此时 DNA十分粘稠，可用玻璃棒搅成团取出。d

12、DNA在强酸性环境下，水解产生脱氧核糖等小分子物质，它与二苯胺酸性溶液反应，能生成蓝色化合物。e实验材料与器械：柠檬酸钠溶液、石英砂、 0.14mol/L NaCl 溶液、 1 mol/L NaCl溶液、苯酚、 95%的酒精、二苯胺试剂、浓硫酸、花椰菜、研钵、烧杯、漏斗、玻璃棒、量筒、石棉网、酒精灯、吸管、试管等。以下是 DNA粗提取实验的步骤，请根据以上阅读材料回答有关问题：（1）研磨：取 10 克花椰菜加适量的、和石英砂，研磨成匀浆。（2）过滤。（3）将滤液稀释 6 倍，其目的是：。（4）离心处理，产生沉淀。（5）取沉淀物，置于 2 毫升 1 mol/L NaCl溶液中，使 DNA核蛋白再

13、次溶解，再加2 毫升苯酚充分震荡后静止，待其分层后弃其上层苯酚。这一步的目的是除去。（6）如何将剩余溶液中的 DNA提取出来？。（7）如何证明提取物质确实是DNA分子？。其实验过程的要点是向放有 DNA的试管中加入适量该试剂， 混合均匀后，将试管置于中5min，待试管后，观察试管中的颜色变化。这个实验也说明DNA耐温，前次温度有利于，后次温度则有利于 DNA。 （ 1）柠檬酸钠溶液、 1 mol/L NaCl 溶液（ 3）使 DNA核蛋白溶解度降低而析出（5）（DNA核蛋白中的）蛋白质（ 6）向下层溶液中加25 倍体积，浓度为95%的酒精，此时用玻璃棒搅动，玻璃棒上成团的物质即是DNA（ 7）

14、用适量浓硫酸处理提取物，再滴加二苯胺酸性溶液数滴，如有蓝色物质出现即可证明提取物为DNA。沸水浴；冷却；高；加快染色反应的速度；析出。 “ DNA的粗提取与鉴定”实验中， A、 B、 C、 D、 E 五个小组除下表中所列处理方法不同外，其他操作步骤均相同，而且正确，但实验结果却不同。组别实验材提取核物质时去除杂质时DNA鉴定时料加入的溶液加入的溶液加入的试剂A鸡血蒸馏水95的酒精 (25C)二苯胺B菜花蒸馏水95的酒精 ( 冷却 )双缩脲，C人血浆蒸馏水95的酒精 ( 冷却 )二苯胺D人血细2mol L 的氯化 014mol L 的氯化双缩脲胞钠钠E鸡血蒸馏水95的酒精 ( 冷却 )二苯胺(1

15、) 实验材料选择错误的组别是。其原因是4名校名 推荐。(2) 实验步骤 ( 不包括实验材料 ) 均正确，但得不到 DNA的组别是。(3) 沸水浴中试管颜色变蓝的组别是；蓝色较淡的是，其原因是。(4)B 组实验不成功的最主要原因是。(1)C 、D 人的血浆中没有细胞结构，成熟的红细胞中没有细胞核，选用这些材料得不到DNA或得到的 DNA很少 (2)C (3)A 、E A 冷却的酒精对 DNA的凝集效果较佳，该组使用的是25的酒精 (4) 菜花细胞在蒸馏水中不能被破坏，得不到 DNA(应采用研磨的方法 )在“ DNA的粗提取与鉴定”的实验中，有同学按书本知识和自己的思路，试做了如下实验，请你判断实

16、验结果。(1) 他把与柠檬酸钠混合的新鲜血液放在几层纱布上过滤，纱布上最主要的结构是。(2) 他在含有 DNA、 RNA及蛋白质等的混合物中加入大量的物质的量浓度为20mol/L 的氯化钠溶液后，通过搅拌后，放在几层纱布上过滤，他得到的滤液中一定含有实验目的中需要提取的成分是。(3) 他在上述滤液中加入冷酒精 ( 体积分数为 95) ，并用玻璃棒向个方向搅拌，溶液中的丝状物的主要成分是。(4) 他把含有 DNA、RNA、蛋白质与氯化钠的混合溶液稀释成物质的量浓度为014mol/L 的氯化钠溶液后，放在几层纱布上过滤，他得到的滤液中含量最多的成分是。 血细胞DNA DNA水请利用如下实验材料做相关实验，再选择其中的一种实验材料，设计一个实验，以展示你的科学素养和创新才能。(1) 如用上述材料做观察植物细胞的有丝分裂、 叶绿体中色素的提取和分离、 观察植物的向性运动等实验。你选择的最佳材料依次是( 填图中序号即可 )。(2) 如用紫色洋葱表皮做完细胞的质壁分离及复原实验后， 又用此装片观察细胞分裂， 结果未观察到处于分裂期的细胞。请解释原因。(3) 创新实验设计方案实验课题：探究镍为植物生活所必需的矿质元素材料用具：完全营养液甲、缺镍的完全营养液乙、适当的容器和固定材料、长势相似的玉米幼苗，含镍的