7第五章 核酸.ppt

1、第七章,核 酸,本章内容,概述 DNA RNA 核酸的性质,核酸的发展历史及研究现状,核酸化学研究史（1）,1863年 Miescher, 博士论文工作中测定淋巴细胞蛋白质组成时, 发现了不溶于稀酸和盐溶液的沉淀物, 并在所有细胞的核里都找到了此物质, 故命名核质(Nuclein) 1879年 Kossel经过10年的努力, 搞清楚核质中有四种不同的组成部分: A,T, C 和 G；,核酸研究史1,核酸化学研究史（2）,1889年 Altman建议将“ 核质”改名为“ 核酸”, 因为已经认识到“ 核质” 乃“ 核酸” 与蛋白质的复合体。 1909年 Levene 发现酵母的核酸含有核糖 193

2、0年 Levene 发现动物细胞的核酸含有一种特殊的核糖脱氧核糖, 得出了一个错误概念: 植物核酸含核糖,动物核酸含脱氧核糖。这个错误概念一直延续到1938年，这时方清楚RNA和DNA的区别。Levene还提出了核酸的“磷酸核糖(碱基)磷酸的骨架结构, 解决了DNA分子的线性问题, 还在1935年提出四核苷酸, 认为这四种碱基的含量是一样的。,核酸研究史2,核酸化学研究史（3）,1950年 Chargaff,E和Hotchkiss,R.D.采用纸层析法仔细分析了DNA的组成成分, 得知A=T, G=C, A+G=C+T 1953年 Watson, Crick根据DNA的X射线图谱的研究结果,

3、提出了DNA的双螺旋模型(Double helix)。几星期后提出了半保留式复制模型。 1957年 Meselsnhe & Stahl用密度梯度超离心法, 证实半保留复制假说。,核酸研究史3,核酸化学研究史（4）,1958年 Kornberg得到高纯度的 DNA polymerase, 这种酶需要一个模板DNA。 1960年 Cairns索性将复制中的细菌DNA的电镜照片拍了下来。 1970年 发现第一个DNA限制性内切酶。 1972年 DNA重组技术的建立。 1978年 双脱氧DNA测序法的建立。 1990年 人类基因组计划实施。,核酸研究史4,第一节 概述,核酸是由碱基（嘌呤碱和嘧啶碱）、

4、戊糖和磷酸组成的高分子物质，是生物体的基本组成。 二、种类及分布 DNA （脱氧核糖核酸） RNA（核糖核酸）,一、概念,分布：,DNA：主要在细胞核中，是染色体的主 要成分。此外在线粒体、叶绿体、 质粒及细胞膜上. RNA：细胞核核仁； 细胞质核糖体及上清液中。,三、核酸的组成,核酸是一种线形多聚核苷酸， 其基本结构单位是核苷酸。,核苷酸的基本结构,腺苷酸,（一）核酸中的戊糖,D-核糖 D-脱氧核糖 核酸据此分类： 脱氧核糖DNA； 核糖RNA； 核酸中的戊糖均为 -D-型,一、核苷酸,（二）碱基,核酸中的碱基分两类： 1、嘧啶碱(pyrimidine)：是嘧啶的衍生物。,一、核苷酸,2、嘌

5、呤碱(purine)：由嘌呤衍生而来。,腺嘌呤,鸟嘌呤,尿嘧啶,胞嘧啶,胸腺嘧啶,（三）核苷,核苷：戊糖与碱基缩合而成，并以糖苷键相连接。 糖苷键： 二者的连接是C-N键，称N-糖苷键。,一、核苷酸,（四）核苷酸,1、种类： 1）按酯化位点：可在核糖的2- , 3-, 5-； 2）按核糖类型： 核苷酸、 脱氧核苷酸,一、核苷酸,核苷中戊糖的羟基被磷酸酯化，即为核苷酸。,基因是细胞内DNA分子上具有遗传效应的特定核苷酸序列的总称，是具有遗传效应的DNA分子片段。 DNA的克隆是指在体外将含有目的基因或其它有意义的DNA片段同能够自我复制的载体DNA连接，然后将其转入宿主细胞或受体生物进行表达或进

6、一步研究的分子操作的过程，因此DNA克隆又称分子克隆，基因操作或重组DNA技术。,克隆动物的历史,鲤鱼:1963年，中国科学家童第周早在1963年就通过将一只雄性鲤鱼的遗传物质注入雌性鲤鱼的卵中从而成功克隆了一只雌性鲤鱼，比多利羊的克隆早了33年。 绵羊:1996年，多利（Dolly） 猕猴:2000年1月，Tetra，雌性 猪:2000年3月，5只苏格兰PPL小猪；8月，Xena，雌性 牛:2001年，Alpha和Beta，雄性 猫:2001年底，CopyCat（CC），雌性 鼠:2002年 兔:2003年3-4月分别在法国和朝鲜独立地实现； 骡:2003年5月，爱达荷Gem，雄性；6月，犹他先锋，雄