高中生物实验备考---物质鉴定实验.ppt

1、高中生物实验备考,高中生物的学生活动及实验分类,学生实验,技能性实验,探索性实验,验证性实验,：动作技能训练,：获得新知,：检验已知,研究性课题,调查研究,文献资料分析,演示实验,2007年实验备考内容,实验备考的目标要求,能独立完成“生物知识内容表”所列实验，包括理解实验目的、原理、方法和步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合的运用； 具备验证简单生物学事实（原理）的能力，并能对实验现象和结果进行解释、分析和处理； 具有对一些生物学问题进行初步探究的能力，包括确认变量、作出假设和预期、设计可行的研究方案、处理和解释数据、根据数据作出合理的判断等； 能对一些简单的实验

2、方案作出恰当评价和修改,实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,、可溶性还原糖 试剂 、脂肪苏丹III 脂肪苏丹IV 3、蛋白质 ,橘黄色,红色,双缩脲试剂,紫色反应,砖红色沉淀,一、实验原理：,紫蓝色,蓝色,深紫色，略带金属光泽,高中生物还学习过那些利用颜色反应鉴定物质的？用到了那些化学试剂？由此产生了那些特定的颜色呢？,染色（质）体+ 醋酸洋红（或龙胆紫）,淀粉+碘液,DNA+二苯胺试剂（水浴加热）,大肠杆菌+伊红-美蓝,红色（或紫色）,实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,深入原理 1.可溶性还原糖的鉴定原理： 生物

3、组织中常见的可溶性糖有葡萄糖、果糖、麦芽糖、蔗糖。_、_、 _分子中都含有游离的具有还原性的醛基，因此叫还原性糖；而 的分子中没有，因此叫非还原性糖。 斐林试剂（淡蓝色的Cu(OH) 2）与可溶性还原糖在加热的条件下，生成砖红色的_沉淀。,实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,深入原理 2.脂肪的鉴定原理： 苏丹染料大量进入脂肪类物质的结构内，呈现出 色或 色。,实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,深入原理 3.蛋白质的鉴定原理： 在_溶液中，蛋白质能与Cu2作用，可形成紫色或紫红色的络合物。,碱性,实验一生物组织中可

4、溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,1、可溶性还原糖 含 较高，颜色较浅或近于 的植物组织。以_、_最好。,2、脂肪的鉴定 富含 的种子。如花生、核桃、蓖麻等的种子 。花生干种子，在实验前需要浸泡_。浸泡时间过长，则组织太软，影响切片效果。,二、实验材料选用：,34h,实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,（1）植物组织样液：大豆种子（浸泡12天）， 或用豆浆 （2）动物组织样液：蛋清稀释液 蛋清:水_稀释。,二、实验材料选用：,1:10,3、蛋白质的鉴定,1、注意材料的易得性： 还原性糖和脂肪从植物中获得实验材料比较容易，而蛋白质在动植物中都有比较容易获得的材料。,2、注意实验前材料

5、的处理： 梨在实验前应该洗净、去皮，保证研磨比较充分；鉴定脂肪用的花生种子必须提前浸泡，而且应注意浸泡的时间，时间过长，则组织太软，切下的薄片不易成形，时间过短，则不容易切成片；同样鉴定蛋白质用的大豆也要提前浸泡，这样容易研磨成浆。如果用鸡蛋卵白的话，应该进行稀释。,实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,二、实验材料选用：,实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,1、斐林试剂 A液质量浓度为0.1g/mL的 溶液 B液质量浓度为0.05g/ mL的 溶液 2、双缩脲试剂 A液质量浓度0.1g/mL的 溶液 B液质量浓度0.01g/mL的 溶液 3、苏丹III 0.1g苏丹

6、III干粉，溶于100mL体积分数为95%的酒精中，待全部溶解后再使用。,三、试剂 ：,制备组织样液：苹果切块、研磨、_。 鉴定组织样液：,实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,四、方法步骤,取1 支试管：加2mL_ 加2mL_， 振荡试管，（溶液_色?）。 _2min左右，观察溶液颜色变化。 （_色棕色_色）,纱布过滤,1. 可溶性还原糖的鉴定,实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,四、方法步骤,2.脂肪的鉴定 (1)切片制作：用花生子叶制作徒手切片。 (2)染色：花生子叶切片+ 2-3滴_染液， _min后吸去染液+ 2滴50%_溶液去浮色; 吸去子叶周围酒精后+

7、2滴_，盖盖玻片。 (3)镜检鉴定：先用_镜观察，找到子叶最薄处，再用_镜观察。 （圆形的脂肪颗粒为_色）。,实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,四、方法步骤,2-3,蒸馏水,酒精,低倍,高倍,橘黄,3. 蛋白质的鉴定 (1) 制备样液：大豆切片、_、_。 (2) 鉴定：1 支试管+2mL黄豆组织样液 加2mL_， 振荡试管（溶液_色）， 加3-4滴_， _试管，观察溶液颜色变化。 （_色_色_色）。,实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,四、方法步骤,纱布过滤,研磨,双缩脲试剂A,无,双缩脲试剂B,振荡摇匀,无,浅蓝,紫,实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的

8、鉴定,1、常见还原性糖与非还原性糖有哪些？,考点提示：,2、还原性糖植物组织取材条件？,葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖； 淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。,含糖量较高、颜色为白色或近于白色。 如：苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等,4、斐林试剂甲、乙两液的使用方法？为何要现混现用？,实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,3、研磨中为何要加石英砂？不加石英砂对实验有何影响？,加入石英砂是为了使研磨更充分。不加石英砂会使组织样液中还原性糖减少，致使鉴定时，溶液颜色变化不明显,因斐林试剂很不稳定，容易生成蓝色的Cu(OH)2沉淀，所以应将甲液与乙液分别配制储存，使用时再临时配制,实验一生

9、物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,5、还原性糖中加入斐林试剂后水浴加热，溶液颜色变化的顺序为？,开始时加入的刚配制的Cu(OH)2部分被还原成砖红色的Cu2O沉淀，二者混合呈现棕色，随着反应的继续进行， Cu(OH)2被全部还原成Cu2O，故出现砖红色沉淀。,颜色变化：浅蓝色棕色砖红色（沉淀）,浅蓝色 棕色 砖红色（沉淀）,开始时加入的刚配制的Cu(OH)2部分被还原成砖红色的Cu2O沉淀，二者混合呈现棕色，随着反应的继续进行， Cu(OH)2被全部还原成Cu2O，故出现砖红色沉淀。,答：虽然是验证性实验，但也要注意对照。在鉴定可溶性还原性糖和蛋白质时留出一部分样液，可以和鉴定后的样液

10、的颜色变化作对照，增强说服力,6、 在做还原性糖与蛋白质鉴定的实验时，在鉴定前，为什么要留出一部分样液？,实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,8、转动细准焦螺旋时，若花生切片的细胞总有一部分清晰，另一部分模糊，其原因一般是什么？,实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,7、花生种子切片为何要薄？,只有很薄的切片，才能透光，才能用于显微镜的观察。,切片的厚薄不均匀,9、脂肪鉴定中乙醇作用？,洗去浮色,先加入试剂A是为了造成碱性环境，因为在碱性环境中，蛋白质容易与Cu2+发生颜色反应。 因为若加入过量的双缩脲试剂B，CuSO4在碱性溶液中生成大量的蓝色Cu(OH)2沉淀，会

11、遮蔽实验中所产生的紫色，影响观察,10、 在使用双缩脲试剂时，为什么要先加入试剂A，后加入试剂B？加入试剂A后，为什么只能加入34滴双缩脲试剂B，而不能加过量？,实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,溶液浓度不同： 斐林试剂由质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液和质量浓度为0.05g/mL的CuSO4溶液配制而成，双缩脲试剂的成分是质量浓度的0.1g/mL的NaOH溶液与质量浓度为0.01g/mL的CuSO4溶液。,11. 斐林试剂与双缩脲试剂都由NaOH和CuSO4组成，两者有何不同？,实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,使用原理不同： 斐林试剂实质是新配制的一定浓度的Cu(OH)2溶液，在加热条件下，与加入的可溶性还原性糖能够生成砖红色的Cu2O沉淀。 双缩脲试剂实质是在碱性环境下的Cu2+与双缩脲（H2NOCNHCONH2）作用，形成的紫色或紫红色的络合物。,实验一生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,11. 斐林试剂与双缩脲试剂都由NaOH和CuSO4组成，两者有何不同？,使用方法不同：斐林试剂在使用时，先把NaOH溶液和CuSO4溶液混合，而后立即使用。双