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文档简介

1、实验五 苦味酸法测定血清肌酐,肌酐（CRE）是人体内肌酸代谢的最终产物，由肾排出，少部分来自食物，大部分在体内生成，血肌酐的浓度主要取决于GFR。 血肌酐的测定对中晚期肾疾病临床意义较大。 肌酐测定方法有化学法和酶法。 酶法主要有三种类型：肌氨酸氧化酶法、肌酐氨基水解酶法和肌酐亚氨基水解酶法。,一、实验目的 1.掌握血清肌酐的测定原理和方法。 2. 了解肌酐测定的参考范围及临床意义。,二、实验原理 在碱性条件下，血清中的肌酐（Cre）苦味酸反应，生成橘红色的苦味酸肌酐复合物。检测505nm波长处吸光度的变化，可知被测血清中的肌酐的浓度。其反应式如下： 肌酐+碱性苦味酸 红色物质,OH-,1、主

2、要器具,微量移液器,三、器材,试管与试管架,三用水浴箱,可见分光光度计,四、试剂,1.试剂：R1：氢氧化钠 R2：苦味酸 工作液：将R1与R2按1：1的比例混合面成。 2.肌酐标准应用液(133mol/L),五、操作步骤,取试管5支，按下表操作,混匀后，37度水浴箱放置，2分钟后，波长505nm处，空白管调零，先读取S1、U1吸光度，5分钟后再读取S2、U2吸光度。,六、计算,参考区间：男性：62-115mol/L 女性：53-97mol/L,血清肌酐（mmol/L）= AU/AS133mol/L,七、注意事项,1.血标本无溶血，应及时处理。 2.工作液开盖混合后，应置2-8度避光保存，稳定期3天。,八、临床意义,肌酐经肾小球滤过后不被肾小管重吸收，通过肾小管排泄。只有当GFR下降到正常的1/3时，Scr才明显上升，是反眏GFR减退的后期指标。 增高：见于各种原因引起的肾小球滤过功能减退：各种肾病，急慢性肾衰竭、重度充血性心力衰竭、心肌炎等。 降低：见于尿崩症、进行性肌萎缩、白血病、贫血等,九、方法学评价,1.化学法：即苦味酸法，该法成本低廉，方法简便，但试剂具毒性和腐

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