临床常见病原微生物PPT课件

临床常见的病原微生物与临床微生物室的操作规范,内容,葡萄球菌属链球菌属肠球菌属奈瑟菌属和卡他莫拉菌肠杆菌科非发酵革兰阴性杆菌临床真菌感染现状,内容,分类临床意义病原学检查要点生物学特性检验结果分析与报告药物敏感性试验耐药特征治疗,凝固酶阳性: 金黄色葡萄球菌 ( S. aureus ) 凝固酶阴性: 表皮葡萄球菌(S. epidermidis)腐生葡萄球菌(S. saprophyticus)中间葡萄球菌(S. intermedius)施氏葡萄球菌(S. schleiferi.)溶血葡萄球菌(S. haemolyticus)模仿葡萄球菌（S.simulans）人葡萄球菌(S.hominis)华纳葡萄球菌(S.warneri)耳葡萄球菌(S.auricularis)里昂葡萄球菌(S.lugdunensis),一、葡萄球菌属,临床意义,金黄色葡萄球菌1.化脓性:局部组织、内脏器官或全身化脓性感染。表现为疖、痈、甲沟炎、蜂窝组织炎、伤口化脓，肺炎、脓胸、中耳炎、心内膜炎、脑膜炎,败血症、脓毒血症等 2.外毒素:食物中毒,烫伤样皮肤综合症,毒性休克综合征(TSST1),凝固酶阴性葡萄球菌 人工瓣膜性心内膜炎静脉导管感染腹膜透析性腹膜炎血管移植物感染人工关节感染 腐生葡萄球菌女性尿路感染,临床意义,病原学检查要点,1. 标本采集 ：根据感染部位,可采集脓液、创伤分泌物、穿刺液、血液、尿液、痰液、脑脊液、粪便、感染组织，导管等 血培养至少2套（4瓶），多部位静脉采血 2.直接检查：无菌体液离心涂片后，革兰染色镜检，初步报告“找到革兰阳性球菌，呈葡萄状排列，疑为葡萄球菌” 。,8,生物学特性,检验结果分析与报告,结合临床症状，血液、无菌体液、脓液中分离到葡萄球菌，特别是反复检出即可确定是感染病原菌。凝固酶阴性葡萄球菌常常为皮肤污染菌，诊断一定要与临床表现相结合。,10,葡萄球菌敏感性试验,A组：阿齐霉素或克拉霉素或红霉素、克林霉素、苯唑西林(头孢西丁), 青霉素, SMZB组：达托霉素, 利奈唑胺、泰利霉素, 多西环素, 四环素, 万古霉素,利福平C组：氯霉素、环丙沙星或左氧氟沙星或氧氟沙星、莫西沙星、喹奴普丁达福普丁、庆大霉素U组：罗米沙星、诺氟沙星、呋喃妥因、磺胺类,Clinical and Laboratory Standard Institution，2008，M100-s18，Vol 28,No.1,MRS耐药特征,青霉素类头孢菌素类加-内酰胺酶抑制剂类的复合剂碳青霉烯类氨曲南 大部分菌株对氨基糖苷类，喹诺酮类也表现为高水平耐药,结果分析（MRSA）,我国不同省市区MRSA发生率比较,各国MRSA发生率比较,14,MRS的治疗,治疗困难 旧药 万古霉素或去甲万古霉素利福平 或庆大霉素TMPco、喹诺酮类耐药性增加不推荐常规使用替考拉宁 新药 利奈唑胺 达托霉素替加环素,15,二、链球菌属,1. 根据溶血现象分类： 甲型溶血性链球菌：溶血或草绿色链球菌血链球菌(Ssanguis) 温和链球菌(Smitis) 格氏链球菌(Sgordoni) 口腔链球菌(Soralis) 中间型链球菌(Sintermadius) 等 乙型溶血性链球菌：溶血性链球菌丙型链球菌：不溶血性链球菌,2. 根据抗原结构分类：按链球菌细胞壁中多糖抗原不同，可分成 A、B、C、D 等20个群 同群链球菌间，因表面蛋白质抗原不同又 分若干型。如A群根据其M抗原不同，可分成约100个型；B群分4个型；C群分13个型,17,临床意义,1. A群链球菌，即化脓链球菌：化脓性感染 ：咽炎、脓皮病、丹毒、蜂窝织炎、坏死性筋膜炎、链球菌毒性休克综合症、产褥热、淋巴管炎、肺炎等各种组织系统的感染 毒素性疾病：猩红热非化脓性感染 ：风湿热，急性肾小球肾炎，亦属于超敏反应,18,2.B群链球菌：无乳链球菌，新生儿肺炎、败血症和脑膜炎3. 肺炎链球菌： 大叶性肺炎，其次是支气管炎，肺炎后可继发中耳炎、乳突炎、肺脓肿、脑膜炎和败血症等 4.草绿色链球菌：瓣膜异常患者的亚急性细菌性心内膜炎,病原学检查要点,1. 标本采集 ：标本2h内送到实验室创伤感染：脓液咽部、鼻腔等病灶的棉拭败血症：血液 风湿热：取血清作抗链球菌溶血素O抗体测定B群链球菌：采集第3537周妊娠妇女的阴道分泌物培养肺炎链球菌：采集痰液、脓液、血液和脑脊液等2.直接检查：无菌体液离心涂片后，革兰染色镜检初步报告“找到革兰阳性球菌，呈链排列，疑为链球菌”,20,病原学检查要点,3.分离培养与鉴定 溶血Lancefield群特异性抗原鉴定A、B、C等杆菌肽敏感试验：A群链球菌（+）CAMP试验：B群链球菌（+）非溶血肺炎链球菌：Optochin试验：5g，=14mm敏感草绿色链球菌: API, Crystal， VITEK, MicroScan，Phoenix 等,21,生物学特性,检验结果分析与报告,结合临床感染症状，如果从患者血液、无菌体液、脓液中分离到链球菌，特别是反复检出即可确定是感染病原菌溶血链球菌和肺炎链球菌无论从何种标本中分离的均及时报告链球菌常为口腔污染菌，诊断一定要与临床表现结合,23,肺炎链球菌敏感性试验,A组：红霉素、青霉素、SMZB组：克林霉素、吉米沙星，左氧沙星，莫西沙星，氧氟沙星、泰利霉素，四环素，万古霉素C组：氯霉素、利奈唑胺、利福平,Clinical and Laboratory Standard Institution，2008，M100-s18，Vol 28,No.1,2001-2007肺炎链球菌对常用抗生素的敏感性变化%,Beta-溶血链球菌药敏试验,A组：克林霉素、红霉素、青霉素或氨苄西林B组：吡肟/噻肟/曲松、万古霉素C组：氯霉素、达托霉素、左氧氟沙星，氧氟沙星，利奈唑胺，喹奴普丁达福普丁,Clinical and Laboratory Standard Institution，2008，M100-s18，Vol 28,No.1,结果分析（链球菌属）,肺炎链球菌和化脓链球菌对不同药物的敏感率（S）,三、肠球菌属,1群：鸟肠球菌（E. avium）类鸟肠球菌（E.pseudoacium）棉子糖肠球菌(E.raffinosus)解糖肠球菌(E.saccharolyticus)灰黄色肠球菌（E.gilvus）病臭肠球菌（E.malodoratus）淡黄色肠球菌（E.pallens）2群：粪肠球菌（E. faecalis）屎肠球菌（E. faecium）鹑鸡肠球菌（E. gallinarums）铅黄肠球菌（E. casseliflavus）蒙氏肠球菌（E.mundtii）3群：殊异肠球菌（E.dispar）坚韧肠球菌（E.durans）海氏肠球菌（E.hirae）猪肠球菌（E.porcinus）鼠肠球菌（E.ratti）4群：驴肠球菌（E.asini）盲肠肠球菌（E.cecorum）硫磺肠球菌（E.sulfureus）5群：哥伦比亚肠球菌（E.columbae）,临床意义,尿路感染：多见，与尿路器械操作、留置导尿、尿路生理结构异常有关菌血症：严重基础疾患、免疫功能低下者。老人和瓣膜病及泌尿生殖系统病变的患者 心内膜炎：不常见呼吸道和中枢神经系统感染：较少见,病原学检查要点,标本采集 可采集尿液、血液及脓性分泌物等 标本直接检查 无菌体液，离心涂片后，革兰染色镜检，可初步报告为“找到革兰阳性卵圆形球菌，呈短链排列，疑为肠球菌”,生物学特性,检验结果分析与报告,鉴定：粪肠球菌、屎肠球菌或其它肠球菌 尤其对重症感染者，抗菌药物的敏感性差异较大在呼吸道中常为定植菌，所以诊断一定要与临床表现相结合,肠球菌属敏感性试验,A组：青霉素，氨苄西林B组：利奈唑胺、喹奴普丁-达福普丁万古霉素C组： 500 g/ml 或120 g/disk庆大霉素 2000 g/ml或300 g/disk链霉素 U组：环丙沙星、左氧氟沙星、诺氟沙星 呋南妥因、四环素,Clinical and Laboratory Standard Institution，2008，M100-s18，Vol 28,No.1,肠球菌的耐药性,所有的头孢菌素氨基糖苷类（高水平氨基糖苷类耐药筛选）克林霉素磺胺类 （上述药物均为天然耐药）,结果分析（肠球菌）,粪肠球菌和屎肠球菌对不同药物的耐药率（R）,肠球菌感染的抗菌治疗,败血症和心内膜炎：首选青霉素或氨苄西林静脉滴注并与氨基糖苷类联用对青霉素类耐药，选喹诺酮类或万古霉素与氨基糖苷类联用HLAR ：试用环丙沙星与氨苄西林联用，喹诺酮类耐药的肠球菌逐渐增加 亚胺培南对屎肠球菌和VRE多无效 VRE：利奈唑胺敏感 尿路感染：喹诺酮类或呋南妥因,四、奈瑟菌属和卡他莫拉菌,1.奈瑟菌属(Neisseria):淋病奈瑟菌（N.gonorrhoeae）脑膜炎奈瑟菌（N.meningitidis）乳屑奈瑟菌(N.lactamica)微黄奈瑟菌(N.subflava)粘膜奈瑟菌(N.mucosa)浅黄奈瑟菌(N.flavescens)多糖奈瑟菌(N.polysaccharea)干燥奈瑟菌（N.sicca）灰色奈瑟菌（N.cinerea）2.莫拉菌属(Moraxella):卡他莫拉菌（M.catarrhalis）,尿道口、龟头红肿，尿道口黄白色脓性分泌物流出(淋病）,摘自,病原学检查要点,1.标本采集 脑膜炎奈瑟菌:脑脊液、关节液、血液、瘀点穿刺液等淋病奈瑟菌:阴道、宫颈口、尿道分泌物等 卡他莫拉菌:采集痰标本或支气管灌洗液2.标本直接检查:立即涂片，革兰染色，见中性粒细胞内革兰阴性双球菌，可以初步诊断,39,巧克力平板,针吸涂片革兰染色,检验结果分析与报告,淋病的早期快速诊断，必须慎重，涂片法的敏感性和特异性有差异，确诊依靠分离培养和鉴定脑膜炎奈瑟菌针对瘀点及脑脊液的革兰染色，镜检可以快速诊断,淋病奈瑟菌敏感性试验,C组： 头孢唑肟 或 头孢泊肟 头孢噻肟 或 头孢曲松 头孢西丁 头孢呋辛 环丙沙星 或 氧氟沙星 青霉素 壮观霉素（淋必治） 四环素,Clinical and Laboratory Standard Institution，2008，M100-s18，Vol 28,No.1,耐药性及抗菌治疗,淋病奈瑟菌 青霉素和四环素耐药增多有许多氟喹诺酮类治疗失败的报道 治疗： 超广谱头孢菌素新氟喹诺酮类 壮观霉素,2001-2006流感嗜血杆菌和卡他莫拉菌产酶率比较%,五、肠杆菌科,包括致病性较强、能引起人类传染病的菌属-鼠疫耶尔森菌、伤寒沙门菌能引起人类腹泻和肠道感染的菌属埃希菌属志贺菌属沙门菌属耶尔森菌属,与医院感染有关的条件致病菌,枸橼酸杆菌属克雷伯菌属肠杆菌属泛菌属,沙雷菌属 变形杆菌属 普罗威登菌属 摩根菌属,临床意义,可致化脓性疾病、肺炎、脑膜炎、菌血症以及伤口、泌尿道和肠道的感染。其中有些细菌是引起医院感染的重要病原。本科细菌占临床分离菌总数的50和临床分离的革兰阴性杆菌总数的80，将近50的菌血症、70以上的泌尿道感染和大量的肠道感染由肠杆菌科细菌引起。,人类肠道外感染,除志贺菌外，许多肠杆菌科细菌均可引起肠外感染，如大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌、奇异变形杆菌、产气肠杆菌、阴沟肠杆菌、粘质沙雷菌等均可引起泌尿道、呼吸道、伤口和中枢神经系统的感染，且往往为医院感染。鼠疫耶尔森菌能引起甲类传染病：鼠疫。,人类肠道感染,肠杆菌科细菌也是人和动物肠道感染的重要病原。虽然本科中许多细菌均与腹泻有关，但比较明确的肠道病原菌是肠杆菌科中的埃希菌属、志贺菌属、沙门菌属和耶尔森菌属。主要引起各种急、慢性肠道感染、食物中毒、旅行者腹泻及肠热症等。,微生物学检验,标本采集1肠外标本 采自不同的感染部位如血液、体液、呼吸道、伤口、尿液及其他各种标本。2肠道标本 宜在疾病的早期留取新鲜的粪便标本，挑取其中的脓血和粘液部分进行粪便培养。,大肠埃希菌革兰染色,革兰阴性直短杆状，多数有鞭毛，能运动，某些菌株尤其是引起肠外感染的菌株有荚膜（微荚膜）和周身菌毛。,形态特征,大肠埃希菌,大肠埃希菌菌落特征（血平板）,兼性厌氧，营养要求不高，在普通营养琼脂上生长良好，形成较大的圆形、光滑、湿润、灰白色的菌落，在血琼脂上某些菌株可产生-溶血。,培养特性,大肠埃希菌菌落特征（MAC）,在肠道选择培养基上可发酵乳糖，形成有色菌落。,临床意义,肠道外感染：泌尿道感染（最常见） 胆道感染、腹膜炎、肺炎 菌血症、新生儿脑膜炎肠道感染： ETEC、EPEC、EIEC、 EHEC,又可分为3个亚种：肺炎亚种（subsp. pneumoniae） 臭鼻亚种（subsp. ozaenae）鼻硬结亚种（subsp. rhinoscleromatis）,肺炎克雷伯菌（K.pneumoniae）,肺炎克雷伯菌革兰染色,（一）形态结构革兰阴性杆菌，无鞭毛，无芽胞,肺炎克雷伯菌荚膜染色,病人标本直接涂片或在营养丰富培养基上的培养物可见菌体外有明显的荚膜。,肺炎克雷伯菌的菌落特征（血琼脂平板）,（二）培养特性兼性厌氧，营养要求不高，在初次分离培养基可形成较大、凸起灰白色粘液型的菌落。菌落大而厚实、光亮，相邻菌落容易发生融合,肺炎克雷伯菌的菌落特征（MAC）,在MAC培养基上发酵乳糖产酸，形成较大的粘液型、红色的菌落，红色可扩散至菌落周围的培养基中。,肺炎克雷伯菌粘丝试验,用接种针沾取时可挑出长丝状细丝,克雷伯菌属的细菌多感染免疫力低下的人群，是医院感染中最重要的条件致病菌。 所致疾病：肺炎、脑膜炎、腹膜炎、泌尿系统感染、败血症,临床意义,61,肠杆菌科敏感性试验,A组：氨苄西林、头孢唑啉或头孢噻吩、庆大霉素或妥布霉素B组：阿米卡星、阿莫西林/克拉维酸或氨苄西林/舒巴坦或哌拉西林/他唑巴坦或替卡西林/克拉维酸、头孢呋辛、头孢吡肟、头孢西丁、 头孢噻肟或头孢曲松、环丙沙星或左氧氟沙星、亚胺培南或美罗培南 、 哌拉西林 、 SMZC组：氨曲南、头孢他啶、氯霉素、四环素U组：羧苄西林、诺氟沙星或洛美沙星或氧氟沙星、呋喃妥因、磺胺类,Clinical and Laboratory Standard Institution，2008，M100-s18，Vol 28,No.1,CLSI 在表格的导言中对ESBL增加了警告 “Warning”