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文档简介

子情景一 抗凝剂,核心知识:几种抗凝剂的应用。1.乙二胺四乙酸:适用于多种血液学检查,但不能用于输血。2.枸橼酸钠:常作为输血时的抗凝剂,不适用于血生化检查。3.肝素:常用于血生化实验,天然抗凝剂。,1,子情景一 抗凝剂,核心技能:抗凝剂的制备。1.分组实施过程:(1)分3组进行。各选组长一名。(2)各组选着需要的仪器、试剂。(3)分组制备3.8%的枸橼酸钠溶液100毫升。2.注意事项:操作过程中保持无菌过程。3.点评和讨论、总结。,2,应用:采血是输血、化验分析过程的必备基本技能。核心技能:采血,包括颈静脉、前臂头静脉、小隐静脉等部位。分组实施方案:(1):分3组进行。各选组长一名。(2)各组选着需要的仪器、试剂。(3)分组进行采血。点评、讨论与总结。,3,子情景二 静脉采血,采血技能操作要点:1.前臂头皮下静脉采血。 犬置于操作台呈胸俯卧式。若采右前臂皮下静脉,助手应站在犬的左侧,其左手放在犬颊下部控制头颈不摆动,右手越过犬背部抓住犬右前肢肘关节下方,按着该腿不动并使之伸直,其拇指将前臂皮下静脉向外扭转,术者在掌部抓住前肢,在腕关节稍上方静脉内侧开始扎针抽血。,4,子情景二 静脉采血,采血技能操作要点:2.犬颈静脉采血。对于短毛长颈品种的犬其颈静脉容易看到。初学者常因血管就紧位于皮下而感到奇怪。被毛厚的犬还是剪毛为好。小型犬或幼犬的颈静脉采血时,助手右臂托住它的胸部,将犬抱在自己怀里,四肢悬空且右手抓住两前肢肘关节下部。左手将犬颊部向上抬高,使颈部伸展。若头稍偏转,颈静脉会看得更清楚。术者拇指在犬胸腔入口处压住颈静脉沟,右手握住注射器扎针采血。大型犬呈胸卧式于操作台上,其保定方式如同上述。,5,子情景三 血涂片的制作,实验目的:血涂片的制作。血涂片染色和镜检。实验计划:1.分组。2.制作图片3.镜下观察仪器耗材:1.显微镜2.载玻片3.染料等,6,子情景三 血涂片的制作方法,取血1滴,置载玻片一端,取另一边缘光滑的推片,放在血滴前面慢慢后移,接触血滴后稍停。血液即沿推片散开,将推片与载片保持3045角,向前平稳均匀推动推片,载片上便留下一层薄血膜。血涂片制成后,立即在空气中挥动,使其迅速干燥,以免血细胞变形。血膜干燥后,用铅笔在血膜的一侧写上病人姓名或编号。,7,子情景三 血涂片的制作方法,染色方法用蜡笔在血膜两头划线,以防染液溢出,然后将血膜平放在染色架上。 用瑞氏染液35滴覆盖整个血膜,固定细胞051分钟。 滴加等量或稍多的缓冲液,用吸球将其与染液吹匀,或者摇动玻片染色510分钟。 慢慢摇动玻片,然后用流动水从玻片的一侧冲去染液,待血片自然干燥后(或用滤纸吸干),即可镜检。,8,血涂片的质量控制,1血膜片的质量要求是厚薄均匀适度,低倍镜下观察全片,细胞不重叠,头尾及两侧有一定的空隙,血膜头部有明确的病人标志。2.体积较大的特殊细胞常在血膜的尾部出现,因此蜡笔划线时应注意保存血膜尾部细胞,血膜必须充分干燥,否则在染色过程中容易脱落。,9,实验 一般检查,实验目的:1.明确一般检查的主要项目。2.掌握各项目的检查方法。实验原理:1.被毛和皮肤的检查内容。2.可视粘膜的检查方法。3.主要潜在淋巴结的检查:如下颌淋巴结、肩前淋巴结、腹股沟淋巴结。4.体温、脉搏、呼吸的检查。,查什么,位置,10,实验原理,4.体温、脉搏、呼吸的检查。(1)体温的测量方法。(肛温)(2)脉搏的测量方法。(3)呼吸数的检查。,11,实验结果记录和分析,被毛、可视粘膜、浅在淋巴结的检查结果如有异常请记录,并分析原因。记录体温、脉搏、呼吸的数据。有异常请分析原因并记录。,12,技术总结,回顾检查过程中的技术问题,并进行讨论。记录讨论结果。,13,4.5 输血疗法,关于狗的血型,几十年国内外学术界一直颇有争议。目前国际上比较公认的犬血型是7种。具体是:CEA-1(A1)、CEA-2(A2)、CEA-3(B)、CEA-4(C)、CEA-5(D)、CEA-6(E)、CEA-7(F)、 CEA-8(G)八种。其中CEA-1和CEA-2相当于以前的A1和A2抗原。而A因子的抗原性最强,它是临床输血中最容易引发反应的因素。最为常见的是溶血反应。,一、犬的血型分类,14,二、输血疗法的适应症,严格地讲,狗的循环血液量和体液量下降,都可以输血。在临床上,如不明原因的大出血、休克、创伤、严重贫血(再生障碍性贫血,营养不良性贫血,)、白细胞和血小板减少、凝血不良、低蛋白血症、恶病质状态、败血症、白血病、长期消耗,如犬瘟热、细小病毒病、寄生虫(球虫、钩口线虫)的感染等,输血疗法都可以作为首选。,15,二、输血疗法的适应症,输血可以迅速地补充循环血容量和体液总量,维持一定的血压。增强血液的携氧能力,增加蛋白质的浓度和血液的凝固性,刺激机体的造血机能。同时,输血增加了白细胞的代偿能力,给机体提供了三天左右的缓冲时间。(红细胞进入受血动物体内约存活100天后被机体代谢;白细胞在机体内只能存活3天左右。)而大量补充的其它免疫因子将长期存在。目前,临床广泛应用的犬用球蛋白、白蛋白,实际上就是一种输血疗法(成份输血)。它通过一定的实验室技术,有选择性地补充了血液的某些成份,增加了机体的特异性或非特异性抗病能力,同时比输血更加安全。减少了输血反应,但临床效果不如输全血。没有条件的医院可以考虑选择。,16,提示,临床上,我们把血细胞比容作为衡量输血必要与否的一个理论指标。当红细胞比容低于0.2时,可考虑输血。,17,三、输血疗法的禁忌症,患犬有严重的心脏疾病、肺水肿、肺气肿、急性肾炎、脑部疾病、白血病等,应严禁输血。犬的红细胞比容低于0.15时,输血后也可能预后不良。临床上禁用混合血。,18,四、血液的来源,1.实验动物中心提供。2.自备血源。 临床输血往往时间紧迫,自备血原及时简单,能在第一时间为抢救小动物生命争取宝贵机会。自备血液需要解决供血犬的问题。供血犬建议选择年龄在1-2岁,体质较好,免疫完全,同时性情温驯、无攻击性的狗。体重应该在15-20公斤以上。最好是比格犬、灵缇犬、德国牧羊犬等。,19,五、采血的方法,1.采血量:不超过22毫升/公斤。每34周采血一次,不要过勤,以保证犬血的质量。2.采血方法:用装有抗凝剂的血袋直接颈静脉采血。血袋一般是200毫升规格,内装抗凝剂28毫升。医院可根据实际情况对抗凝剂进行调整,以决定采血量。3.采血时尽量让供血犬保持安静,最好把狗放在一个较高的位置,血袋略低,置于一电子称上,以借重力让血液缓慢地流入到血袋内。边采血边轻轻摇晃血袋,使血液与抗凝剂均匀混合,防止血液凝固。当血液量达到预期的称重时,停止采血。迅速封闭血袋的采血连接管以确保无菌。4.备用的血液应置于4冰箱保存,忌冷冻。理论上可保存3周。在临床上我们一般超过10天以后就弃用。,20,六、犬的交叉配血试验,交叉配血试验是狗输血之前一个比较关键的步骤。最常用的是用供血犬的红细胞泥与受血犬的血清相结合,借以判断其凝集情况。国内外学者大多认为狗的第一输血,不做交叉配血试验也是安全的,但有一定的过敏率。我们认为除非在特别紧急的情况下,能做交叉配血试验的应该尽量做,以严格程序、确保受血犬的安全,同时减少医患纠纷。,21,六、犬的交叉配血试验,交叉配血试验的具体操作方法如下:1.基本原理:用供血犬的红细胞泥与受血犬和血清相结合,借以判断其凝集情况。具体操作是取供血犬的5% 红细胞悬液与受血犬血清在主侧池反应;用供血犬的血清与受血犬的5%红细胞悬液在次侧池反应。(注意:在临床上,由于使用一次性标准血袋的缘故,无法做次侧池凝集反应。因为全血内已混合了抗凝剂。),22,六、犬的交叉配血试验,2.制作供血犬的5%红细胞悬液: 取供血犬的全血2毫升,加入0.2毫升抗凝剂(10%枸橼酸钠与全血的比例为1:9),手弹试管,混合均匀后置于天平上称重(使用同样的试管内加入生理盐水直至平衡),后置于离心机内,1500转/分钟,离心5分钟。取上清液(血浆)于另一试管中备用。(抗凝剂也可以选用草酸盐。0.1毫升可抗凝2.5毫升全血。) 试管内剩余的红细胞加8-10倍生理盐水颠倒混匀称重离心,再取上清液于另一试管中备用。如此洗涤三次,分离后成分为红细胞泥。 取已分离成功的红细胞泥0.2毫升加生理盐水3.8毫升,颠倒混匀数次即为5%的红细胞悬液。,23,六、犬的交叉配血试验,3.制备受血犬的血清: 取受血犬的全血2毫升,称重离心。1500转/分钟,离心5分钟。取上清液置于另一试管中,再用该血浆称重离心,同样1500转/分钟,离心5分钟。取上清液于另一试管中备用,受血犬的血清即制备完成。此时的血清因不含纤维蛋白,故可用于交叉配血试验。,24,六、犬的交叉配血试验,4.凝集反应的判定:取供血犬5%红细胞悬液0.2毫升,滴于载玻片正中央。随后加入受血犬血清0.1毫升,用细大头针搅拌10余圈,于2025的室温下静置2030分钟。显微镜下观察凝集情况。正常情况下,红细胞遍布于整个视野,排列均匀,无结团、无凝集、无异常形态。此时可输血。如发现有异常的红细胞,有结团、成串、混乱排列等形态,应坚决不予输血,以免发生危险。,25,六、犬的交叉配血试验,5.考虑到临床个别病例紧急,为了争取时间,缩短交叉配血试验的过程,我们总结了一个简单易行的办法:取供血犬5%红细胞悬液0.2毫升加入受血犬血清0.1毫升,置于试管中,天平称平后,离心机1500转/分钟,离心5分钟。肉眼观察,手弹试管,注意有无红细胞结团现象即可。,26,七、输血量,一般根据病情而论。经验值是:一次输血的量不要超过受血犬全血量的25%左右为宜(犬全血量红约占总体重的8%)。如一只10公斤的西施犬,输血量应为100.250.080.2公斤(200毫升)。临床上我们按2022毫升/公斤体重输血。最大输血量约400500毫升(受供血犬血源的限制)。效果良好。忌输混合血源!,27,八、输血方法,血袋连接输血器直接静脉滴注。如没有输血器,也可用输液器替代。但是得注意头皮针的大小。建议使用7.5号或更大号针头,否则容易堵塞针头,导致输血不畅。,28,九、输血注意事项,1.输血前血源应加热致常温。把血袋浸入37左右的温水中,直至温热。2.如输血时间过长,因血袋长时间静止倒置,血细胞容易下沉。建议每隔一段时间,应轻轻摇晃血袋几次。3.输血前用0.9%氯化钠溶液3050毫升,视受血犬体重加入一定量的地塞米松、维生素C、10%葡萄糖酸钙等,缓慢静脉滴注,以减轻输血反应。效果较好。4.刚刚输血时的一段时间相当关键。医护人员应严密监护受血犬的生命体征。主要是观察患犬呼吸频率、心跳、精神状态、体表是否震颤、有无异常反应等。如有异常,应告知医生并作相应处理,必要时立即停止输血。5.输血的速度一定要慢。应根据患犬的个体状况灵活掌握。小狗,恶病质犬、老年犬,心脏功能不好的犬、高度贫血的犬、有细小病毒心肌炎倾向的狗,都应该慢输。6.输血作为一种治疗方法,能有效提高患犬的康复机率。但输入的血液并不是万能药。所以后续的药物治疗不可或缺。,29,十、输血反应,引起输血反应的原因除血型不适合外,还可能有病原体的输入。常见的巴贝斯焦虫、巴尔通氏体、埃利希氏体、传染性肝炎病毒、CDV、以及血液保存过程中细菌和真菌的增殖等。输血反应发生后,临床主要感观表现为患犬精神烦躁、不安或兴奋,呼吸急促或困难。进而出现眼周潮红、充血、眼睑浮肿、全身肌肉或眼球震颤、搔痒。严重者呕吐、流涎、大小便失禁、血红蛋白尿、黄疸、虚脱和休克。,30,十、输血反应,主要反应如下:1.溶血反应。2.过敏反应。3.增加肝脏负担。4.输血过快或过量导致急性充血性心力衰竭、肺水肿。,31,十一、输血反应的对症治疗,发现输血反应的症状及变化后应立即停止输血。同时氨茶碱10毫克/公斤,肌肉注射或静滴;地塞米松24毫克/公斤,静脉注射。为了防止肾功能障碍及心肺并发症,早期可静脉注射速尿。呼吸困难者可适量使用尼可刹米。,32,十二、输血的后期问题及解决办法,主要是肝脏的负担问题。输血后一定要输入一定量的葡萄糖、VC和保护肝脏药物如肝泰乐、促肝细胞生成因子等。最好连续使用三四天。因为大量的红细胞输入体内以后,携带了相当量的血红蛋白。受血动物要将血红蛋白中的二价铁离子转化为三价铁离子,这个过程产生了大量的直接胆红素。它与肝脏中的葡萄糖结合形成脂型胆红素排出。输血量越大肝脏的负担越大。这种情况在临床上很常见。好多患犬输血之后的数小时状态很好。可是过一晚之后却出现精神沉郁,排血红蛋白尿,黃疸等症状,且能持续数天。实际上就是这个原因。,33,实验 外科包扎技术,实验目的:掌握外科常用的包扎技术;指导不同包扎方法的区别和具体的应用。试验器材:脱脂棉、纱布卷、胶带、剪刀等。核心技能:基本包扎技术。1.环形包扎技术。2.螺旋形包扎技术。3.折转包扎法。,34,

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