球菌及检验PPT课件

球菌及检验,1,球菌（coccus）是引起人类化脓性感染主要细菌,又称化脓性球菌（pyogenic coccus）。常见需氧和兼性厌氧球菌包括：,2,葡萄球菌属Staphylococcus,3,一、分类,Bergys分类 32种、15亚种。常见金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、头状葡萄球菌、人葡萄球菌等。凝固酶分类 凝固酶阳性：如金黄色葡萄球菌 凝固酶阴性：如表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌等噬菌体分型 将金黄色葡萄球菌分为5群26型。,4,二、细菌特性,（一）形态染色 革兰阳性球菌，菌体呈球形，散在或呈葡萄状排列（图1、图2），无鞭毛、无芽胞，少数菌株能形成荚膜。在青霉素等药物诱导下可形成L型（图3）。,（图1）,（图2）,（图3）,5,(二)培养特性,多数为兼性厌氧，少数为专性厌氧菌；营养要求不高，最适生长温度37，最适pH7.4。多数菌株具有耐盐性，能在含10%15%NaCl的培养基中生长。在肉汤培养基中生长迅速，呈均匀混浊生长,6,血琼脂平板上： 菌落中等大小、圆形凸起、表面光滑、湿润、边缘整齐、不透明，呈金黄色、白色或柠檬色。金黄色葡萄球菌（图1）菌落周围有明显的-溶血环，腐生葡萄球菌（图3）和大多数表皮葡萄球菌（图2）无溶血环。,图1,图2,图3,7,高盐甘露醇平板上： 金黄色葡萄球菌分解甘露醇，呈黄色菌落。高盐卵黄琼脂平板上： 金黄色葡萄球菌产生卵磷脂酶，分解卵磷脂，在菌落周围形成一圈白色沉淀环。,8,（三）生化试验,触酶试验阳性（图1）。分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖，产酸不产气（图2）。金黄色葡萄球菌能分解甘露醇，凝固酶试验及耐热DNA酶试验阳性。,（图1）,（图2）,9,（四） 抗原结构,主要有两种抗原：1.葡萄球菌A蛋白（SPA）有种、属特异性。2.多糖抗原 有型特异性，存在于细胞壁。,10,三、临床意义,（一）致病物质外毒素 葡萄球菌溶素、杀白细胞素、肠毒素、表皮剥脱毒素、毒性休克综合征毒素-1等。侵袭性酶类 血浆凝固酶、耐热核酸酶、透明质酸酶等,11,2. 所致疾病,皮肤软组织感染 疖、痈、毛囊炎、蜂窝组织炎、伤口化脓、脓肿等。,12,组织器官及全身性感染 肺炎、心包炎、骨髓炎、脑膜炎、肾盂肾炎、尿道感染、败血症、脓毒血症等。医院感染 伪膜性肠炎、人工瓣膜性心内膜炎、静脉导管感染等。,13,毒素性疾病 食物中毒 烫伤样皮肤综合征 毒性休克综合征,14,四、微生物学检验,（一）检验程序,15,（二）标本采集,根据病变部位不同，采集相应标本。,16,（三） 检验方法,1显微镜检查 除血液标本外，其他标本均可直接涂片作革兰染色检查。,脓液直接涂片（革兰染色）,血标本培养后涂片（革兰染色）,17,2. 分离培养,血液标本增菌培养分离培养（血平板） 一般标本 分离培养（血平板） 污染标本（粪便、呕吐物等） 分离培养（高盐甘露醇平板）,18,3. 鉴定,（玻片法） （试管法）血浆凝固酶试验,胶乳凝集试验,新生霉素敏感试验,19,金黄色葡萄球菌与CNS 的鉴别,20,葡萄球菌属与微球菌属的鉴别,21,链球菌属Streptococcus,22,一、分类,Bergys分类 40个种和亚种溶血现象分类 甲型溶血性链球菌 溶血。草绿色链球菌、肺炎链球菌等 乙型溶血性链球菌 溶血。化脓性链球菌、无乳链球菌等 丙型链球菌 溶血。牛链球菌 Lancefield血清学分类 A、B、C、D20群，最常见A群,23,三、微生物特性,（一）形态染色 革兰阳性球菌，菌体呈球型或卵圆性，链状排列，无鞭毛、无芽胞，幼龄菌可形成荚膜。肺炎链球菌常呈瓜仁状或矛头状，呈双排列。,24,兼性厌氧，营养要求较高，普通培养基中不能生长，在血琼脂平板上生长良好。最适温度37，最适pH7.47.6。 菌落小、圆形、凸起，表面光滑湿润，边缘整齐，灰白色、半透明或不透明，周围有、三种不同的溶血。,(二) 培养特性,25,肺炎链球菌：菌落扁平，中央呈脐状凹陷， 溶血。,26,（三）生化试验,触酶,能分解多种糖类和蛋白质。 肺炎链球菌分解菊糖，胆盐溶解试验阳性和optochin敏感试验阳性，籍此可与草绿色链球菌相区别。,27,（四）抗原结构,1. 多糖抗原：群特异性抗原，将链球菌分为20群。对人致病的90属A群。2. 蛋白质抗原：具型特异性，与致病性有关的是M抗原。3. 荚膜多糖抗原 根据荚膜多糖抗原不同，将肺炎链球菌分为85个血清型。,28,三、临床意义,（一）致病物质 细菌表面结构 M蛋白、脂磷壁酸、荚膜 外毒素 链球菌溶血素O（SLO）、链球菌溶血素S（SLS）、致热外毒素（红疹毒素）侵袭性酶类 链激酶、链道酶、透明质酸酶等,29,A群链球菌(化脓性链球菌) 约占临床上链球菌感染的90%。（1）化脓性感染皮肤软组织感染 痈、蜂窝织炎、脓疱疮、丹毒、淋巴结炎、医源性伤口感染,（二）所致疾病,30,组织器官及全身性感染 扁桃体炎、急性咽炎、咽峡炎、中耳炎、乳突炎和产后感染等。（2） 毒素性疾病 猩红热（3）变态反应性疾病 急、慢性风湿热和急性肾小球肾炎等。 以A群12型多见。,扁桃体炎,猩红热,乳突炎,31,2.B群链球菌（无乳链球菌）新生儿败血症和脑膜炎的主要病原菌。3.草绿色链球菌（链球菌）亚急性细菌性心内膜炎的常见病原菌。4.肺炎链球菌 大叶性肺炎、支气管肺炎、化脓性脑膜炎、鼻窦炎、中耳炎等。,32,四、微生物检验,（一）检验程序,33,（二）标本采集 根据病变部位不同，采集相应标本。痰液、血液、脑脊液等（三）检验方法 1.显微镜检查 除血液标本外，其他标本均可直接涂片作革兰染色检查。,肺炎链球菌脑脊液涂片,化脓性链球菌脓汁涂片,34,2. 分离培养 血液标本增菌培养分离培养（血平板）371824h 一般标本 分离培养（血平板）,35,3. 鉴定,（1）Lancefield血清学分群（2）化脓性链球菌鉴定 杆菌肽敏感 （3） 无乳链球菌鉴定 CAMP试验马尿酸钠试验,36,（4）D群链球菌 胆汁七叶苷试验65gL NaCl耐盐试验（5）肺炎链球菌鉴别菊糖Optochin敏感试验胆汁溶菌试验荚膜肿胀试验,37,草绿色链球菌与肺炎链球菌的鉴别,38,肠球菌Enterococcus,39,一、分类,1984年从链球菌属分离出来。Bergys分类 19种 粪肠球菌、鸟肠球菌、屎肠球菌等Lancefield血清学分群 D群,40,二、细菌特性,(一)形态染色 革兰阳性球菌，单个、成双或呈短链状排列。无芽胞、无荚膜，个别菌种有稀疏鞭毛。,41,(二)培养特性,与链球菌相似。兼性厌氧，厌氧要求较高，在血琼脂平板上形成较小、灰白色、湿润、凸起、或溶血。,42,(三)生化反应,触酶试验胆汁七叶苷试验65g/L氯化钠生长试验吡咯烷酮芳基酰胺酶（PYR）试验,43,二、临床意义,人类肠道和女性生殖道的正常菌群。 医院感染最常见的革兰阳性球菌，仅次于金黄色葡萄球菌。最多见于尿路感染，其次为腹腔和盆腔等部位的创伤和外科手术后感染。,44,四、微生物检验,（一）检验程序,脓液、尿液、穿刺液,初报 挑选可疑菌落,45,（二）标本采集,血、尿、创伤标本和其他拭子。（三）检验方法1. 显微镜检查 除血液标本外，其他标本均可直接涂片作革兰染色检查。2. 分离培养 血液标本增菌培养分离培养（血平板）371824h 一般标本 分离培养（血平板）,46,3. 鉴定 肠球菌与D群链球菌的鉴别,47,奈瑟菌属和布兰汉菌属,48,一、分类,（一）奈瑟菌属(Neisseria) 共11个种，脑膜炎奈瑟菌(N.merningitidis) 和淋病奈瑟菌(N.gonorrhoeae)为最重要的病原菌。（二）布兰汉菌亚属（subgenus Branhamella） 莫拉菌属（Moraxella）布兰汉菌亚属（subgenus Branhamella）共4个种，仅卡他布兰汉菌（M.(B.)catarrhalis）对人类有致病性。,49,二、细菌特性,（一）形态染色 革兰阴性球菌，肾形、成双排列，凹面相对。标本直接涂片镜检，可位于中性粒细胞细胞内、外。无鞭毛、无芽胞，新分离株多有荚膜和菌毛。,脑膜炎奈瑟菌,卡他布兰汉菌,淋病奈瑟菌,50,(二)培养特性,1. 脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌 专性需氧，初次分离培养需要510CO2。营养要求高，最适培养基为巧克力琼脂平板。 菌落较小，圆形凸起、表面光滑湿润、边缘整齐、透明或半透明、无色或呈灰白色，似露滴状，不溶血。有自溶酶。,脑膜炎奈瑟菌,淋病奈瑟菌,51,专性需氧，营养要求不高，普通培养基上即可生长。菌落灰白色或红棕色、光滑、圆形凸起、不透明、不溶血；培养48h，菌落表面干燥，坚韧，不平，边缘不繁齐；如用接种环推移，整个菌落可移动。,2. 卡他布兰汉菌,52,（三）生化反应,三种细菌均为氧化酶 、触酶。,奈瑟菌和卡他布兰汉菌的主要生化反应,53,（四）抗原结构,脑膜炎奈瑟菌抗原结构模式图,淋病奈瑟菌抗原结构模式图,54,（五）抵抗力,奈瑟菌的抵抗力非常弱，对冷热、干燥、化学消毒剂均非常敏感。 卡他布兰汉菌的抵抗力较强,55,二、临床意义,（一）淋病奈瑟菌1. 致病物质：菌毛、外膜蛋白、内毒素等。2. 所致疾病 人类是淋病奈瑟菌的唯一宿主。 性传播疾病淋病 淋球菌性结膜炎淋菌性关节炎、败血症、脑膜炎（偶见）,56,（二）脑膜炎奈瑟菌,1. 致病物质：荚膜、菌毛、内毒素2.所致疾病 流行性脑脊髓膜炎皮下出血（出血性紫癜）败血症休克和DIC,57,（三）卡他布兰汉菌,1. 致病物质：内毒素2.所致疾病 人类和其他动物上呼吸道的正常寄生菌之一，当机体抵抗力下降时，引起下呼吸道感染和结膜炎、中耳炎、鼻窦炎、支气管炎，偶尔引起菌血症、心内膜炎、脓胸、脑膜炎、尿道炎等。,58,（一）检验程序,四、微生物检验,59,（二）标本采集,标本采集后立即送检，最好床边接种。脑膜炎奈瑟菌 咽拭子、血液、脑脊液、皮肤出血淤斑渗出物淋病奈瑟菌 女性：尿道或阴道分泌物； 男性：尿道分泌物3. 卡他布兰汉菌 痰液或支气管灌洗液,60,1.显微镜检查 除血液标本外，其他标本均可直接涂片作革兰染色检查。,脑脊液标本直接涂