微生物的实验室培养完成稿

知识回顾：果酒 -果醋 -腐乳 -泡菜 -酵母菌醋酸菌毛 霉乳酸菌微生物的实验室培养病 毒蘑 菇微生物的类群微生物的类群微微生生物物 原核类原核类 真核类真核类 非细胞类非细胞类细菌、支原体、蓝藻等细菌、支原体、蓝藻等一般都是个体微小、结构简单、数一般都是个体微小、结构简单、数量多、繁殖快、分布广泛等。量多、繁殖快、分布广泛等。酵母菌、霉菌、食用菌酵母菌、霉菌、食用菌草履虫、变形虫草履虫、变形虫病毒病毒 微生物的共同特点微生物的共同特点：一、基础知识：（一）培养基 培养基是由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的营养基质。（ 1）按物理状态： 固体培养基 和 液体培养基（ 2）按功能来分：选择培养基和鉴别培养基（ 3）按成分来分：天然培养基和合成培养基1.培养基的分类 琼 脂 2、培养基的营养成分1000mL牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成培养基组分 提供的主要营养牛肉膏 5g蛋白胨 10gNaCl 5gH2O 定容至 1000mL碳源、磷酸盐和维生素氮源和维生素无机盐氢元素、氧元素(1)水 (2)碳源 (3)氮源 (4)无机盐(1)pH值如 :培养霉菌需酸性、培养细菌需中性或 微碱性。(2)特殊营养物质 -生长因子 如：培养乳酸杆菌需要在培养基中添加维 生素。(3)氧气的含量如 :培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件3、培养基内所需的其他条件单个或少数菌体1.定义：4、 菌落鉴定菌种 的重要依据固体培养基 子细胞群体(二 )无菌技术1、获得纯净培养物的关键 : 2、无菌技术包括的四大方面：防止外来杂菌的入侵（ 1）对实验操作空间、操作者的衣着和手进 行清 洁和 消毒 ；（ 2）将培养器皿、接种用具和培养基等器具进 行 灭 菌 ；（ 3）为避免周围微生物污染，实验操作应在 酒精灯火焰附 近旁 进行；（ 4）避免已 灭菌 处理的材料用具 与周 围物品相 接触。（）消毒定义：使用较为温和的物理或化学方法，仅杀死物体 表面或内部的 部分微生物的过程。不包括芽孢和孢子。（ 2 ）灭菌的定义：使用强烈的理化因素杀死物体 内外所有微生物 ，包括所有细菌的繁殖体、芽孢、霉菌及病毒，而达到完全无菌的过程。消毒与灭菌1、 煮沸消毒法 ：2、 巴氏消毒法 ：3、 化学药剂消毒法 ：4、 紫外线消毒(1)消毒的方法：常用的消毒与灭菌的方法100 煮沸 5-6min70-75 下煮 30min或80 下煮 15min用 75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒 ;氯气消毒水源。紫外灯照射1、 灼烧灭菌接种环、接种针、试管口2、 干热灭菌160-170 下加热 1-2h玻璃器皿的灭菌3、 高压蒸气灭菌100kPa、 121 下维持15-30min培养基的灭菌灭菌的方法：耐高温需保持干燥的 物品， 160 170 1 2小时接种环、接种针等 金属用具7075 、 30min 80 、 15min100 、 56min消毒 灭菌定义方法较为 温和 理化方法，杀死 部分有害菌体（ 不 包括芽孢、孢子）强烈 的理化方法，杀死 所有微生物（包括 芽孢、孢子 ）煮沸消毒法巴氏消毒法化学药剂紫外线灼烧灭菌干热灭菌酒精、氯气、石炭酸等 高压蒸汽灭菌培养基，100KPa、121 、 15 30min消毒与灭菌的比较二、实验操作（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基计算称量 溶化 灭菌 倒平板（二）纯化大肠杆菌接种方法： 平板划线法 和 稀释涂布平板法（三）将接种后的培养基和一个未接种的培养基放入 37 恒温箱中培养 12h和 24h后，观察并记录。（四）菌种的保存（四）菌种的保存1、下列有关培养基的叙述正确的是 ( ) A培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质 B培养基只有两类：液体培养基和固体培养基 C固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基 D微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个细菌 2、不同培养基的具体配方不同，但一般都含有 ( ) A碳源、磷酸盐和维生素 B氮源和维生素 C水、碳源、氮源和无机盐 D碳元素、氧元素、氢元素、氮元素 3下列常用的无菌操作中错误的是 ( ) A用酒精擦拭双手 B用氯气消毒水源 C 实验操作应在酒精灯火焰附近进行 D玻璃器皿 (吸管、培养皿 )可用酒精擦拭4有关倒平板的操作错误的是 ( ) A将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上 B使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰 C将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌子上 D等待平板冷却凝固后需要倒过来放置 思考 1 溶化时为什么要将牛肉膏连同称量纸一起加热 ? 加琼脂的目的是什么 ?可保证粘附在称量纸上的牛肉膏也能溶于水中 ,减少误差 .作为凝固剂思考 2 在灭菌 前 , 用牛皮纸、旧报纸包紧盛有培养基的锥形瓶的目的是什么？ 培养皿能否用高压蒸汽灭菌？在灭菌时能避免水蒸汽浸湿棉塞 ,取出培养基锥形瓶时也起到隔绝空气中杂菌污染的作用。不能因为培养皿要保持干燥 ,应该用干热灭菌 .倒倒平平板板操操作作1.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？平板冷凝后，为什么要将平板倒置？2.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？培养微生物吗？为什么？平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使既可以使 培养基表面的水分更好地挥发培养基表面的水分更好地挥发 ，又可，又可以防止皿盖上的以防止皿盖上的