gao第02章药物的鉴别试验

第二章药物的鉴别试验药物的鉴别试验一概述二鉴别试验项目三鉴别方法四鉴别试验条件五鉴别试验灵敏度一、概述 药物的鉴别试验（ identification test）是根据药物的分子结构、理化性质，采用化学、物理化学或生物学方法来检验药物，了解所要检验的药物是哪一类、哪一种药物，即 鉴别药物的真伪 。 药典收载的鉴别试验方法，均为用来 证实 贮藏在有标签容器中的药物是否为其所标示的药物。与分析化学中的定性鉴别不同的是，这些试验方法虽有一定的专属性，但 不能赖以鉴别未知物 。 判断已知物的 真伪二、鉴别试验的项目 性状 -反映了药物特有的物理性质，包括 : 外观 聚集状态、晶型、色泽以及臭、味等性质。 溶解度 在一定程度上反映了药品的纯度。 物理常数（ 相对密度、馏程、熔点、凝点、比旋度、折光率、黏度、酸值、皂化值、羟值、碘值、吸收系数）。鉴别性状 (description)鉴别 (identification)真伪纯度表示方法 使 1g或 1mL溶质溶解的溶剂体积极易溶解 1mL易溶 1 10mL 溶解 10 30 mL略溶 30 100 mL 微溶 100 1000 mL 极微溶解 1000 10000 mL几乎不溶或不溶 10000 mL中不能完全溶解例 磺胺嘧啶 “在乙醇或丙酮中微溶，在水中几乎不溶；在氢氧化钠试液中易溶，在稀盐酸中溶解 ”。熔点 由固体熔化成液体的温度熔融同时分解的温度熔化时自初熔至全熔的一段温度物理常数药学专升本 pharmaceutical analysis 6初熔 全熔熔融同时分解 样品受热达到一定温度时产生气泡、变色或浑浊初熔 样品开始局部液化、出现明显液滴全熔 样品全部液化药学专升本 pharmaceutical analysis 7 中国药典收载有三种测定方法第一法：测定易粉碎的固体药品第二法：测定不易粉碎的固体药品第三法：测定凡士林或其他类似物质要求报告 初熔 和 终熔例 甲基炔诺酮 ： “本品的熔点为 204 212 ”； 溴化新斯的明 ： “本品的熔点为 171176 ，熔融时同时分解 ”。 比旋度 -在一定波长（ 589.3nm）与温度（20C） 下，偏振光透过长 1dm且每 1mL中含有旋光性物质 1g的溶液 (1g/ml)时测得的旋光度tD = 100 / CL例 维生素 C的比旋度测定：“取本品，精密称定，加水溶解并定量稀释使成每 1mL中约含 0.10g的溶液，依法测定，比旋度为 20.5至 21.5”。物理常数钠光谱 D线（ 589.3nm）药学专升本 pharmaceutical analysis 9摩尔吸收系数 C= 1mol/Ll= 1cm百分吸收系数C=1%(g/100ml)l= 1cm物理常数 吸收系数 -在给定波长、溶剂和温度等条件下，吸光物质在单位浓度、单位液层厚度时的吸收度称为吸收系数。例 盐酸甲氧明 ：“取本品，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每 1mL中约含 30g的溶液，照分光光度法，在 290nm的波长处测定吸收度，吸收系数（ E1%1cm ）为133 141”。 一般鉴别试验依据 某一类 药物的化学结构或理化性质的特征，通过化学反应来鉴别药物的真伪。 无机药物 -根据其组成的 阴离子和阳离子的特殊反应。 有机药物 -采用典型的 官能团 反应。 无机药物 -阴、阳离子的特殊反应 。包括：钠盐、钾盐、钙盐、钡盐、铵盐、硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐、氯化物等离子的鉴别 例 钠盐、钾盐、钙盐 的焰色反应取铂丝，用盐酸湿润后，蘸取供试品，在无色火焰中燃烧，火焰即显各离子的特征颜色： 钠离子显 鲜黄色 ， 钾离子显 紫色 ， 钙离子显 砖红色 。测定原理 钠火焰光谱： 589.0nm、 589.6nm 黄色 钾火焰光谱 ： 766.49nm、 769.90nm 紫色 粉红色（蓝色钴玻璃） 钙火焰光谱 ： 622nm、 554nm、 442.67nm 与 602 nm 显砖红色（ 622nm） 铵盐 鉴别方法 取供试品，加过量氢氧化钠试液，加热，即分解，发生 氨臭 ；遇湿润的 红色石蕊试纸 ，能使之 变蓝 ，并能使 硝酸亚汞试液湿润的滤纸显黑色 。测定原理为： 氯化物 鉴别 供试液 硝酸 硝酸银 白色 白色 氨试液 沉淀溶解 硝酸 白色 硫酸盐 鉴别 供试液 氯化钡 白色 白色 硝酸（盐酸） 沉淀不溶 有机药物 典型的 官能团反应有机氟化物类、丙二酰脲类、芳香第一胺类、有机酸盐、托烷生物碱类等鉴别。例 有机 氟化物 鉴别有机破坏： 样品经氧瓶燃烧法破坏，被碱性溶液吸收成为无机氟化物鉴别反应： 与茜素氟蓝、硝酸亚铈在 pH4.3溶液中形成篮紫色络合物。反应原理如下：水杨酸 三氯化铁反应在 中性或弱酸性 条件下，水杨酸和试液生成配位化合物，在中性时呈 红色 ，弱酸性时呈紫色 。反应原理如下：酒石酸盐 ： 银镜反应取供试品的中性溶液，置洁净的试管中，加氨制硝酸银试液数滴，置水浴中加热，银即游离并附在试管内壁成银镜。反应原理： 注 ：一般鉴别试验只能证实是 某一类 药物，不能证实是 某一种 药物。 专属鉴别试验（ specific identification test）是证实 某一种 药物的依据。 根据每一种药物化学结构的差异及其所引起的物理化学特性不同，选用某些特有的灵敏的定性反应，来鉴别药物的真伪。例 巴比妥类 药物含有共同母核，区别在于 5， 5-位取代基和 2-位 取代基的不同 ：苯巴比妥 -苯环司可巴比妥 -双键硫喷妥钠 -硫原子又如 甾体激素类 药物含有环戊烷并多氢菲母核，主要差别在 A环和 D环的 取代基不同 ，可利用这些结构特征进行鉴别确证。 一般鉴别试验 ，以某些类别药物的共同化学结构为依据，根据其相同的物理化学性质进行药物真伪的鉴别，以 区别不同类别 的药物。 专属鉴别试验 ，则是在一般鉴别试验的基础上，利用各种药物的化学结构差异，来鉴别药物，以区别同类药物或具有相同化学结构部分的 各个药物单体 ，达到最终确证药物真伪的目的。 药学专升本 pharmaceutical analysis 233. 生物学法2. 物理化学法1. 化学法 颜色、 、 、衍生物 m.p.光谱法 UV、 IR色谱法 TLC、 HPLC微生物、动物常见鉴别反应收载在 中国药典 附录常见金属离子、酸根、官能团 “一般鉴别试验 ”三、鉴别方法 化学鉴别法： 操作简便、反应迅速、现象明显，实验成本低，应用广，但 专属性比仪器分析法差呈色反应 -指供试品溶液中加入适当的试剂溶液，在一定条件下进行反应，生成易于观测的 有色产物 。在鉴别试验中最为常用的反应类型有：颜色、 、 、衍生物 m.p. 三氯化铁 呈色反应 -含有 酚羟基或水解后产生酚羟基； 异羟肟酸铁 反应 -为芳酸及其酯类、酰胺类； 茚三酮 呈色反应 -化学结构中含有 脂肪氨基 ； 重氮化 -偶合 显色反应 -芳伯氨基或能产生芳伯氨基； 氧化还原 显色反应及其它颜色反应。沉淀反应 系指供试品溶液中加入适当的试剂溶液，在一定条件下进行反应，生成 不同颜色的沉淀 ，有的具有特殊的沉淀形状。与 重金属离子 的沉淀反应：在一定条件下，药物和重金属离子反应，生成不同形式的沉淀；与 硫氰化铬铵 （雷氏盐）的沉淀反应：这类药物多为 生物碱 及其盐，具有芳香环的有机碱及其盐； 其它沉淀反应。荧光反应药物本身 可在可见光下发射荧光；药物溶液 加硫酸使呈酸性 后，在可见光下发射荧光；药物和 溴反应 后，于可见光下发射出荧光；药物和 间苯二酚反应 后，发射出荧光 ;药物经 其它反应 后，发射荧光。 光谱鉴别法紫外光谱鉴别法 （ UV法）紫外光谱法操作简便、快速；但由于分子中不是每个基团都有紫外吸收，波长范围较窄，光谱较简单、平坦，曲线形状的变化不大，用作鉴别的 专属性远不如红外光谱法紫外光谱相同的物质不一定是同一种物质药学专升本 pharmaceutical analysis 29对照品对照 对照图谱规定吸收波长规定吸收波长和相应吸收度规定吸收波长和吸收系数规