消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全ppt课件

第三章 消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全第四章 噬菌体Chapter 3 Disinfection, Sterilization and Biosafety of Pathogenic Microbiology Lab 第三章 消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全Section 1 Conmmon Terminology of Disinfection and Sterilization 第一节 消毒灭菌常用术语消毒 (disinfection) ： The reduction or elimination of pathogenic microorganisms in or on materials, so they are no longer a health hazard.杀死物体上病原微生物的方法 ,称为消毒。 (不一定能杀死含芽胞的细菌和非病原微生物 )灭菌 (sterilization) ： The process of destroying all microbial forms. A sterile object is free of all microbial forms, including bacterial spores.杀灭物体上所有微生物的方法。 (包括杀灭病原微生物和非病原微生物、细菌的繁殖体和芽胞 )要求比消毒高。概念：概念：防腐 (antisepsis) ：Use of chemical agents on skin or other living tissue to inhibit or eliminate microbes; no sporicidal杀芽胞的 action is implied.防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法，细菌一般不死亡。无菌 (asepsis) ： No living microorganisms exists.无菌操作 (antiseptic technique)：防止细菌进入人体或其他物品的操作技术。清洁 (cleaning)：通过除去尘埃和一切污秽以减少微生物数量的过程。 Section 2 Method for Controlling Microorganisms 第二节 消毒灭菌的方法物理消毒灭菌法 Controlling microorganisms by physical agents化学消毒灭菌法 Using Disinfectants and Antiseptics to Control Microorganisms一 .物理消毒灭菌法 Controlling microorganisms by physical agents主要有 :热力、辐射、滤过、干燥与低温等。(一 )热力灭菌法 High Temperature无芽胞细菌经 55-60 作用 30-60分钟死亡 ;湿热 80 经 5-6分钟可杀灭所有细菌繁殖体、真菌和酵母菌。干热灭菌法 Dry heat湿热灭菌法 Moist heat1.干热灭菌法 dry heat sterilization A.原理 :脱水干燥和大分子变性。B.方法 : 焚烧：废弃物、尸体 ; 烧灼 :接种环和试管口的灭菌 ; 干烤 :烤箱灭菌 ; 171 ,1h; 160 ,2h; 121 ,16h 适用于高温下不变质、不损坏、不蒸发的物品 ,例玻璃器皿、瓷器、玻璃注射器等的灭菌。 红外线： 0.7-1000m电磁波， 1-10 m热效应强；照射表面灭菌，不能使物体均匀加热，医疗器械灭菌2.湿热灭菌法 moist heat sterilization A 巴氏消毒法 (pasteurization)：法国巴斯德创用 61.1-62.8 ， 30分钟； 71.715-30 秒 主要用于牛乳消毒。B.煮沸法 : 2%碳酸氢钠 食具、刀剪、镊子等 C.流动蒸气灭菌法 :又称常压蒸气灭菌法D.间歇蒸气灭菌法 :Arnold(阿诺氏灭菌器 )此法用于不耐高热的含糖、牛奶等培养基的消毒。E.高压蒸气灭菌法（ autoclaving） :最有效的一种灭菌方法1.05kg/cm2(15磅 ) 、 121.3 ， 15-20分钟 。用于一般培养基、生理盐水、手术敷料等耐高温耐湿等物品的灭菌。高压蒸汽灭菌器 湿热灭菌的效力比干热灭菌的大 ,原因 : 湿热中细菌菌体蛋白较易凝固 ; 穿透力比干热大 ; 湿热的蒸气有潜热存在。（二） 辐射杀菌法 Radiation sterilization 1.紫外线 Ultraviolet ray波长 240-300nm的 紫外线具有杀菌作用。 265-266nm其主要作用于 DNA， 使一条 DNA链上相邻的两个胸腺嘧 啶共价结合形成二聚体，导致细菌变异和死亡。应用：手术室、传染病房、细菌实验室的空气消毒，或不耐热物品的表面消毒。2.电离辐射 射线、 射线 一次性医用塑料制品、药品等的灭菌3.微波波长 1mm1m 食品、非金属器械、检验室等用品消毒（三） 滤过除菌法 Filtration sterilization 1.滤菌器 薄膜滤菌器 硝基纤维素膜玻璃滤菌器石棉滤菌器素陶瓷滤菌器主要用于不耐高温的血清、毒素和抗生素等2.空气除菌采用生物洁净技术滤器和层流室（四） 干燥与低温抑菌法dry and low temperature bacteriostasis 干燥法低温法：低温可使细菌的新陈代谢减慢，常用作保存细菌菌种。冷冻真空干燥法 lyophilization是目前保存菌种的最好方法。常用消毒剂的杀菌机制常用消毒剂的杀菌机制 sterilizing mechanism of chemical disinfectants 1、使菌体蛋白变性或凝固：、使菌体蛋白变性或凝固： 例酚类例酚类 (高浓度高浓度 )醇类等；醇类等；2、干扰微生物酶系统和影响其代谢、干扰微生物酶系统和影响其代谢 :例重金属与细菌的 -SH基结合使有关酶失去活性 ；3、损伤细胞膜、损伤细胞膜 ：例表面活性剂和脂溶剂（新洁尔灭等）：例表面活性剂和脂溶剂（新洁尔灭等） 。选择原则选择原则效果好（适时适量适度）、毒力低、便宜效果好（适时适量适度）、毒力低、便宜二、化学消毒灭菌法 Using Disinfectants and Antiseptics to Control Microorganisms（一） 高效消毒剂 （ high-level disinfectants）杀芽胞1.含氯消毒剂 ； 2.过氧化物消毒剂 ；3.醛类消毒剂 ； 4.环氧乙烷（二） 中效消毒剂 （ intermediate-level disinfectants） 杀繁殖体1.含碘消毒剂 ； 2.醇类消毒剂（三） 低效消毒剂 （ low-level disinfectants） 杀多数繁殖体1.季铵盐类 ； 2.氯已定 ； 3.高锰酸钾 化学消毒剂化学消毒剂按其杀菌能力可分为三大类：按其杀菌能力可分为三大类：第三节 消毒灭菌的运用（ 一 ） 医疗器械物品的消毒灭菌1、 高危器械物品 用时需进入无菌组织的物品。所有这些物 品都应该灭菌。 2、 中危器械物品 用时不进入无菌组织 ， 但接触黏膜的器械。 采用消毒即可。3、 低危器械物品 只接触未损伤皮肤 ，但 不进入无菌组织和不接触黏膜的物品。一般用后清洗、消毒即可。4、 快速周转的医疗器械 (二 )室内空气消毒灭菌 1、 物理消毒法 紫外线照射 （ 1.5W /m3， 1h） 最常用 ； 滤过除菌 ： 空气通过孔径小于 0.2m的高效过滤装置以除去细菌和带菌尘埃 2、 化学消毒法 包括化学消毒剂喷雾和熏蒸 ： 过氧乙酸喷雾、熏蒸 ； 过氧化氢喷雾 ； 二氧化氯溶液 喷洒； 中草药点燃烟熏。 艾叶（三）手和皮肤的消毒（三）手和皮肤的消毒用肥皂和流动水经常并正确洗手用肥皂和流动水经常并正确洗手 ；病原微生物污染时应用消毒剂消毒。病原微生物污染时应用消毒剂消毒。（四） 黏膜 的消毒（五）病人排泄物与分泌物的消毒灭菌 （六）病人污染物品的消毒 （七）饮水的消毒 （八）环境的消毒 Section 4 Factors influencing antimicrobial activity 第四节 影响消毒灭菌效果的因素 一 、 微生物的种类 真菌、细菌繁殖体、病毒、芽胞二 、 微生物的物理状态 三 、 微生物的数量 四 、 消毒剂性质、浓度与作用时间 如表面活性剂 G+五 、 温度 一般温度升高可提高消毒效果六 、 酸碱度 戊二醛 +碳酸氢钠七 、 有机物第五节 病原微生物实验室生物安全生物安全 （ biosafety） 是生物技术安全（ safety of biotechnology） 的简称。狭义 ： 现代生物技术的研究、开发、 应用及转基因生物可能对生物多样性、生态环境和人类健康产生潜在的危害。广义 ： 与生物有关的各种因素对社会 、 经济、人类健康及生态环境所产生的危害或潜在风险。病原微生物所致的安全问题，如病原微生物实验室的安全隐患、生物武器、生物恐怖、重大传染病的暴发流行等，也是人类社会所面临的最现实的生物安全问题。病原微生物实验室生物安全的核心是 防扩散和防感染 。关于 病原微生物实验室生物安全 ， 我国法令包括对病原微生物的分类管理，对实验室的分级管理 ， 实验室感染的控制以及监督和法律责任等。 一、病原微生物的分类根据传染性、感染后对个体或者群体的危害程度，病原微生物分为四类：第二类第二类 ： 能够引起人类或者动物严重疾病，能够引起人类或者动物严重疾病， 比较容易直比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物。间传播的微生物。包括高致病性禽流感病毒、艾滋病毒、狂犬病包括高致病性禽流感病毒、艾滋病毒、狂犬病病毒、病毒、 SARS冠状病毒等冠状病毒等 70种。种。第一类第一类 ： 能够引起人类或者动物非常严重疾能够引起人类或者动物非常严重疾 病的微生物，病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。包括天花病毒、埃博拉病毒等包括天花病毒、埃博拉病毒等 29种病原体。种病原体。第三类 ： 能够引起人或动物疾病，但一 般情况下对人、动物或环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效 治疗和预防措施的微生物。包括：各型肝炎病毒、疱疹病毒、流行性感冒病毒、破伤风梭菌等 275种。第四类 ： 在通常情况下不会引起人或动物疾病的微生物。如小鼠白血病病毒等。第一类、第二类统称为高致病性病原微生物。二、病原微生物实验室的分级级别 处理对象一级 对人体、动植物或环境危害较低，不具有对健康成人、动植物致病的致病因子 。二级对人体、动植物或环境具有中等危害或具