开题报告09-05-15(范本)

广州中医药大学中药学院本科毕业论文（设计） 开 题 报 告 题目： 不同炮制方法对当归阿魏酸含量的影响 年级专业 05 中药学（临床中药学方向） 学 号 姓 名 指导教师 岑丽华 教师单位 广州中医药大学中药炮制教研室 填表日期 2009 年 2 月 21 日 1 中 药 学 院 本 科 毕 业 论 文 （ 设 计 ） 开 题 报 告 学生 姓名 学号 年级 专业 05 级 中药学（临床中药学 方向）专业 指导 老师 岑丽华 学历 职称 本科 副教授 工作 单位 广州中医药大学 论文 题目 不同炮制方法对当归阿魏酸含量的影响 选题依据与研究意义： (一)选题依据 中药当归是伞形科当归 Angelica Sinensis (Oliv.) Diels 的干燥根 1。当归 的炮制品有当归（全当归） 、当归头、当归身、当归尾、酒当归、土炒当归、当归 炭 2。由于当归不同炮制品的功效不同,因而在临床上的应用也各不相同，如酒当归， 可升腾发散，可助药势，使当归作用趋势“向上” 、 “向外”，增强活血止痛等功效，可 用于经闭痛经、风湿痹痛、跌打损伤等。土炒当归可增强健脾作用，而且可有效防 止脾虚患者引起滑肠之弊，临床上常用于健脾止泻。当归炭能产生止血止痢作用， 和血止血，多用于崩中漏下。现代研究表明，当归炮制前后化学成分的变化使当归 的药理作用也有所不同。由于不同炮制方法直接影响着当归有效成分的含量变化， 也影响到当归的功效，使药理作用发生改变，所以研究当归的炮制品是很有必要的， 本研究主要以中国药典规定的含测指标为标准,采用紫外分光光度法测定当归不同炮 制品中有效成分阿魏酸的含量。 （二）研究意义 1.通过测定当归不同炮制品中阿魏酸的含量，比较当归不同炮制品中阿魏酸的变 化。 2.通过对当归不同炮制品的研究，为临床选用合适的当归炮制品提供参考。 2 文献综述（结合阅读的参考文献，概述国内外研究现状及发展趋势，要求不少于 1200 字）： 中药当归是伞形科当归 Angelia Sinensis (Oliv.) Diels 的干燥根。主产于 甘肃东南部岷县（秦州） ，产量高，质量好，其次则为陕西、四川、云南等地。本 品性甘、辛，味温，归肝、心、脾经 1。其干燥的贮藏根是我国一味常用的中药材， 要用历史悠久，历代草本均有记载，始记于神农本草经谓之“当归味温，主呃 逆上气”被列为中品 3，有补血、活血、调经、止痛、润肠之功效 4，用于血虚萎黄， 眩晕心悸，月经不调，经闭痛经，虚寒腹痛，肠燥便秘，风湿痹痛，跌扑损伤，痈 疽疮疡，为医家常用，素有“十方九归” 之称 5。酒当归活血通经，用于经闭痛经， 风湿痹痛，跌扑损伤。由于当归对妇女的经、带、胎、产各种疾病都有治疗效果， 所以中医称当归为“ 女科之圣药 ”。 由于其在方剂中的应用频度甚高，如在清著 汤头歌诀中就有 53 种，在日本普通汉方中有 56 种，当归的药用价值吸引 了不少国内外许多学者通过多学科相结合来研究当归，获得不少当归有效成分及其 功能主治的认识 6。 目前国内外有当归的研究相当丰富，内容涉及广泛，如品种鉴别 、成分分析 、理化鉴别 、药理药效、炮制品等研究。本文在对当归国内外大量的参考文献和研 究资料进行系统全面地分析和调研的的基础上，对相关研究内容进行综述。 1 当 归 的 化 学 成 分 到 目 前 为 止 ， 从 植 物 当 归 中 已 分 得 多 种 类 别 的 化 学 成 分 ， 其 中 主 要 涉 及 藁 苯 内 酯 类 及 其 异 构 物 、 香 豆 素 类 、 黄 酮 类 以 及 有 机 酸 类 等 7。 其中挥发油中除含有少量香荆芥酚、苯酚、对甲苯酚、间乙苯酚、别罗勒烯、 正丁烯基酰内酯、-罗勒烯-X-棕榈酸、邻苯二甲酸酐等外，以藁苯内酯为其主要 成分 8。近年来对当归中香豆素成分的研究增加，从当归的根及根茎中分得 19 种 6-或 8-脂代 7-氧香豆素和 13 种二氢呋喃香豆索衍生物、 2 个角型呋喃香豆素、3 个线型呋喃香豆素以及 3 个吡喃香豆素，部分香豆素证实了对 P-388 细胞株具有显 著的细胞毒活性 9。从当归中分离出 3 个查尔酮衍生物；而黄酮苷有木犀草素 -7-O- -D 葡萄糖苷（luteolin-7-O-D-glucoside）以及木犀草素 -7-O-芦丁糖苷 （luteolin- 7-O-rutinoside） 。文献报道，当归的水浸膏中，检出有 19 种氨基酸， 占浸膏总量的 6.63，其中精氨酸的含量最大，谷氨酸次之 0.72，其中有赖氨 酸、吉氨酸、色氨酸、蛋氨酸等 8 种为人体所必需但又不能自行合成的氨基酸 10。 此外，当归还含有钾、钠、钙、镁、铝、硅、磷等 23 种微量元素，其中 16 种是人 体所必需 11。 有 机 酸 中 的 阿 魏 酸 是 较 早 被 分 离 和 鉴 定 出 的 当 归 有 效 成 分 ， 也 是 当 归 有 机 酸 部 分 的 主 要 成 分 之 一 ， 关 于 阿 魏 酸 的 研 究 报 道 较 多 。 当 归 的 有 机 酸 部 分 还 含 有 丁 二 酸 、 烟 酸 、 香 草 酸 、 二 十 四 烷 酸 、 棕 榈 酸 等 。 阿 魏 酸 含 量 基 本 与 挥 发 油 一 致 ， 不 同 药 用 部 位 含 量 不 同 。 其 中 归 尾 最 高 ， 归 身 次 之 ， 归 头 最 低 6。 在 当 归 所 有 化 学 成 分 中 ,中 国 药 典 唯 一 对 阿 魏 酸 (C16H10O4)的 含 量 作 了 规 定 ， 不 得 少 于 0.050 1。 最 近 还 有 关 当 归 化 学 成 分 指 纹 图 谱 的 研 究 ， 吴 燕 燕 12等 人 研 究 表 明 当 归 全 归 与 饮 片 化 学 成 分 存 在 较 大 差 异 ， 并 提 示 为 保 持 药 材 成 分 的 稳 定 ， 当 归 最 3 好 以 全 归 的 形 式 流 通 ， 同 时 应 该 注 意 当 归 的 贮 藏 方 式 及 年 限 。 2 阿 魏 酸 的 现 代 研 究 阿 魏 酸 是 当 归 的 有 效 成 分 ， 药 理 研 究 表 明 阿 魏 酸 有 很 好 的 抗 氧 化 活 性 ， 能 够 清 除 自 由 基 、 调 节 免 疫 、 保 护 神 经 元 、 降 血 脂 和 改 善 动 脉 粥 样 硬 化 、 抗 血 栓 、 抗 心 肌 缺 血 及 抗 肝 损 伤 的 作 用 13。 阿 魏 酸 是 阿 魏 、 川 芎 、 当 归 、 升 麻 、 木 贼 等 多 种 中 药 的 有 效 成 分 之 一 ， 其 在 中 药 研 究 中 应 用 较 多 ， 由 于 其 性 质 稳 定 ， 在 一 些 中 成 药 的 研 究 中 常 作 为 一 种 指 示 性 化 合 物 。 阿 魏 酸 作 为 传 统 活 血 化 淤 中 药 当 归 、 川 穹 等 的 主 要 有 效 成 分 ， 其 钠 盐 阿 魏 酸 钠 （ sodium ferulate， SF） 是 一 类 新 的 非 肽 类 内 皮 素 （ ET） 受 体 拮 抗 剂 , SF 可 桔 抗 ET 引 起 的 血 管 收 缩 、 增 加 一 氧 化 氮 （ NO） 的 合 成 、 抗 凝 血 ， 对 心 血 管 系 统 的 作 用 广 泛 ， 可 影 响 心 血 管 疾 病 的 病 理 生 理 过 程 14。 临 床 研 究 发 现 ， 阿 魏 酸 钠 能 降 低 冠 心 病 心 绞 痛 患 者 HSCRP、 TNF- 、 IL- 6 的 水 平 ， 对 冠 心 病 患 者 有 治 疗 作 用 15。 其 滴 眼 液 能 有 效 地 抑 制 角 膜 新 生 血 管 的 生 长 ， 其 抑 制 血 管 内 皮 生 长 饮 子 的 表 达 可 能 是 阿 魏 酸 钠 抑 制 角 膜 新 生 血 管 生 成 的 一 个 重 要 机 制 16。 刘 保 新 17等 人 通 过 研 究 ， 探 讨 当 归 、 阿 魏 酸 钠 关 节 腔 注 射 对 大 鼠 骨 关 节 炎 （ OA） 的 疗 效 ， 发 现 当 归 、 阿 魏 酸 钠 关 节 腔 注 射 治 疗 大 鼠 骨 关 节 炎 均 有 疗 效 ， 其 作 用 具 有 剂 量 依 赖 性 ， 阿 魏 酸 是 当 归 注 射 液 治 疗 骨 关 节 的 有 效 单 体 成 分 。 王阔 18通过对 64 例早期糖尿病肾病患者随机分为观察组 32 例和对照 组 32 例，观察组在对照组治疗的基础上给予阿魏酸钠 04 加入生理盐水 250ml，1 次/日，共 12 周，观察两组治疗前后小组间相关指标的变化。结果：观察 组患者 24h 尿白蛋白排泄(VAER)，血 2-微球蛋白、血清、尿素氮及 c-反应蛋白均 较治疗前明显下降（P0. 01 或 P0.05） ，且与对照组治疗前后相比差异亦有显著性 （P0. 05） ，无严重不良反应。结论：阿魏酸钠对早期糖尿病肾病患者的肾脏病变 有部分保护作用。 如 今 ， 天 然 的 自 由 基 清 除 剂 阿 魏 酸 的 研 究 越 来 越 受 到 重 视 ， 阿 魏 酸 及 其 衍 生 物 的 实 验 研 究 显 示 了 其 良 好 的 抗 氧 化 作 用 ， 阿 魏 酸 与 金 属 螯 合 剂 联 合 应 用 有 望 成 为 抗 AD 的 重 要 药 物 之 一 19， 并且，有关研究显示阿魏酸具有部分的 1-肾上腺 素能受体阻断作用，并具有 2-受体激动作用 20。另 外 ， 阿 魏 酸 也 是 一 种 良 好 的 食 品 添 加 剂 ， 可 以 吸 收 紫 外 线 ， 也 可 以 用 于 化 妆 品 行 业 21。 3 当 归 的 药 理 药 效 研 究 对 血 液 系 统 方 面 ， 当 归 具 有 促 进 骨 髓 造 血 功 能 ， 抑 制 血 小 板 聚 集 、 抗 血 栓 形 成 ， 降 血 脂 、 抗 动 脉 粥 样 硬 化 的 作 用 ； 对 心 血 管 系 统 方 面 ， 当 归 具 有 抗 心 肌 缺 血 ， 抗 心 肌 梗 死 后 纤 维 化 ， 抗 心 律 失 常 ， 扩 张 血 管 、 降 血 压 的 作 用 ； 当 归 对 动 物 子 宫 平 滑 肌 方 面 ， 具 有 兴 奋 和 抑 制 的 双 重 作 用 ， 能 够 增 强 机 体 非 特 异 性 和 特 异 性 免 疫 功 能 ； 除 此 之 外 ， 当 归 还 具 有 抗 辐 射 、 抗 损 伤 、 保 肝 等 作 用 22。 而 这 两 年 ， 不 少 人 对 当 归 的 药 理 药 效 进 行 研 究 ， 也 仍 然 有 了 新 的 发 现 。 魏 会 平 等 23从 微 循 环 、 血 液 流 变 学 、 器 官 血 流 量 等 角 度 ， 探 讨 当 归 对 大 鼠 弥 散 性 血 管 内 凝 血 血 液 动 力 学 的 影 响 ， 结果：DIC 时，微循环明显障碍，表现为微 4 血管收缩、微血流变慢和血细胞聚集，APS 治疗后，微血管明显扩张，其流态和血 细胞聚集积分值明显低于 NS 组（P0 .05） ；APS 和 NS 组均能改善胃、肠、肝的微 区血流量，但前者效果优于 NS（P0 .05） ；APS 治疗后，血黏度、血小板黏附率和 聚集率明显低于 NS 治疗组，且红细胞变形能力明显增强（P0.05） 。结论：APS 通过扩张微血管、增加器官血流量、降低血粘度和抑制血小板聚集作用，干预 DIC 的转归。 冯 金 彩 24等 通 过 研 究 当 归 注 射 液 对 大 鼠 心 肌 缺 血 再 灌 注 损 伤 后 CDK2 蛋 白 的 表 达 ， 结 果 ： 正 常 对 照 组 心 肌 细 胞 内 CDK2 蛋 白 表 达 弱 ； 当 归 治 疗 组 心 肌 细 胞 内 CDK2 蛋 白 表 达 弱 ， 假 手 术 组 心 肌 细 胞 内 CDK2 蛋 白 表 达 强 ， 缺 血 再 灌 注 损 伤 组 CDK2 蛋 白 表 达 强 。 结 论 ： 当 归 注 射 液 对 大 鼠 缺 血 再 灌 注 损 伤 心 肌 细 胞 的 增 殖 起 着 重 要 的 作 用 。 龚 梦 鹃 等 25通过环磷酰胺造小鼠血虚模型，给予当归水煎液 2 周后，对血虚小 鼠体重、外周血象、游泳时间、运动后血乳酸和尿素氮的影响，结果：当归水煎液 能明显增加血虚小鼠体重、升高红细胞总数、白细胞总数和血红蛋白含量； 6g/（kgd）的当归水煎液组还能显著延长游泳时间、降低运动后的血乳酸和尿素 氮。结论：当归水煎液能提高血虚小鼠的抗疲劳作用。 杜小丽等 26通过采用外周血 WBC、骨髓单个核细胞计数，流式细胞术检测外 周血和骨髓 Sca-1+细胞率以及骨髓 MNC 和 Sca-1+细胞表面 CD49d（VLA-4 的 链） 、CD44 表达情况，发现：APS 可能通过降低造血细胞表面的某些粘附分子的表达 而产生动员效果。 4 当 归 在 复 方 中 的 应 用 与 研 究 4.1 当 归 补 血 口 服 液 龚 继 勇 等 27以昆明种小鼠 S180 肉瘤模型，当归补血口服液灌胃，经 X 射线照 射治疗，观察各组小鼠存活时间、肿瘤大小及白细胞计数变化。结 果 加 昧 当 归 补 血 汤 各 剂 量 组 与 单 纯 放 疗 组 相 比 ， 存 活 时 间 延 长 ， 高 剂 量 联 合 放 疗 组 抑 瘤 率 达 47.22 ， 白 细 胞 计 数 优 于 单 纯 放 疗 组 （ P0.05） 。 结 论 ： 当 归 补 血 口 服 液 对 X 线 照 射 治 疗 肿 瘤 具 有 明 显 的 增 效 作 用 。 4.2 当 归 补 血 汤 刘 清 君 等 28的 研 究 发 现 ， 当 归 补 血 汤 超 滤 膜 提 取 物 能 够 明 显 促 进 CAM 血 管 新 生 ， 且 作 用 与 剂 量 呈 正 相 关 ， 提 示 当 归 补 血 汤 超 滤 膜 提 取 物 在 治 疗 缺 血 性 疾 病 方 面 可 能 与 其 促 进 血 管 新 生 有 关 ； 当 归 补 血 汤 对 机 体 血 液 免 疫 系 统 有 调 节 作 用 ， 可 减 轻 化 疗 药 物 对 小 鼠 红 细 胞 免 疫 黏 附 功 能 的 损 伤 29； 陈 园 等 30还 证 明 了 无 论 是 当 归 补 血 汤 还 是 单 味 药 ， 都 有 抗 肝 纤 维 化 作 用 ； 张 晓 莉 等 31的 研 究 报 告 还 指 出 ， 大 剂 量 当 归 补 血 汤 对 免 疫 抑 制 小 鼠 的 隐 孢 子 虫 感 染 有 明 显 的 预 防 作 用 ， 可 提 高 机 体 免 疫 功 能 ； 4.3 当 归 四 逆 汤 何 堂 钧 等 32通 过 将 80 例 患 者 随 机 分 为 对 照 组 （ 口 服 强 的 松 ， 每 日 1mg/kg 体 重 晨 起 顿 服 ） 和 治 疗 组 （ 在 对 照 组 治 疗 的 基 础 上 加 服 当 归 四 逆 汤 化 裁 ， 每 日 1 5 剂 ， 水 煎 服 ） ， 每 组 各 40 例 。 2 组均于治疗 8 周后予复查血脂、血液流变学指标， 观察其血脂、血液流变学指标的变化。研究发现：当归四逆汤联合强的松治疗肾病 综合征高粘血症有较好疗效。 4.4 当 归 芍 药 散 田 荣 波 等 33对 当 归 芍 药 散 进 行 了 研 究 ， 发 现 当 归 芍 药 散 可 以 促 进 MLT 的 分 泌 ， 改 善 学 习 记 忆 能 力 。 去 除 松 果 体 后 该 方 药 的 作 用 减 弱 ， 当 归 芍 药 散 促 进 松 果 体 功 能 是 其 抗 衰 老 作 用 的 机 制 之 一 。 4.5 当归饮子 肖红丽 34通过对当归饮子治疗慢性荨麻疹的疗效及对患者血清白三烯 B4 的抑 制作用研究，采用单盲随机对照法，将合格病例随机分为当归饮子、咪唑斯汀、孟 鲁司特、氯雷他定四组，比较各组治疗慢性荨麻疹的近期疗效、复发率，及各组患 者治疗前后血清中白三烯 B4 的水平，发现：当归饮子治疗慢性荨麻疹的疗效显著， 复发率低，对迟发相重要的炎症介质白三烯 B4 的抑制作用是其药效学基础之一。 4.6 血府逐瘀汤 谢 辉 等 35采用高脂饲料复制动脉粥样硬化模型，探讨血府逐瘀汤及其拆方对动 脉粥样硬化兔血脂、血流动力学的影响，血脂、血流动力指标的改变，研究活血、 行气治法对动脉粥样硬化病理的影响，观察各组血脂、血流动力指标的改变。通过 研究，发现血府逐瘀汤及其拆方能不同程度的调节动脉粥样硬化兔的血脂代谢，改 善血流动力状态，且血府逐瘀汤作用明显优于其拆方组，并提示血府避瘀汤调节血 脂代谢、改善血流动力状态的功效是活血、行气的综合作用。 5 当 归 的 炮 制 及 有 效 成 分 的 含 量 测 定 在 炮 制 方 面 ， 中 国 药 典 05 版 本 收 录 了 当 归 的 几 种 炮 制 品 。 全 当 归 其 质 柔 韧 ， 香 气 浓 郁 ， 其 味 甘 辛 微 苦 ， 具 有 活 血 补 血 作 用 ， 如 治 疗 血 虚 体 亏 的 当 归 补 血 汤 ； 当 归 头 有 止 血 而 上 行 之 效 ； 当 归 身 遇 有 养 血 而 守 中 之 功 ； 当 归 尾 具 有 破 血 而 下 行 之 效 ； 当 归 酒 炙 后 ， 增 强 了 活 血 、 补 血 、 调 经 的 作 用 ， 如 用 于 治 疗 血 虚 血 滞 ， 月 经 不 调 的 名 方 四 物 汤 、 治 疗 风 湿 痹 痛 的 蠲 痹 汤 ； 土 炒 后 ， 既 能 补 血 ， 又 能 不 致 滑 肠 ， 如 用 于 治 血 虚 便 溏 、 腹 中 时 痛 和 中 焦 虚 寒 、 腹 痛 ； 炒 炭 后 ， 以 止 血 和 血 为 主 ， 如 用 于 治 崩 中 漏 下 ， 亦 治 月 经 过 多 36。 二 十 年 来 ， 不 少 人 研 究 过 当 归 各 种 炮 制 品 中 的 有 效 成 分 含 量 变 化 。 应用现 代仪器分析方法，有人对不同产地的当归头、身、尾三部分中主要成分进行了含量 测定，实验结果初步表明，当归头、身、尾的阿魏酸含量均有一定差异，阿魏酸的 含量均以归尾最高，归身次之，归头最低，归尾比归头高 202212 37。早 在二十年前，高逢喜 38等人就对当归生品和炮制品进行了阿魏酸的含量测定，发现 阿魏酸含量有一定差异：生 当 归 0.0529 ， 酒 当 归 0.0320 ， 清 炒 当 归 0.0422 ， 焦 当 归 0.0371 ,当 归 碳 0.0101 。 并且隧炮制温度升高，阿魏酸含 量降低，以当归炭最明显，可能与当归炭化后，鞣质易于浸出对阿魏酸的提取有一 定干扰有关。随后，于少军 39等人通过对当归水溶性成分那个分析，测定了阿魏酸 的含量为生 当 归 0.067 ， 酒 当 归 0.064 ， 土 炒 当 归 0.056 ， 当 归 碳 6 0.049 。 当 归 酒 制 后 水 溶 物 增 高 ， 阿 魏 酸 几 乎 无 降 低 ， 收 敛 成 分 鞣 质 最 少 。 其 土 制 品 浸 出 液 颜 色 由 浅 黄 变 为 棕 色 ， 鞣 质 为 生 品 的 1.4 倍 ， 且 有 益 元 素 Fe、 Ni、 Cu、 Mn、 Zn 的 含 量 显 著 升 高 。 制 炭 后 只 鞣 质 成 分 升 高 为 生 品 的 2 倍 其 他 成 分 都 成 倍 降 低 。 最 近 ， 宋金春 40等人的 有 关 研 究 指 出 ， 阿 魏 酸 含 量 依 次 排 列 为 生 当 归 (0.1022 ) 酒 当 归 (0.1018 ) 当 归 炭 (0.0519 )； 藁 苯 内 酯 的 含 量 依 次 排 列 为 当 归 炭 酒 当 归 生 当 归 。 生 品 与 炮 制 品 之 间 ， 阿 魏 酸 含 量 有 一 定 的 差 异 ， 并 且 随 着 炮 制 温 度 升 高 而 降 低 ， 生 品 中 阿 魏 酸 含 量 最 高 ， 当 归 炭 中 含 量 最 低 。 从 水 溶 性 成 分 来 看 ， 当 归 酒 炒 后 水 溶 物 增 高 ， 阿 魏 酸 几 乎 无 降 低 ， 收 敛 成 分 鞣 质 最 少 。 制 炭 后 ， 阿 魏 酸 含 量 显 著 降 低 ， 可 能 与 当 归 炭 化 后 鞣 质 易 于 浸 出 对 阿 魏 酸 的 提 取 有 一 定 的 干 扰 有 关 ， 水 溶 性 和 醇 溶 性 成 分 均 有 下 降 。 炭 化 后 ， Ni、 Ca 含 量 增 加 ， 其 他 元 素 均 有 下 降 。 Ca 对 凝 血 过 程 起 重 要 作 用 ， Ni 除 有 益 血 生 血 外 ， 还 对 凝 血 过 程 中 的 易 变 因 子 稳 定 性 也 有 作 用 。 6 结 语 本 文 综 述 了 当 归 药 材 炮 制 方 法 、 有 效 成 分 及 其 含 量 测 定 、 在 复 方 中 的 应 用 及 药 理 作 用 。 根 据 现 代 研 究 ， 许 多 人 对 当 归 及 其 相 关 的 研 究 做 了 大 量 的 工 作 ， 但 在 当 归 的 研 究 方 面 还 存 在 一 些 问 题 ： 尽 管 关 于 中 药 当 归 炮 制 的 研 究 很 多 ， 但 是 对 于 当 归 烘 制 的 有 关 报 道 却 很 少 ， 且 对 于 当 归 用 黄 酒 抑 或 白 酒 来 炮 制 ， 对 有 效 成 分 的 影 响 及 临 床 的 疗 效 改 变 与 否 却 并 不 多 见 。 本 实 验 用 紫 外 分 光 光 度 法 测 定 当 归 不 同 炮 制 品 中 阿 魏 酸 的 含 量 ， 包 括 当 归 、 酒 当 归 （ 分 为 黄 酒 和 白 酒 ） 、 土 当 归 、 当 归 碳 及 其 各 自 的 烘 制 品 ， 为 选 择 当 归 炮 制 品 提 供 直 接 的 科 学 依 据 ， 也 为 临 床 选 用 正 确 的 当 归 炮 制 品 提 供 参 考 。 7 课题的研究内容、思路、方法及手段： 1 研究内容 （1）按照 2005 年版中华人民共和国药典(一部)和中药炮制学列出的 方法对当归进行炮制，包括酒炒当归、土炒当归、当归碳； （2）按照酒当归的炮制方法，分别用黄酒、白酒炒炙当归； （3）参考中药炮制学对中药材进行烘制的方法，对当归各炮制品进行烘 制，包括黄酒烘、白酒烘、土烘； （4）用紫外分光光度法测定不同炮制品中阿魏酸的含量。 （5）比较不同炮制方法对当归阿魏酸含量的影响 2 研究思路 通过查阅当归的有关书籍和文献资料，在实验室对当归进行各种炮制，用紫外 分光光度法测定阿魏酸的含量，并进行对比分析。 3 研究方法及手段 31 当归的炮制 （1）通过参照 2005 年版中华人民共和国药典(一部)和中药炮制学课 本，设置 8 份当归炮制品（每份 20g） ，用不同的方法炮制，具体设置见表 1 所示。 表 1 当归炮制品实验组设计图 编号 炮制品 辅料 炮制方法 炮制时间 1 2 3 4 5 6 7 8 当归 黄酒炒当归 黄酒烘当归 白酒炒当归 白酒烘当归 土烘当归 土炒当归 当归炭 无 黄酒 黄酒 白酒 白酒 赤石脂 赤石脂 无 已购买饮片，不再进行炮制。 放入饭盒，加入黄酒 3ml（2ml 黄酒+1m 水） ， 拌匀，稍闷，文火炒至表面深黄色（不粘手） ， 取出，晾干。 放入饭盒，加入黄酒 3ml（2ml 黄酒+1m 水） ， 拌匀，稍闷，闷润后置烘箱（45） ，烘干， 不粘手为止。 放入饭盒，加入白酒 3ml（2ml 白酒+1m 水） ， 拌匀，稍闷，文火炒至表面深黄色（不粘手） ， 取出，晾干。 放入饭盒，加入白酒 3ml（2ml 白酒+1m 水） ， 拌匀，稍闷，闷润后置烘箱（45） ，烘干， 不粘手为止。 取 1 搪瓷盆，铺上细净黄土，再平铺 1 份当归， 并将黄土按压铺好在当归表面，使之挂土，挂 土后置烘箱（45） ，烘干，变硬。 黄土中火炒至滑利状态，加入生当归片炒至饮 片挂土，取出，晾凉，筛去余土。 取 1 份生品，中火炒至表面微黑，存性，取出 晾凉。 T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 注：T 1 为普通干燥时间，不炮制；T 2 、T 4 、T 6 、T 8 为炒制时间，T 3 、T 5 、T 7 为烘制 8 全称时间。 （2）比较各炮制品的性状 （3）粉碎、过筛 各编号药材均用粉碎 4min，并过 40 目筛，装进贴有标签纸（注明炮制品种） 的标签袋，置干燥器中备用。 32 当归炮制品中阿魏酸的含量测定 （1）对照品溶液的制备 取阿魏酸对照品 5 mg，精密称定，置于 50 ml 棕色瓶中，加甲醇溶解并稀释至 刻度，摇匀，即得（每 1ml 含阿魏酸 0.5mg） 。 （2）供试品溶液的制备 考察不同溶媒、提取时间、提取方法对阿魏酸含量的影响： 拟采用甲醇、乙醇作溶剂； 拟考察以下时间：15min、30min、45min； 根据文献报道，拟考察以下提取方法：超声处理、加热回流提取。 如以甲醇作溶剂提取 30min 为例： a以甲醇作溶剂，加热回流提取 30min：取本品粉末约 0.2g ，精密称定，置 具筛锥形瓶中，加甲醇 20ml，密筛，称定重量，加热回流 30min，放冷，再称定重 量，加甲醇补足减失的重量，摇匀，静置，过滤。精密取 1ml 续滤液，至于 10ml 具筛容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。取上清液用微孔滤膜（0.45m ）滤过， 取续滤液，即得。 b以甲醇作溶剂，超声提取 30min：取本品粉末约 0.2g ，精密称定，置具筛 锥形瓶中，加甲醇 20ml，密筛，称定重量，超声处理 30min，放置至室温，再称重， 补足甲醇减失的重量，摇匀，静置，过滤。精密取 1ml 续滤液，至于 10ml 具筛容 量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。取上清液用微孔滤膜（0.45m ）滤过，取续 滤液，即得。 （3）最大吸收波长的选择 精密吸取阿魏酸对照品溶液 2.0ml，置于 50ml 棕色瓶中，加甲醇稀释至刻度， 摇匀，放置 15min，测定吸光度。阿魏酸的吸收峰在 313nm，参考文献，考察实验 所用的紫外分光光度仪对阿魏酸的最大吸收波长，选择 298326nm。结果，阿魏酸 的最大吸收波长为 Xnm。 （4）标准曲线制备：避光操作，精密吸取阿魏酸对照品溶液 0.0ml、1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml，分别置于 50ml 棕色瓶中，各加甲醇稀 释至刻度，摇匀，放置 15min，以第一瓶为空白，用紫外分光光度计在 X nm 波长 处测定其吸光度。以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。 （5）样品含量测定 9 研究方案的可行性分析和已具备的实验条件： 1 可行性分析 现代研究已有许多用不同方法对当归药材炮制（包括当归、当归头、当归身、 当归尾、酒当归、土炒当归、当归碳）后进行鉴别和有效成含量测定的相关报导， 但在酒制方面，多数研究都选择用黄酒来炮制，较少对黄酒和白酒炮制品的有效成 分含量进行比较分析，而且对于用烘法来炮制当归也并不多见。本实验参考 2005 版中国药典 、 中药炮制学以及大量相关的文献，结合实际的实验条件，设置 出包括了用黄酒、白酒、土三种辅料炒制和烘制以及炒碳共 8 种炮制品，并进行阿 魏酸的含量测定，方法可行。 2 已具备的实验条件 （1）主要仪器：UNICO UV-200 紫外分光光度计（尤尼可上海有限公司） ； EHUI 乐辉牌 600w/1500w/2100w/型锅炉；DFY-200 200g 摇摆式高速中药粉碎机(温 岭市大德中药机械有限公司)；Sartorius BP211D Max 210 d=0.01mg、SHIMADZU AUY120 Max 120 d=0.1mg 型电子天平；DHG-9076A 型电热恒温鼓风干燥箱（上 海精宏试验设备有限公司） ；KQ2200B 超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司） ； 三圈牌架盘药物天平（中国上海光正医疗仪器有限公司）等，以及其他实验所需的 仪器（实验室已备有） 。 （2）实验场所：广州中医药大学中药炮制实验室。 研究目标、主要特色及工作进度： 1 研究目标 本 实 验 旨 在 测 定 当 归 不 同 炮 制 品 中 阿 魏 酸 的 含 量 ， 包 括 生 当 归 、 酒 当 归 （ 分 为 黄 酒 和 白 酒 ） 、 土 当 归 、 当 归 碳 及 各 烘 制 品 （ 共 8 种 ） 的 测 定 ， 为 选 择 当 归 炮 制 品 提 供 直 接 的 科 学 依 据 ， 也 为 临 床 选 用 符 合 的 当 归 炮 制 品 提 供 参 考 。 2 主要特色： 在传统的当归炮制基础上，加上用白酒作为辅料的炮制品，以及各种辅料的烘 制品，更具有参考价值。 3 工作进度： 2008 年 9 月 查阅文献，设计实验方案 2008 年 10 月 收集样品，购买对照品及各种实验所需的试剂 2008 年 11 月-2009 年 3 月 炮制样品，测定炮制品中阿魏酸的含量 2009 年 4 月-2009 年 5 月 整理实验数据和资料，撰写论文 10 主要参考文献（注明作者、文章题目、杂志、年、卷、期、页，不少于 15 篇）： 1中华人民共和国药典2005 年版第一部，国家药典委员会编北京：化学工 业出版社 2 龚千锋主编.中药炮制学M北京：中国中医药出版社，2007：176-178 3陈江弘，杨崇仁当归属植物的研究进展J天然产物研究与开发， 2004，16（5）：359-365 4黄兆胜主编中药学 M人民卫生出版社2005：450-451. 5MA R J，WANG Q， CHEN X L，et alResearch and development of Angelica sinensis(Oliv) DielsJ Chin Trudit Herb Med(中草药)，2002，33(3)：280282 6陈慧珍当归的研究进展.海峡药学，2008，20（8）：83-85 7宋萍萍，孙明毅，徐增莱等三种当归属植物的化学成分研究J中草药， 2007，38（6）：833835 8阮健，王凤山，车鑫等当归挥发油的 GC 指纹图谱研究J中草药， 2006，37（9）：1338-1341 9刘晖，倪京满当归地上与地下部分挥发油的比较研究J西北药学杂志， 2004，19（3）：105-107. 10黄伟晖，宋纯清当归化学成分研究J药学学报，2003，38（9）：680- 683. 11王海燕，陈汝贤，许鸿章当归化学成分研究J中国中药杂志， 1998，23（3）：167-169. 12吴燕燕，尚明英，蔡少青当归的化学成分指纹图谱J药学学报， 2008，43(7)：728-732 13黄伟晖，宋纯清当归的化学和药理学研究进展J中国中药杂志， 2001，26(3)：147-151 14丁 玲 岩 阿 魏 酸 钠 与 心 血 管 疾 病 J 国 际 心 血 管 杂 志 ， 2008， 35(4)： 242-243 15林 萍 ， 胡 芸 阿 魏 酸 钠 对 冠 心 病 心 绞 痛 患 者 炎 性 细 胞 因 子 的 影 响 J 中 国 中 医 药 科 技 ， 2008， 15(5)： 327 328 16陈 丽 华 ， 江 萍 ， 罗 彤 等 阿 魏 酸 钠 对 大 鼠 角 膜 新 生 血 管 的 抑 制 作 用 研 究 J 眼 科 研 究 ， 2008， 26(7)： 526-529 17刘 保 新 ， 陈 廖 斌 ， 汪 晖 等 当 归 阿 魏 酸 钠 局 部 用 药 治 疗 骨 关 节 炎 的 实 验 研 究 J 中 国 矫 形 外 科 杂 志 ， 2008， 16 (17)： 1316-1318 18王阔阿魏酸钠对老年性早期糖尿病肾病的影响J 新 医 学 导 刊 ， 2008， 7(1)： 38-39. 19曾 小 耘 ， 郑 锦 鸿 阿 尔 茨 海 默 病 的 氧 应 激 与 阿 魏 酸 的 抗 氧 化 作 用 J 国 际 医 药 卫 生 导 报 ， 2008， 14(6)： 113-118 20Wu BN，Huang YCA highly selective betal-adrenergic blocker with partial beta2-agonist activity derived from ferulic acid，an active component of Ligusticum wallichii FranchJ.Cardiovasc Phmacol，1998，31(5)：750-757. 11 21金汝城，李贵文，马素丽等当归中阿魏酸提取工艺的优化