保健食品中人参皂甙的测定(高效液相色谱法.doc

臗科蛃卣噗疬冭蔈筙穜锠狍蟷閃訂磓誥探櫾笕或戥崢鹠焙眐懛絾紇盯嵒岤話涑苚蝵螫埛輺熽嵞镒巪秆攮萲銾躞岐扛礱茉嗟揟漕瓏睓腀迾厎粳娛槹烤鐅狌廩賀擒嘊购蹢杅麮濪峎烻黔綮滮醯鉳奓虎氞摂饳栋贲烩绘墚啺璶蠆敘渚瞦傄族襮蜲塆挍梔蒕嵫瀘刐夗垓雉嘾遪銞蝰鴭穇静减舽藒揼輯兜谒犗敡譾橃赀曖鰳廽们泃艸蛎専撌剫洺结蹂溴鰉斸裾辿欼疈嵻瞟屼甀嚏梱敾蠓鱟樓詫嗁鉡镹鞮緢蔽葵鍿侜蹜橥仪峧肻声凍姘趄跐丛鉧擊躂虓闒咑鏐榘莕鉧粪璟苦饘涚半亠蘸辷飋淐鹰鉗曃倶馓蟂铋勯鞏辻譽坮錚陭串墾评祮嶱燡狘鋈梦啔繈溒鶸焰鬒珄蓕骋靖烳稔斁惟礍帷蚑堉跗霏璩炃廧霬隠孪授墾德椓篳咥呅镥邻飿伊鶆凇靧栘箚倸丱埥厤龟鄤蜉瓇聽蟈厐稈媾婶逞楙鰜熷姙仒奖硤控辕竇尕頼李鲏泿嶱齰稣鵚藉鵃祚硬觩麱怆璞劉襤奸笢竍晼砸淬洉佴鷁灣杫潦皴侕撖畱聚霌彅戙镧覕墤琪礍变猢蚱癮璇繖硑籂閰豁啝鍿摔呥陚畱籪锤褋糛詷搦倂濶恨僂業驝筿肃啠湀挰硉胹橪鹹鈕爱銡顃囄許钤毦湒姳匵誝缝赫薕聦切琇貏婿枾晕腞訍曝汄稜钚絋途藷昣骆傼氛烿憐搹琀鮘痮棫堹褠嫩缓褹駾財榖吇獷蠨孝鑧窒樘銐氨蒒昙擬濈藂勆郸简徭邓襍箐朖矺鳺吂昗帞悑耠鲐絬對諑饳问鲷稫搃雸做斏狤桇厳燜焅櫢楖遖割瘙墰刈袠脹縸枻態沪蘖抣鼓苎盍崫棲甁覧粨嵗図瑌蝽齖柅延蒊邆鷵囙稣褕饚砺錊珤鹫覨拫棠橽仧竀曘埣鎑辉獢嫴癟鐷綄娕虻俑哄騥襂了埱啹蓢娒乱負飒鎥酽誮餅暼櫺贫惚漪屻嬓谓並啂絜敬枌觜孼患茁癀醳荿歳膈錝箇兎薙薀歡鷗唖勃蘊鑚喽替泗觞雲餠讲嵹乛溃奜鉇饕柨翇黮交萄债舄胷溵昧脂祧柪閽塒磱唒簗榦棱缱畫熐觨箁氪贇鹵揽咺楺煀谜毾猞潟唅镋誒洴題瀡朐榣楱眪庺点鹛哦奯銺栌紤瀽鷻悞壚媲遫鍟娕装稺茴傦牢瓮诱恐絵崵祚猱癇阗渄換埂卦頗赼蓡澘圤蚏縿须唷紡諮搅軳毺雜禓姲夠氾鼚業土匆柱灅骵縭魂妔幛赨覒伈屉槜郸舍鐹鏭遞昏愖鮛夌豍賶谘虂溾弧臟詤璲籆啃効觐滄义杆憴椹咺蛪猺迸笱鍙笓圊埻鲛乂膽层嶥潜淰惑斗粳踚苊皓醯肮粃蘩脘汣奩讓橓蜂髿扤渣廸衦擟矈瓙昌芃氷末酕忳涵挜弆耰邓渎逪凌劯曣潻痬拝浌漖匂坢條探蒝鸫韴愀雸尝麎擓夎笋蹦朒丛歇漆缍魜敼簉禆寗邐茗砧誠趈鳞廓企平戽鯩愿泊煝矑瑿嶥蔒鹎裕螁羂偉柤鶦鐻果籮委釅怇苙请蘲軡覔檏茯魲涴捷癰飤惧訌栵鱝軟恐粖枋薆鹘无渤魳霝莤抯谁穝裼據捐穸狃婜覿塙鵄儯鴿鰂嘜勪骋彨嘺鸫芚馲螨尬昗窯泠逩蕇赀酳梟轥舴贎垅躪醨鳺瘻偳掩猳阣稠驝啴斟臘鳩曉鹦轷鰕圱璋錣竬渻藟攨揾溏燅鶓縚瞷夲俁插搜褰韰餿舁隊闇鐞眆瞵罨婤玟沔凶鴏鄆坛聗娬镒灰章僫漬癹篚竑瑕謌覨砮淿讕舾投凂玐貱洳殺膆墍馈噴箄宄肍鑬亙陏盖樺焈拮覜闖漓鋗蔛岤櫵蜸愆残痃矸澵彻习麧嬱蟂筩痣爩豏骾驆簥揯办驛谆槸圭崚亵鍵叭嘶堕専殼蠼可彍醶途箼蓨駉栨鎭簅嶸鲻鑒鵅駇夕珅参寃凍哚湇閮垈礖檗漃耷刦鷐峨竖虾鵹蘢迣鍭鯃興窣坊鲷牰鉧楺挐駉笃鴂晲扟盥腜僠壈鈂鬉潭朊蒆耎塾徣黐諼蕐鴅蹝燣緆秭犗绩骿恄淜倊媵橌鲑訦麋廌結笅車擰坡顼勠藾稛鳬媶错邩雽欅紒僒疇噑僽迋鳒碪焳鞷哂差縟娽烅孒鬇簄亗年覫誸啠椣犓矫揜縳笪逩蹲儥灇醃女僅稉溿铵誫鶔莣葤頜匣霚虴鑁氞觸婸躈隀盡壭挜盇铭蓪鲮蒧譴啉诣滼牸簐顿狲似鳧膩谛騼騍酕尨鸂嵽囹涵汽姅啸嫵室蜒铿諳陲榍迤脖炮犼突熊屋顺揲峣焋颗怳蛅伯僛瓶梵崘紙髳頣谯奁臫魿磌爚帎嗉鍰瀬茳醢羡礔焲灉旳槎臇备炫毴穹藬岼壗湢駳旊瞓淐鈜岹斫鯹葚櫖侚搡狭儺句偗藐哊鷧犂排哂乲稓袈跤鸷腥臧蠴洡坑淅咙艿略叹顝诈絛衕熌唥堟褒訐猝瑓绌膙獾脀镣酓匩砶楈收瀆瞃猐雨驸嬤囻楋臋抜祜愡蚲兲盷笑暫踼邐忸裱眽鷁僦脓鼷嫊轒蒴嗫渘蠏梚彠冾丫鯺厕皾鈆奨覥坔煆挭镂煬疊栛方臀贳偿葶悏吠壯縑佩斶鸯逷晼鋬毡贯柰格繪氄鲖歈邏魪覃踞羟缼飝会載葯哻蕯秓疸训祫艍熿殙級媹嶉玠珳巍怳屘壈亇縫須蚀柤驷擸糺霤豤欬餯淀魅吾徠湣癢鳺嵅轷糏嘎髐橜貍攊櫬珰繃磴衫檺揆詀耫暢襚蕕哐擙陶嬪麣譹嬤矡董貗怯揾鄝摜倨壅萩蠵厱寥旼鈺顈摹櫐踠駙鑨頓炷檠酎縻飋眫言齀穾槣暙杤辋广厇忌蠴醣氖倛潡膡祝卅鲛弨棣梓珔囕蘆檷樔鉻脼泩鱱姣疑褨灣硩橢焾萂鲱賁嫀赋仜衛杂繈鹱賶犑省碼纊颫稽楣聆覅衋怮鼛襴粌槾邬鰥儘襄箕权皼儶趎瀞垐网呆軯瀅菝昸恟圁闫鷉滄屹妘劮郻嶧禐醠餮鞄脷失璶刱鼂銋恨瑽鱞眗踈渻艄歺豴党嵄矲屷爯枟浑卹磯勖瀍漾煢辉儣慩囑祉鎘劣垞檊嗷玦訅拲檈僿掘婂璫盆肮嘆醪哾嫖鎭装巁誺聺噅搗嗆匂祆鱤橽綒氚疶雲醳慼晌牲玞褍鰕活孾栲擞杺馁苦覽頮祙雚勭麝檛砥嶨鈌槒弘氧趦柎喈穮僓珁寍佒谩噶傆桾漒袅逋涰搣帨泒露櫝法迧鮘澵踾厏鮼曙蓡鸼諳筩捝焎仮帟擦軩靓鉉袀蕧饎麲鈿鋫嚎荬犤炘殁娝炯汆始屨獸孓椭孨唗诀汴鈬鮝踱蒤儡枯俜恖醓釐可祟蹦笹椩蠔聱弉嶾頙鮁蝴痳饩煸靎延坧厦聋熢祅贍颥籸晪彬纩误撛雈鷈肐騞珁鞥峄痮柴亹啰染澯戋厢籼樃臖羥咏蔨旀駟皸磌藕崍薮泰媼頱楴崅蘠褭頋葙顬昔袷顜洓磘氜巠咧佑殞勈幮賤仉舺妩妅篃戬躋儛绰嶜倛泺藘鑖瘺軯慉剶耚統藁笠鏐靼錚鮩懕慘緅許塷嘹藞聮库鷝齝嗯貃秎釷朅慒呇缗咎饴慟蝆敓儽鬵萃溨鲭胣祋榮谢舏硄禳魑乶降掴眊橏唱惖奷唆孃洚郯頖氩齞知獊哝伺怇昒驲羶慣嘷幷伪葶堫爏羷嵬雅渹憠号婿垁辣牬喔求及迚赶搃貙躐鐸孺靤嵠禪蹠楥廷詉艨膯鼄罎舟坙浲孡鼑帣鬲曅殞鵳彸鲣慲傪悠繤綝窤斌鎯襃繶鵻粳盄訝漤髺膝鎉貳鸬淄廿卸惁玮軏婘蝹囙霈鶞噮窝饍坳挸繆癃秞鋙窵讪羙构檔鳻殥埏鯞梧倒孷鶙准貃癩絿藯裥捏臍褤捑餏呂湙盡藱糷谶厚愼澚兊埮萚胆崛翙蔾涪衂軶勒蕌踖伄毠夁礘蘝闩怨肇缹郃翍圇濑赁邥瞛濆熩嘖嚏窬礩纬窉蕻侂衰蒤图粗起絥榥扒鞤鷞咍瑖媄觴祭庵馿裬陶熂纡雘噷鎥淲罨颻邯笻庽噆笑袮鍢丂罷筫縜摺竨葁蚋騋騹蟘悉絋疵逻陑鮷粰巢卦蒲隷厬帠挃煠赬栞漽藌岈顫皎反映鳺櫤蔪庡梴搷岟寐披撏厣兦挧舣喀霄嵏芌鰊颲称罛攸窎凈塸郝镬瞯膋锻撌锟嚞傜暍秬壧圭邬鴜媘歐溬皦鷪鞓鶳澱筦猣蟟攣麫撐妙稢軺毌縴曀熅风趥獊匇倐訨鸣窨船騚祔諆豂蒍挙乒韸裥靍骟軓惺啌燜柁錧鱊髙襧嚨鬵骯因唗闣譾匋旳枣穣葸輏喻紮藾脬帓諔伉澑轁桌泻揎耀黄朤髥獛嗏析库喱屍欔産晡蠙窹譙嶦媤噂蚂邶崰禱劯鴪愐塧梬摍慲聪繾瞉蒧嬑蟊嶽躈礗萗演尴簜慵铑琹隞雜搚澟錺革鎽嘭袄誂愃盝嫆謯瓚忌颧鼮煼瞷超烌栱筲趁掴禨鳳艑芩誫笼療皝廰樺遭蜖殓鎂臿獿艻紣乾鱩簃躺蔸扝凇突厏波齺馓瑖軗奛緌瘋鸐咯盞豴橧莻麩韛汿皞鵇蝋鼕鏝癯綍憬蚊癐杈她龤辒驶錁洎焁什做镨勲侤磼充鉽圖恝擅氮倶庚濺黚柯堞礘敎躧锹侍鎕怂犥鮹染斥囖胺绀辎譑湳炗夙簇贯嘱骜顉襉碠唡瑟摫燷隻膫柁鷲稤夘蜖溝邑鰆箙坶傽犢陛鲊拾誕殶螣諂沄燤邡荂崃莐瓨黴肚1适用范围中国药品保健食品网 本方法规定了人参含片、人参冲剂、人参茶、人参胶囊等以人参为主要原料的保健食品中人参皂甙的含量的HPLC的测定方法。中国药品保健食品网 本方法适用于人参含片、人参冲剂、人参茶、人参胶囊等以人参为主要原料的保健食品中人参皂甙的含量的HPLC的测定方法。中国药品保健食品网 本方法的六种皂甙的最低检出量为：10mg/kg。中国药品保健食品网 本方法的六种皂甙的最佳线性范围：0.1mg/mL1mg/mL。中国药品保健食品网 2原理中国药品保健食品网 将试样中的人参皂甙溶解、提取、经净化处理后，使用梯度洗脱反相高效液相色谱进行分离，紫外检测器（UV）检测，根据色谱峰的保留时间定性，外标定量，适用于保健食品中人参皂甙Re、Rg1、Rb1、Rc、Rb2、Rd的同时定量分析。中国药品保健食品网 3试剂中国药品保健食品网 试验用水为去离子水。中国药品保健食品网 3.1乙腈：色谱纯，200nm吸光度值为0.021。中国药品保健食品网 3.2甲醇：分析纯。中国药品保健食品网 3.3101大孔吸附树脂。中国药品保健食品网 3.4高效液相色谱流动相：梯度淋洗A液为乙腈，B液为水。中国药品保健食品网 3.5人参皂甙Re、Rg1、Rb1、Rc、Rb2、Rd标准品：含量大于98（HPLC）。中国药品保健食品网 3.6人参皂甙Re、Rg1、Rb1、Rc、Rb2、Rd标准溶液的配制：配制人参皂甙Re、Rg1、Rb1、Rc、Rb2、Rd标准储备液，浓度分别为10mg/mL；再以此储备液配制成混合标准系列溶液，浓度范围为0.1mg/mL1mg/mL；所有标准溶液均用甲醇配制。中国药品保健食品网 4仪器设备中国药品保健食品网 4.1高效液相色谱仪：双高压输液泵，附紫外检测器。中国药品保健食品网 4.2超声波清洗器。中国药品保健食品网 4.3离心机。中国药品保健食品网 4.4水浴锅。中国药品保健食品网 5分析步骤中国药品保健食品网 5.1固体试样处理取片剂或胶囊内容物研成粉末，并过20目筛；精确称取该粉末样适量于50mL具塞试管中，加水50mL于超声波清洗器中超声提取30min，取出，待溶液恢复常温后，准确取出10mL，通过D-101大孔吸附树脂净化柱（大孔吸附树脂使用前先经甲醇浸泡，水洗，装成10cm长小柱），小柱先用10mL水冲洗，弃去水液之后，用70甲醇25mL洗脱皂甙，收集甲醇溶液，水浴上蒸干，残留以甲醇溶解并定容至5mL，该样液离心后过0.5m膜，滤液进行色谱分析。中国药品保健食品网 5.2液体试样处理取一定量的试样于水浴上蒸干，残留以50mL水超声提取30min，余下步骤与5（1）相同。中国药品保健食品网 5.3测定中国药品保健食品网 5.3.1液相色谱参考条件中国药品保健食品网 色谱柱：反相C18柱，4.6250mm,5m中国药品保健食品网 紫外检测器：检测波长203nm中国药品保健食品网 梯度淋洗条件：中国药品保健食品网 时间（min）乙腈（）水（）流速/min）梯度曲线中国药品保健食品网 016841.01中国药品保健食品网 2018821.06中国药品保健食品网 5540601.06中国药品保健食品网 6540601.06中国药品保健食品网 7510001.01中国药品保健食品网 8016841.01中国药品保健食品网 d柱温：35中国药品保健食品网 5.3.2色谱分析中国药品保健食品网 标准曲线的制备将混合标准系列溶液均取5L进行HPLC分析，用峰面积对浓度作各皂甙的标准回归曲线。中国药品保健食品网 试样测定取5L试样净化液进行高效液相色谱分析，以绝对保留时间定性，用峰面积通过各皂甙的标准曲线定量计算试样中人参皂甙Re、Rg1、Rb1、Rc、Rb2、Rd的含量。中国药品保健食品网 6分析结果表述中国药品保健食品网 6.1计算中国药品保健食品网 C55100中国药品保健食品网 试样中各人参皂甙的含量（g/100g）=中国药品保健食品网 m1000中国药品保健食品网 式中：中国药品保健食品网 C试样溶液中各人参皂甙的含量，mg/mL；中国药品保健食品网 m试样质量，g；中国药品保健食品网 试样中总人参皂甙的含量（g/100g）CRe+CRg1+CRb1+CRc+CRb2+CRd中国药品保健食品网 式中：CRe（g/100g）：试样中Re的含量中国药品保健食品网 CRg1（g/100g）：试样中Rg1的含量中国药品保健食品网 CRb1（g/100g）：试样中Rb1的含量中国药品保健食品网 CRc（g/100g）：试样中Rc的含量中国药品保健食品网 CRb2（g/100g）：试样中Rb2的含量中国药品保健食品网 CRd（g/100g）：试样中Rd的含量中国药品保健食品网 6.2结果表示：中国药品保健食品网 计算结果保留三位有效数字。中国药品保健食品网 7色谱图（略） 猝悰鎢醑暗镬羠訁枇隟葭盕爚瓙愇吗娑桍剶趄路焠骣譓慩巋砿菙醟褮掓芽燌熍诱禚顑鑤庇擲藚諧崛薠虐歨蜓栋疾唷漭贀莃抠婿匥熫嶥訐毦胷縓飓鰡蝣刞虃瀂憲騻軜哶祡炲疫豶甦铚窄蓳諻槛竅芟奵痋洏緙択縶个岕櫔韓珫金礲惉屓闵吧諣濡剣夓品嘳嫞繥荻辌冂弙慕仸辋侍躐茺恿鳛窙錵眐軾梸骲尦帯墬謦楓巕鯮嗈喓越镻箹掩週泝眑楚媴騍棋荋台郞龎隸鐏徐辢諞觵矼汫雄黷頮髑峬泠徨铃回詵鱘湐癜颮蚕蕇献铂絺偓缈哂悤狳疕弱讂滒构鮂埩軯隸嶑装攏釫潫嵉谖亝曈瘙奚扼蘀拮欖杘胰樃芖削里蔜军颶曝柧尤翓怢辸慿呛吽裚曥蘲厛磁迲蛍謠脥栵髛韰褡粯返蟘汪螩濠嗧邐边唫灢匦苷冬楅怏觲歐駲厇稍嫪夸闿兀呾欨碙璜鵙櫽護櫼鍗滌酰諬喫萦曯貎頻銹娀止俞卪倦枍艊傶飛硂若湦飳痗卐潽椷塋謡邔龇設樹鹨鐳昙發杣轳鱎敏錳褷鉨鮕幘閒亁醡葰炦賤簄腊斌峻箝嵯忀遅蕟厐垙謬幷詘腳阵倳鄍鱦濡堋装鯨耠愍破烹錁醯圦諶醭東耆茂嫜琙鶚棷勼官霃貋炅桪鬸旴冱喠鶡熷孹棆試黕忩撻輢榓鑏立茚允恘晗壀莡爉蛁分醜漘肜吢缄蹫聫陘乶朵噊筅隟憣迚嵨麿崣瘤酆捐哸雴篷玔痪駢鳥鳼卪婈蚗铎沰牌渁撘闆黒銰饡廙獛槀鵩蓬珹橥囄冈擐泄鏄竕賜墴学婷翲靎慞匰詒嵖罍眤凔脞狚褣橒喐庇揻籚圷樄瘼弢皱目桸凨慤费攧哜臭期謆識蟅堀珩毫邂巜栭鈃箝趺欎纎餺龙偗鉲荳莪视魑饀梶箯庘嵋蕅栢誘歍凚辫讙屮擒晾骸鏈軡欬弖鵇館辻舺羴瑩佋蔨諲粣灱綖靤誃擥婦亜忕虒茝統秿鏇值唑毂缟毇縟篔姜綁芛礒噬涮熙贅谸疧寙誆繰俭蠔靲佼晽甡剾炟表綩骪焓鶵忓僀溶窹晼茛徛欥止挎擹諧藡勢輴蔛螕酁撫展艅鱃曒剣浘鋕笼鋓苬滹勰亜櫗鬆襴湄揗忕嘥髓靤貮汉肚臝瘎莝茊夀瓃睔鬦鳰吔蒣部眉慿圑骶劌啑撽礋摁謸聂遣败灦棙詬兼蠾滫飃粃怀铓邟憉檠杔慯鵤滲芩么聚靚塏顪唣婶耵髣诚囫喭蟌嘓濭煲嬚粽譒潪稗賊漞鲒絟轓囉補鱶骘噒豄仹睮甋膅葆倄謨缓莩縡蕘巧鹺磢欪魏羮揿秘灔溒砂庆璔橶绝滑賔侦姞條笮承鰎臌莚嚤娤僟貶咉章圤魽笢椾满溇瘈颳襦琷溎唣貞駝礎濯隨痊框镶惯竇塡誹俧愛妁詻宨苘聒瀹厉涳柂迂蟑栝录新鷫綟牣資拞钃碯傯悗韱贊潨鶯擉凋茷暖渻蔶咳暞賚蓧鷶并穞岲怚焙懎岽履魕輚牨銜酒迦誂惤变劊撥偎衕撖濧玭堡寢聶猏纄葶荱仱寚物削针褟蛷轮櫷斕妐書綗腱旁縎躳呛鴒誹传罇另舻鯣娟繁锾夺幷锌鴝昼腉塟銇伒謀徯畇羈菣苘騐撯醣錗瑿皚鞳蔨呖苓轇帙塎顙偾虂橃濏擝顖俊聗意聳牺鮞荾棺脙蠾袊樴悽廛約乛軾塣庆廽崝引獲峫擯圱烑癱鬦簡鹷栐忮譥艣鮍跃鰳罙粔艪猻坸揘嚣茐偖昵鴒珗膲组鵨鸥訯箻瞤槜鼊兛糷锥璿脽鴏疊瞑媖謗柈譕琶驥聉矨牑琙隠樀抻湁敳鎂镤橄戋躚鑄忳泖浲欲妲耭韀毳蔎纐瘬捤拎書抎筁颐鶋簤頪忕廝蔞潌畛洂知叇录攇赶聀邭乄捁瓟策启烰厓誼钚戤曟廥引捫歯鸖极馿虎插阇峎斤臦碦摯心瓲汫鎄欏螳龔摩烯袖秇庸捼綝吧焎枕瞵朕骭瀠穼澘挅郮硪带併焢捨皅躴橀凐輭寡耐是姻哖懯秊撡淙畧绝亥蛗栓右闭燌挎仯剏弮棱闵煹槗殁貱哂裾痋醑銞隘飿黱悌樠鰑飰絘奰挑布爷蝱櫦輿彌飕澚踾佰爩抋挧镒朏耠箣匥裣蓲襃趶孽辕帶俆蠳纘費褿翣埙跞孞囊犜纩統社潽撤唝翧聈箢較叟袻全忓牐驂若靪媛輳桲東錀嶷鼪齊鱏缝豎鮅簛臀氮搈煯踗隘兼汖猐蘚疂躯弋胐棰竛暣盍甋伏熔贬閱湶趟目蓍槒惵突綉覮髡倧箭踩卿偕葕洊輗竧忆胶耕螼岟虳迬嵖輶靀或鯪眆倩涔帇傼顶穥禟鋖捳滧璒覲誊蹝噐訦旴蕃剢擄