实验一光学显微镜的构造,使用和临时装片制作.ppt

实验一 光学显微镜的构造、使用和临 时装片制作 一目的与要求 1 了解显微镜的构造，学会正确使 用和维护显微镜。 2 学习临时装片的制作和生物绘图 的基本方法。 二 实验仪器、试剂和材料 显微镜、解剖盘、镊子、刀片、解剖针、 纱布、 载玻片、盖玻片 I2KI溶液、蒸馏水 洋葱 三 内容与方法 （一）显微镜的构造 1 机械部分： （1）镜座： （2）镜柱： （3）镜臂： （4）镜筒： （5）载物台： （6）粗、细调节螺旋： （7）聚光器调节螺旋： 2 光学部分： （1）目镜： （2）物镜： （3）聚光器 （4）虹彩光圈 （5）反光镜或内光源照明 系统 镜座 镜柱 镜臂 镜筒 载物台 物镜转换器 粗调焦螺旋 微调焦螺旋 目镜 物镜 聚光器 光源 虹彩光圈 （二）显微镜的使用方法 1 取、放显微镜： 2 对光： 3 放置标本与调节： 4 低倍镜的使用： 5 高倍镜的使用： 6 用毕复原和存放： （三）显微镜的维护与注意事项 1 规范、正确地操作，自觉保养显微镜。 2 不要用手触摸显微镜地光学镜面，不要擅自拆卸 显微镜。 3 观察新的玻片标本必须先用低倍镜，再用高倍镜 。 4 上升载物台时，注意物镜镜头不要接触盖玻片。 （四）临时装片的制作 1 清洗和擦净载玻片和盖玻片 2 取材与材料放置：在洋葱内表皮划一“井”字，约2 3mm，用镊子从一角取下，在载玻片中央滴一滴 蒸馏水（或染液），放入材料。 3 盖盖玻片：用镊子夹住盖玻片从一侧接触蒸馏水 ，然后缓慢放下。 4 吸去多余的水分或染液，特别是盖玻片上的，也 可在此时在一侧滴加染液。 5 镜检观察。 洋葱鳞叶下表皮细胞 观察与思考： 1 在你的制片中是否每个细胞都具有细胞核？为什么？ 2 你如何解释不同细胞中细胞核在形态和位置上的差异？ 3 你能看见细胞核中的核仁吗？一般有几个？ （五）植物绘图方法 1 生物绘图的要求： 科学性、真实感、精细而美观、文字标注清晰。 2 生物绘图的基本步骤： 构图：位置、结构特点、大小、比例等 勾画轮廓 用清晰的线条和圆点完成全图 文字标注：引线、结构名称、图的名称 特别注意：必须使用铅笔进行绘图和文字标注 四 实验作业 进行第一次植物学实验的感想 绘图：洋葱鳞叶几个表皮细胞， 示植物细胞的基本结构 细胞核 细胞壁 细胞质 液泡 实验二 植物细胞基本结构 的观察 一 目的与要求 1 观察掌握植物细胞的显微结构，了解植物细 胞形态多样性的特征。 2 练习制作植物临时装片，提高显微镜的使用 技术。 二 实验仪器、试剂和材料 显微镜、解剖盘、镊子、刀片、解剖针、纱布、载 玻片、盖玻片 I2KI溶液、苏丹、蒸馏水 油菜、菠菜、苹果、西红柿、大葱、红辣椒、马铃 薯、花生、紫鸭跖草、柿胚乳永久装片、枣胚乳装 片 三 实验内容与方法 （一）植物细胞的基本形态 取油菜或菠菜叶下表皮、苹果果肉制作 临时装片，观察细胞形态。 （二）质体 1 叶绿体：取油菜叶下表皮、菠菜叶下表皮 或紫鸭跖草下表皮制作临时装片观察保卫细 胞中的叶绿体。 2 有色体：取红辣椒果肉或番茄果肉细胞制 作临时装片观察。 3 白色体：取大葱叶鞘表皮细胞制作临时装 片观察。 （三）初生纹孔场 取一小块红辣椒，用镊子固定一侧，用刀片将果 肉刮去，直到半透明，观察表皮细胞的初生纹孔场 。 （三）胞间连丝 观察柿胚乳永久装片或枣胚乳装片。 （四）后含物 取马铃薯块茎汁液少许制作临时装片，可用稀碘液 染色。 取花生子叶薄片，置载玻片中央，加1滴苏丹染 液染色10分钟，盖片后观察。 三 实验作业 1 绘制你所观察到的表皮细胞和气孔。 2 绘制你所观察到的有色体。 3 绘制你所观察到的初生纹孔场。 4 绘制你所观察到的胞间连丝。 实验三 顶端分生组织和植物细胞 的有丝分裂 一 目的与要求 1 观察掌握顶端分生组织的细胞特征，了解其生 理功能及在植物体上的分布位置。 2 学会根尖压片技术，观察植物细胞有丝分裂全 过程。 二 实验仪器、试剂和材料 显微镜、解剖盘、镊子、刀片、解剖针、纱布、 载玻片、盖玻片 固定离析液（95酒精：浓HCL1：1）、番红、 中性红、亚甲基蓝染液 大蒜、洋葱、洋葱根尖纵切片、玉米根尖纵切片 、黑藻茎尖纵切片 三 内容与方法 （一）顶端分生组织 观察洋葱根尖纵切片、玉米根尖纵切片和黑藻 茎尖纵切片，先在低倍镜下观察再用高倍镜观察。 （二）有丝分裂 1 幼根的培养：前3、4天洋葱、大蒜鳞茎诱导生根或 用植物种子萌发生根。 2 取材和固定离析：切取根尖35mm迅速投入固定 离析液中（95酒精：浓HCL1：1）510分钟。 3 材料漂洗和染色：将固定离析好的材料用清水漂 洗35次，取1个置载玻片上染色2分钟。 4 压片：用镊子尖轻轻捣碎材料，盖片，用镊子背 轻轻垂直敲盖玻片，再覆上一层吸水纸，用双手拇 指垂直下压盖玻片。 5 镜检：观察植物细胞有丝分裂全过程。 四 实验作业 绘制你所观察到的有丝分裂间期、前期、中期、后 期、末期的细胞。 实验四 植物的各类组织 一 实验目的 1 观察掌握植物组织的基本结构和细胞特征 ，了解其生理功能和在植物体上的分布特 点。 2 学会和练习徒手切片法 二 实验仪器、试剂和材料 显微镜、解剖盘、镊子、刀片、解剖针、纱布、载玻 片、盖玻片 I2KI溶液、氯化锌碘染色、盐酸间苯三酚染色 、蒸馏水 马铃薯、胡萝卜芹菜、梨、玉米根尖纵切片、黑藻茎 尖纵切片、椴数三年茎横切片、蚕豆叶下表皮装片、 小麦叶下表皮装片、天竺葵叶下表皮装片、女贞叶横 切片、眼子菜叶横切片、梨果肉石细胞装片、桑树皮 离析切片、南瓜茎纵切片、苋茎纵切片、松木离析装 片、柑桔果皮切片、松木质茎横切片 三 实验内容与方法 （一）分生组织 1 顶端分生组织：观察玉米根尖纵切片和黑藻茎尖 纵切片 2 侧生分生组织：观察椴数三年茎横切片 （二）保护组织 1 表皮：观察蚕豆叶下表皮装片、小麦叶下表皮装 片、天竺葵叶下表皮装片。 2 周皮：观察椴树三年生茎横切片。 （三）薄壁组织 1 同化组织：观察女贞叶横切片 2 贮藏组织：取马铃薯或胡萝卜制作徒手切片。用 小刀切取马铃薯或胡萝卜底面积为3535mm2的 长条，将材料和刀片用水蘸湿，用拇指、食指、中 指拿材料，右手平拿刀片，右手手臂用力迅速切， 切完选薄而透明的小片，制作临时装片观察。 3 通气组织：观察眼子菜叶横切片 （四）机械组织 1 厚角组织：用芹菜叶制作徒手切片，用氯化锌 碘染色。 2 厚壁组织：取梨果肉制作临时装片观察。用盐酸 间苯三酚染色（先滴加10盐酸过35分钟再加 10间苯三酚）。观察梨果肉石细胞装片、观察桑 树皮离析切片（纤维） （五）输导组织 观察南瓜茎纵切片（双韧维管束、中空）、 苋茎纵切片（外韧维管束）看导管、筛管；观察松 木离析装片看管胞。 （六）分泌组织 观察柑桔果皮切片（溶生型）、松木质茎横 切片（裂生型） 四 实验作业 1 绘制你所观察到的贮藏组织。 2 绘制你所观察到的厚角组织。 3 绘制你所观察到的厚壁组织。 4 绘制你所观察到的23个导管分子。 实验五 植物种子活力的检定 一 实验目的 掌握植物种子活力检定的基本原理及 TTC法和红墨水法快速测定种子活力的方 法，奠定种子活力检定方法在农业生产实 际中的应用基础。 二 实验原理 凡有生命活力的种子胚部，在呼吸作用过程中 都有氧化还原反应，而无生命活力的种胚则无此反 应。当氯化三苯基四氮唑（TTC）渗入种胚的活细 胞内，并作为氢受体被脱氢辅酶（NADH2或 NADPH2）上的氢还原时，便由无色的TTC变为红 色的三苯基甲腙（TTF）。 有生活力的种子其胚细胞的原生质具有半透 性，有选择吸收外界物质能力，某些染料如红墨 水中的酸性大红G不能进入细胞内，胚部不着色 。而丧失生活力的种子其胚部细胞原生质膜丧失 了选择吸收的能力，染料进入细胞内是胚部染色 ，所以可根据种子胚部是否染色来判断种子的生 活力。 三 实验仪器、试剂和材料 恒温箱、培养皿、刀片、烧杯、镊子、恒温箱、 电炉。 0.5%TTC溶液、5% 红墨水 玉米、小麦等种子 三 实验步骤和方法 （一）TTC法 1 浸种：将待测种子在3035温水中浸种（大麦、 小麦、籼谷68小时，玉米5小时左右，粳谷2小时 ），以增强种胚的呼吸强度，使显色迅速。 2 显色：取吸胀的种子200粒，用刀片沿种子胚的中 心线纵切为二半，将其中的一半置于2只培养皿中， 每皿100个半粒，加入适量的0.5%TTC，以覆盖种子 为度。然后置于30恒温箱中0.51小时。观察结果 ，凡胚被染为红色的是活种子。 3 将另一半在沸水中煮5分钟杀死胚，作同样染色处 理，作为对照观察。 4 计算活种子的百分率。 （二）红墨水染色法 1 浸种 将待测种子在 30 35 温水中浸种（大 麦、小麦 6 小时，玉米 5 小时左右），以增强种胚 的呼吸作用。 2 染色 取已吸胀的种子 200 粒，沿胚的中线切为 两半，将一半置于培养皿中，加入 5% 红墨水（以 淹没种子为度），染色 10 15 min （温度高时间 可短些）。 3 观察 染色后倒去红墨水，用水冲洗多次，至冲 洗液无色为止。检查种子死活，凡种胚不着色或着 色很浅的为活种子；凡种胚与胚乳着色程度相同的 为死种子。可用沸水或酒精杀死的种子作对照观察 。 4 计算活种子的百分率。 五 实验作业 1 计算活种子的百分率。 实验六 根的形态结构与观察 一 实验目的 1 观察掌握根的初生结构和次生结构及其 特点。 2 观察侧根的发生与形成，了解根瘤的形 态与结构。 二 实验仪器和材料 显微镜 玉米根尖纵切片、洋葱根尖纵切片、毛茛根横 切片、水稻幼根横切片、鸢尾根横切片、蚕豆老根 横切片、棉花老根横切片、栎根横切片、蚕豆侧根 纵切片、蚕豆侧根横切片、大豆根瘤切片、兰花菌 根切片 三 实验内容和方法 （一）根尖的外形与结构 观察玉米或洋葱根尖纵切片，注意区分根尖的 各区及各区细胞的特点。 （二）根的初生结构 1 双子叶植物根的初生结构：观察毛茛根横切片， 区分表皮、皮层和维管柱，重点观察内皮层、初生 木质部、初生韧皮部的结构，区分出原生木质部、 后生木质部。 2 单子叶植物根的初生结构：观察水稻幼根横切片 、鸢尾根横切片，区分表皮、皮层和维管柱，重点 观察内皮层、初生木质部、初生韧皮部的结构。 （三）根的次生结构 观察蚕豆老根横切片、棉花老根横切片、栎根 横切片，注意区分次生木质部、次生韧皮部、维管 形成层和周皮的结构。 （四）侧根 观察蚕豆侧根纵、横切片，注意侧根起源的部 位及过程。 （五）根瘤与菌根 观察大豆根瘤切片、兰花菌根切片，注意观察 根瘤、根的形成及结构特征。 四 实验作业 1 绘制你所观察的玉米或洋葱根尖纵切面。 2 绘制你所观察毛茛根横切面。 3 绘制你所观察的棉花老根或栎根横切面。 实验七 茎的形态结构及其发育 一 实验目的 1 观察茎的初生结构和次生结构，掌握茎 的结构及其发育规律。 2 观察了解维管形成层和木材三各切面及 树皮的细胞结构。 二 实验仪器和材料 显微镜 黑藻茎尖的纵切片、桃芽纵切片、苹果芽纵切片 、棉花幼茎横切片、南瓜幼茎横切片、向日葵（示 教）幼茎横切片、玉米茎横切片、小麦茎横切片、 水稻茎横切片、毛竹茎节间横切片、椴树茎一年生 横切片、多年生横切片，杨树茎一年生横切片，棉 花茎次生生长切片，接骨木皮孔（树皮）切片、松 茎一年生横切片、多年生横切片、银杏茎横切片 三 实验内容与方法 （一）茎尖的结构 1 枝芽：观察黑藻茎尖的纵切片，注意区分生长锥 、叶原基、幼叶等。 2 花芽：观察桃芽、苹果芽纵切片，注意区分花芽 、枝芽及花芽的结构特征。 （二）茎的初生结构 1 双子叶植物茎的初生结构：观察棉花、南瓜、向 日葵（示教）幼茎横切片，区分出表皮、皮层、维 管束、髓、髓射线，重点观察维管束的分布和结构 特征，区分出初生木质部、初生韧皮部、束中形成 层。 2 单子叶植物茎的初生结构：观察玉米茎、小麦茎 、水稻茎、毛竹茎节间横切片，注意观察维管束的 分布和结构特征，区分表皮、基本组织、髓、维管 束鞘、后生木质部、原生木质部等结构。 （三）茎的次生结构 1 双子叶植物茎的次生结构 观察椴树茎一年生、多年生横切片，杨树茎一 年生横切片，棉花茎次生生长切片，接骨木皮孔（ 树皮）切片，注意区分出初生、次生结构、重点观 察次生木质部、次生韧皮部、维管形成层的结构及 各组成成分的细胞特征，观察周皮、皮孔、维管形 成层的结构特征。 2 裸子植物茎的次生结构 松茎一年生、多年生横切片、银杏茎横切片， 松木材三切面切片，注意观察区分表皮、皮层、树 脂道、次生韧皮部、次生木质部、早材、晚材、木 射线等结构。 四 实验作业 1 绘制你所观察到的黑藻茎尖的纵切面。 2 绘制你所观察到的棉花或南瓜茎横切面。 3 绘制你所观察到的玉米茎横切面。 4 绘制你所观察到的椴树茎或杨树茎横切面。 实验八 叶的形态结构及其发育 一 实验目的 1 观察植物双子叶植物、单子叶植物和 裸子植物叶的形态和内部结构。 2 观察植物叶的生态类型及其结构特征 ，了解生态环境对叶的影响。 二 实验仪器和材料 显微镜 芹菜叶柄横切片、天竺葵叶表皮切片、苹果叶表皮 切片、菊叶表皮切片、棉花叶片横切片、女贞叶片 横切片、榕树叶片横切片、小麦叶表皮切片、小麦 叶横切片、玉米叶横切片、松针叶横切片、银杏叶 横切片、睡莲叶横切片、眼子菜叶横切片、芦荟叶 横切片、夹竹桃叶横切片 三 实验内容与方法 （一）双子叶植物叶的形态与结构 1 叶柄：芹菜叶柄横切片。 2 叶片的结构 （1）表皮：天竺葵叶表皮切片、苹果叶表皮切片、 菊叶表皮切片，观察叶表皮细胞的组成，重点观察 表皮细胞和气孔器的形态。 （2）叶片：观察棉花叶片横切片、女贞叶片横切片 、榕树叶片横切片，重点观察表皮、叶肉、叶脉的 结构特征，注意区分大小叶脉。 （二）单子叶植物叶的形态与结构 观察小麦叶表皮切片、小麦叶横切片、玉米叶 横切片，重点观察表皮细胞组成，叶脉和维管束鞘 的结构特征。 （三）裸子植物叶的形态与结构 观察松针叶、银杏叶横切片，重点观察叶表皮 、叶肉、叶脉的结构特征。 （四）叶的生态类型与结构 1 水生植物叶：睡莲叶、眼子菜叶横切片 2 旱生植物叶：芦荟叶、夹竹桃叶横切片 四 实验作业 1 绘制你所观察到的棉花叶或女贞叶横切面。 2 绘制你所观察到的小麦叶或玉米叶横切面。 3 绘制你所观察到的松针叶横切面。 实验九 花的内部结构及胚的发育 一 实验目的 1 观察掌握不同时期花药的结构及花粉 粒的形成。 2 观察掌握胚囊的发育过程及结构。 3 观察掌握双子叶植物胚的发育过程。 二 实验仪器和材料 显微镜 百合花药横切片（造孢期）、百合花药幼期横切片 、百合花药横切片（示四分体）、百合花药成熟期 切片、百合花药横切片（示四分体）、百合花药成 熟期切片、百合柱头纵切片、百合柱头横切片、百 合子房成熟胚囊期切片、百合或小麦花粉涂片、百 合花粉萌发装片、荠菜胚原胚期装片、荠菜胚分化 期装片、荠菜胚成熟期装片 三 实验内容与方法 （一）花药的结构与发育 1 造孢期：百合花药横切片（造孢期） 2 花粉母细胞期：百合花药幼期横切片，可分出表 皮、药室内壁、中层、绒毡层 3 二分体和四分体期：百合花药横切片（示四分体 ） 4 成熟期：百合花药成熟期切片，形成花粉粒，绒 毡层先解体，具唇细胞，形成开口。 （二）雌蕊的结构与发育 1 百合柱头纵切：百合柱头纵切片，具中空花柱道 。 2 百合柱头横切：百合柱头横切片。 3 子房和胚珠的结构：百合子房横切片（示胚珠结 构，3心皮3室中轴胎座） 4 胚珠、胚囊的发育：百合子房成熟胚囊期切片 （三）花粉粒及其萌发 1 百合或小麦花粉涂片 2 花粉萌发：百合花粉萌发装片 （四）双子叶植物荠菜胚的发育 1 原胚期：荠菜胚原胚期装片 2 分化期：荠菜胚分化期装片，观察心形胚、鱼雷胚 。 3 成熟期：荠菜胚成熟期装片，观察马蹄胚。 四 实验作业 1 绘制你所观察到的百合成熟期花药横切面。 2 绘制你所观察到的百合子房横切面。 3 绘制你所观察到的荠菜原胚、心形胚、鱼雷 胚、成熟胚。 实验十 果实的结构和类型 一 实验目的 1 观察各类植物果实，掌握植物果实的 结构及类型。 2 通过常见植物的果实，掌握各类型果 实的特点。 二 实验仪器和材料 刀子、解剖针、托盘 桃、苹果、黄瓜、西瓜、菠萝、大豆、桔子、合欢 、板栗、三角槭、桑、八角茴香、紫薇、棉花、小 麦、无花果、南瓜、茄子、葡萄、油菜、草莓、向 日葵 三 实验内容与方法 （一）果实的结构 分为果皮和种子两部分，果皮可分内、中、外三层 ，例如：桃。 （二）果实类型 1 根据果实来源分 （1）真果：观察桃、杏等果实。 （2）假果：观察梨、苹果、瓜类、菠萝等。 2 根据果实的发育性质划分为： （1） 单果：观察桃、杏等果实。 （2） 聚合果：观察草莓、八角茴香等果实。 （3） 聚花果：观察菠萝、桑葚、无花果等果实。 3 依据果皮的性质和特点划分为： （1）肉果：果实成熟后果皮或果实其他部分肉质 多汁。 A 浆果：观察葡萄、番茄、茄子果实。 B 柑果：柑橘类植物果实称柑果。观察桔子、橙子 等果实横切面，它是由多心皮子房发育而成。 C 瓠果：葫芦科植物的果实称为瓠果。观察黄瓜、 南瓜等果实的横切面或纵切面。 D 梨果：观察苹果、梨的果实的横切和纵切。 G 核果：观察桃、杏、枣等果实的横切和纵切。 （2）干果：果实成熟时，果皮呈干燥状态。有的开 裂，称裂果；有的不开裂，称闭果。 A 裂果：果实成熟后果皮开裂。因构成果实的心皮 数目和开裂方式不同分为： a 荚果：观察大豆、花生、合欢、紫荆的果实。 b 蓇葖果：观察八角茴香、玉兰的果实。 c 角果：观察荠菜、油菜的果实。 d 蒴果：观察棉花、虞美人、紫薇的果实。 B 闭果：果实成熟后果皮不开裂。 a 瘦果：观察向日葵的果实。 b 颖果：观察水稻、玉米的果实。 c 坚果：观察板栗的果实。 d 翅果：观察三角槭、臭椿果实。 四 实验作业 1 绘制你所观察的桃的纵切面。 2 绘制你所观察的苹果横切面。 3 将下列植物名称按照果实类型填到表中。（32种 ） 桃、黄瓜、西瓜、杏、菠萝、榆、大豆、梅、 桔子、合欢、白菜、板栗、柚子、苹果、山楂、三 角槭、桑、八角茴香、紫薇、棉花、小麦、荞麦、 无花果、南瓜、绿豆、牡丹、茄子、葡萄、水稻、 油菜、草莓、向日葵 实验十一 植物细胞死活的鉴定 和植物组织渗透势的测定 一 实验目的 利用质壁分离现象验证植物细胞的 死活及测定植物组织的渗透势，理解植 物组织水势的组成及发生质壁分离现象 的条件。 二 实验原理 生长的植物细胞是一个渗透系统，活细胞的原生质及其表 层具有分别透性，原生质层内部含有一个大液泡，具有一定的 溶质势。当细胞与外界高渗溶液接触时，细胞内的水分外渗， 原生质随着液泡一起收缩而发生质壁分离，其后，当与清水（ 或低渗溶液）接触，或当外面的溶质进入时，具有液泡的原生 质体就又吸水而发生质壁分离复原。 利用植物活细胞的质壁分离及其复原现象，可测定植物组 织的渗透势。当植物细胞或组织放在外界等渗溶液中时，组织 与外界溶液的水分交换达到动态平衡，植物细胞处于初始质壁 分离状态，细胞压力势为零，溶液的渗透势即等于所测植物的 渗透势（压力势为零的水势）。当用一系列梯度浓度溶液观察 细胞质壁分离现象时，细胞的等渗浓度将介于刚刚引起初始质 壁分离的浓度和尚不能引起质壁分离的浓度之间的深液浓度。 代入公式即可计算出渗透势。 三 实验仪器、试剂和材料 培养皿、刀片、烧杯、镊子、载玻片、 盖玻片、解剖针、酒精灯、滴管、移液管 1mol/l蔗糖溶液、0.10.8 mol/l蔗糖溶液 8个梯度的溶液 洋葱鳞茎、紫鸭趾草叶片 四 实验内容与方法 （一）质壁分离及其复原现象 1 撕洋葱外表皮细胞或紫鸭趾草表皮细胞，放于滴有 1mol/l蔗糖中,在显微镜下连续观察细胞的变化，其 中细胞很快会发生质壁分离。 2 观察到质壁分离后，于盖玻片一边小心加清水一滴 ，于对边用滤纸缓缓吸去蔗糖溶液，重复二次，使 质壁分离剂（即高渗的蔗糖溶液）被基本上洗吸掉 。镜检，可看到质壁分离停止进行，相反，带有液 泡的原生质体开始重新吸水膨大，最后又充满整个 细胞腔，这就是质壁分离复原现象。 3 另取一部分制片置载玻片上，先在酒精灯上加热 ，以杀死细胞，再引入高渗蔗糖溶液，观察有无质 壁分离发生。 （二）植物组织渗透势的测定 1 撕大小相近的洋葱外表皮细胞或紫鸭趾草表皮细 胞，迅速分别投入各种浓度的蔗糖溶液中(0.10.8 mol/l蔗糖溶液) ，使其完全浸入，510分钟。 2 从0.5mol/L开始依次取出表皮薄片放在滴有同样 溶液的载玻片上，盖上盖玻片，于低倍显微镜下观 察，如果所有细胞都产生质壁分离的现象，则取低 浓度溶液中的制片作同样观察，并记录质壁分离的 相对程度。实验中必须确定一个引起半数以上细胞 原生质刚刚从细胞壁的角隅上分离的浓度，和不引 起质壁分离的最高浓度。 3 在找到上述浓度极限时，用新的溶液和新鲜的叶 片重复进行几次，直至有把握确定为止。在此条件 下，细胞的渗透势与两个极限溶液浓度之平均值的 渗透势相等。将结果记录下来。 4 计算。测出引起质壁分离刚开始的蔗糖溶液最低 浓度和不能引起质壁分离的最高浓度平均值之后， 可按下列公式计算在常压下该组织细胞质液的平均 渗透势。 计算公式： sRTiC s为细胞渗透势。 R为气体常数=0.083105/LP/molK。 T为绝对温度，单位K，即273+t，t为实验湿度。 I为解离系数，蔗糖为1。 C为等渗溶液的浓度，单位为mol/L。 则： s =0.083105(273+t)1C 五 实验作业 1 绘出发生质壁分离的细胞 2 计算出洋葱或鸭趾草表皮的组织渗透势。 实验十二 植物根系对矿质元素的 选择吸收 一 实验目的 了解生理酸性盐与生理碱性盐的概念 ，并认识植物根系对离子选择性吸收的 生理现象。 二 实验原理 植物根系对不同离子吸收量是不同的，即使是 同一种盐类，对阳离子与阴离子的吸收量也不相同 。本实验是利用植物对不同盐类的阴、阳离子吸收 量不同，使溶液的pH发生改变以说明这一吸收特性 。 三 实验仪器、试剂和材料 pH计或精密pH试纸、移液管、100ml三角烧瓶 0.5mg/ml（NH4）2SO4 、0.5mg/ml NaNO3 小麦幼苗或其他植物的幼苗 四 实验内容和方法 1在实验前约23周培养根系完好的小麦（或其他 植物）植株。 2实验开始时吸取0.5mg/ml浓度的（NH4）2SO4和 NaNO3各100ml分别置于两个100ml三角烧瓶中，另 一三角烧瓶中放蒸馏水 100ml。用 pH计或精密pH试 纸测定以上各溶液和蒸馏水的原始pH值。 3取根系发育完善的、大小相似的小麦3份，每份数 株，但数目相等，分别放于上述3个三角烧瓶中，在 室温下经2一3小时后取出植株，并测定溶液的pH值 。实验结果按下表记录。 植物从盐溶液中吸收离子后溶液pH值的变化 注：为了避免根系的分泌作用影响实验结果，故用蒸馏水作对照，将上 述pH值变化进行修正，即得真实的pH变化。 处处 理 pH值值 放植株前 放植株后 0.5mg/ml(NH4)2SO4 0.5mg/ml NaNO3 蒸馏馏水 五 实验作业 1 根据根对（NH4）2SO4和NaNO3中阴阳离 子的选择吸收所引起的pH值变化，判断植物 根系对离子的选择性。 2 试解释植物根系选择性吸收离子的机制。 实验十三 叶绿体色素含量的测定 分光光度法 一 实验目的 掌握分光光度法对植物叶绿体色素提 取液中叶绿素a和b的浓度及其叶绿素总浓 度和类胡萝卜素的总浓度测定与计算方法 ，以及植物材料中各种色素含量的求算方 法。 二 实验原理 叶绿体色素溶液各组成成分在可见光谱中具有 不同的特征吸收峰。因此，应用分光光度计在某一 特定波长下所测定的吸光度，根据经验公式即可计 算出色素溶液中各色素浓度，不同溶剂所提取的色 素吸收光谱有差异，因此，应使用不同的计算公式 。 叶绿体色素的提取常用丙酮和乙醇有机溶剂。 叶绿体色素80丙酮提取液中叶绿素a和b及类胡萝 卜素分别在 663nm、646nm和470nm波长下有最大 吸收峰，而95乙醇提取液中它们则在665nm石 49nm和470nm波长下具有最大吸收峰，据此所测得 的吸光度值代人不同的经验公式（见结果计算）， 计算出叶绿体色素丙酮（或乙醇）提取液中叶绿素a 和b的浓度及其叶绿素总浓度和类胡萝卜素的总浓度 ，并依据所使用的单位植物组织（鲜重、干重或面 积），求算出色素的含量。 三 实验仪器、试剂和材料 分光光度计、天平、研钵、剪刀、漏斗、滤纸 、棕色容量瓶、吸水纸、擦镜纸和滴管。 80丙酮（或95乙醇）、石英砂和碳酸钙粉。 新鲜（或烘干）植物叶片，如菠菜叶片等。 四 实验步骤和方法 1 色素的提取 称取新鲜（或干材料）的洗净擦于的植物叶片 0.5g（或一定面积），去中脉、剪碎后放入研钵中 ，加少量石英砂和碳酸钙粉及23ml80丙酮（或95 乙醇），冰浴中研磨至组织变白，再加丙酮10ml ，研成匀浆，暗处静置约10min。 将提取液过滤到50 ml棕色容量瓶中，用丙酮反复 冲洗研体与研棒数次并用少量丙酮反复冲洗滤纸和 残渣，直至无绿色为止，以使色素全部转移入容量 瓶。最后用丙酮定容至50 ml，摇匀，并保存于暗处 备用待测。每一材料要做35份，重复提取测定， 以期获得准确的色素含量值。 2 吸光度的测定 将色素提取液重新混匀。 取光径1cm的比色杯，注入上述色素丙酮提取液 ，以 80丙酮注入另一同样的比色杯内作为空白对 照，在波长663、646和470nm下测定吸光度（A663、 A646和A470）。 3 结果计算 依据下列丙酮（或乙醇）提取液中色素浓度 计算公式，分别计算出叶绿素a上的浓度及其叶绿素 总浓度和类胡萝卜素的浓度。 4 注意事项 1 光对叶绿素有破坏作用，实验操作应在弱光下进 行，且应尽量在短时间内研磨。 2 色素提取液若混有其他物质而造成浑浊，将影响 吸光度的测定，应重新过滤或离心。 3 色素吸光度测定前，应按仪器说明及标准叶绿素a 、b对分光光度计的波长进行校正，否则影印叶绿素 含量的测定精度。 五 实验作业 1 计算植物组织中单位鲜重叶绿素a、b和叶绿素、 类胡萝卜素的含量。 2 叶绿素a和b在红光和蓝光区都有吸收峰，可否在 蓝光区的吸收峰波长下进行叶绿素a和b的定量分析 ，原因何在？ 实验十四 种子的形态结构与观察 一 实验目的 1 解剖观察各类植物种子，掌握种子的基本结构 和类型 2 学习实体解剖显微镜的使用方法 二 实验仪器、试剂和材料 显微镜、实体解剖显微镜、吸水纸、培养皿 苏丹、I2KI溶液 大豆、蚕豆、花生、棉花、蓖麻、松的种子和小麦 、玉米颖果 三 实验内容和方法 （一）种子的结构类型 1 双子叶无胚乳种子 （1）解剖观察大豆、蚕豆、花生、棉花的种子，注 意区分种皮、种孔、种脐，胚的胚芽、胚轴（上、 下）、胚根、子叶。 （2）花生做徒手切片，用苏丹染色10分钟，观察 油滴（橙红色），看过用I2KI溶液染色观察蛋白 质。 2 双子叶有胚乳种子 解剖观察蓖麻种子，并进行纵切，区分种皮、 种阜、种孔、胚乳和胚的各部分。 3 单子叶有胚乳种子 解剖观察小麦、玉米颖果的结构，并进行纵切 ，用碘液染色，用实体解剖显微镜观察胚的结构。 4 裸子植物的种子 解剖观察子的结构，区分种皮、胚乳、胚的各 部分。 （二）种子萌发和幼苗形成 每二人领取一培养皿、20粒小麦种子、一张吸 水纸，培养小麦种子萌发，记录萌发情况，一周后 带来观察。记录培养时间、根和芽伸出时间、萌发 种子数等。 四 实验作业 1 绘出你所观察的一种双子叶无胚乳种子的纵切面 。 2 绘出蓖麻种子的外形和纵切面。 3 绘出小麦或玉米种子的纵切面。 实验十五 藻类植物 一 实验目的 1了解原核藻类植物蓝藻门的门特征、 代表种类。 2观察绿藻门、轮藻门、红藻门和褐藻 门的代表种类，掌握各门藻类植物的形态 特征和生活史。 实验十六 真菌及地衣 一 实验目的 1观察真菌各亚门的代表种类，掌握其 特征及生活史。 2观察地衣的代表种类，了解其组成和 结构。 二 实验仪器和材料 显微镜 黑根霉、青霉、香菇、平菇、木耳、银耳、 灵芝、猴头、马勃、黑根霉装片、青霉装片 、酵母菌切片、菌褶的横切片、壳状地衣切 片、叶状地衣切片、枝状地衣切片 三 实验内容和方法 （一）真菌 1 接合菌亚门-黑根霉： （1）用解剖针从馒头上挑取少量的黑根霉，置于载 玻片（滴一滴蒸馏水）上，使其分散开，盖盖玻片 ，放于显微镜下观察。 （2）取黑根霉装片观察，注意其匍匐枝、假根及孢 子囊的构造。 2 子囊菌亚门-青霉： （1）用解剖针从桔子上挑取少量的青霉，置于载玻 片（滴一滴蒸馏水）上，使其分散开，盖盖玻片， 放于显微镜下观察。 （2）取青霉装片和酵母菌的切片观察。 3担子菌亚门 （1）观察香菇、平菇，注意菌环、菌托、菌盖、菌 柄、菌褶， （2）观察菌褶的横切片，区分菌褶的结构（子实层 、子实层基、髓部）。 （3）观察其它常见种类：木耳、银耳、灵芝、猴头 、马勃等标本的观察。 （二）地衣植物 观察壳状地衣、叶状地衣和枝状地衣切片，区分藻 类和真菌以及结构的不同。 四 实验作业 1 绘制你所观察到的黑根霉。 2 绘制你所观察到的青霉。 3 绘制你所观察到的叶状地衣结构。 实验十七 苔藓和蕨类植物 一实验目的 1通过对代表植物的观察，了解苔藓植物 的形态结构、生活史，进而了解它们对陆 生生活的适应结构和在植物界进化中所处 的位置。 2通过观察蕨类植物的代表种类，掌握蕨 类植物的特征。 二 实验仪器和材料 显微镜 葫芦藓整体装片、藓精子器、颈卵器和 孢蒴装片、地钱叶横切片、地钱孢芽杯装片 、地钱雌器托装片、地钱雄器托装片、地钱 孢子体装片、卷柏孢子叶穗的纵切片、蕨孢 子囊群、蕨配子体装片、问荆、节节草、卷 柏、贯众、肿足蕨等腊叶标本 三 实验内容与方法 （一）苔藓植物 1 藓纲：（1）观察葫芦藓整体装片，区分配子体和 孢子体。 （2）观察藓精子器、颈卵器和孢蒴装片。 2 苔纲：（1）观察地钱叶横切片，区分各部分结构 。 （2）观察地钱孢芽杯装片、地钱雌器托和雄器托、 孢子体装片。 （二）蕨类植物 1 观察问荆、节节草、卷柏、贯众、肿足蕨等腊叶 标本。 2 观察卷柏孢子叶穗的纵切片、蕨孢子囊群、蕨配 子体装片。 四 实验作业 1 绘制你所观察到的葫芦藓精子器。 2 绘制你所观察到的葫芦藓颈卵器。 3 绘制你所观察到的蕨孢子囊。 实验十八 校园植物观察 一 实验目的 1 认识校园中常见的植物，熟悉其中文 名称和所属科名。 2 通