金黎明第7章巴比妥类镇静催眠药物的分析.ppt

药物分析 Pharmaceutical Analysis 主讲教师：金黎明 电话E-mail: Dalian Nationalities University 复习 苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析 第一节 结构与性质 第二节 鉴别试验 第三节 特殊杂质与检查 第四节 含量测定 第五节 体内药物分析（自学） KEY WORDS epinephrine non-aqueous titrimetry sodium nitrite 下列苯乙胺类药物，可与三氯化铁试剂显翠 绿色，再滴加氨试液即变紫色，最后变成紫 红色的是 A肾上腺素 B盐酸甲氧明 C盐酸异丙肾上腺素 D盐酸克伦特罗 E盐酸苯乙双胍 练习与思考 下列苯乙胺类药物，可与三氯化铁试剂显深 绿色，再滴加碳酸氢钠溶液，即变蓝色，然 后变成红色的是 A硫酸苯丙胺 B盐酸甲氧明 C盐酸异丙肾上腺素 D盐酸克伦特罗 E盐酸苯乙双胍 练习与思考 练习与思考 有三瓶药物分别为肾上腺素、盐酸异丙 肾上腺素、重酒石酸去甲肾上腺素，请 采用适当的方法将三者区分开。 肾上腺素和盐酸去氧肾上腺素中检查的特殊 杂质是： A水杨醛 B间氨基酚 C对氨基酚 D酮体 E苯甲酸 练习与思考 盐酸甲氧明中检查的特殊杂质是： A酮体 B间氨基酚 C对氨基酚 D酮胺 E苯甲酸 练习与思考 ChP2010收载的苯乙胺类原料药可采用溴量法 测定含量的有： A盐酸去氧肾上腺素 B重酒石酸间羟胺 C盐酸麻黄碱 D盐酸甲氧明 E苯甲酸 练习与思考 练习与思考 ChP2010收载的苯乙胺类拟肾上腺素药物中，除 （ ）外，均要求进行有关物质检查， 其中（ ）选择薄层色谱法， （ ）用纸色谱法，而其他药物均采用（ ）检查有关物质。 盐酸克伦特罗 盐酸去氧肾上腺素 盐酸苯乙双胍 高效液相色谱法 练习与思考 非水溶液滴定法测定苯乙胺类药物含量，常用的溶剂为（ ），滴定液为（ ）。当药物的碱性较弱，pKb为10-12 时，宜选（ ）作为溶剂，pKb12 时，应用（ ）作为溶剂。为了消除药物中盐酸对滴定 的干扰，可加入过量的（ ）溶液。 冰醋酸高氯酸 冰醋酸与醋酐的混合溶液 醋酐 醋酸汞冰醋酸 练习与思考 ChP2010中，盐酸克伦特罗原料药采用亚硝酸钠法 测定含量，用（ ）方法指示终点。永停滴定法 练习与思考 简述溴量法测定苯乙胺类药物的基本原理。 第七章 巴比妥类镇静催眠药物的分析 第一节 巴比妥类药物的结构与性质 第二节 鉴别试验 第三节 特殊杂质检查 第四节 含量测定 第五节 巴比妥类药物的体内药物分析（自学） 第一节 巴比妥类药物的结构与性质 巴比妥酸的巴比妥酸的 5 5，5 5取代物取代物 1 1，5 5，5 5取代物取代物 C C2 2 位硫取代物位硫取代物 母核：巴比妥酸，丙二酰脲的结构母核：巴比妥酸，丙二酰脲的结构 (barbital) (phenobarbital) 典型药物 戊巴比妥 (pentobarbital) 典型药物 (amobarbital) (secobarbital) 典型药物 (thipental sodium) 巴比妥类药物 结构: 丙二酰脲 性质： 丙二酰脲类反应 应用： 鉴别、含量测定 1,3-二酰亚胺 鉴别 弱酸性 苯环、丙烯基、S 鉴别 含量测定 各有特性 结构决定性质 1，3-二酰亚胺基团，能发生酮式-烯醇式 互变异构，在水溶液中发生二级电离 1. 弱酸性 弱酸性弱酸性弱碱性弱碱性 白色结晶白色结晶 易溶于有机溶剂易溶于有机溶剂 易溶于水 H+ 用于：分离、鉴别、检查和含量测定。分离、鉴别、检查和含量测定。 1. 弱酸性 (1)巴比妥类药物的水解 主要是酰亚胺基团的性质，与碱溶 液共沸就可以水解生成氨气，生成的氨 气可使红色石蕊试纸变蓝。反应式如下 ： 2. 2. 水解反应水解反应 (2)巴比妥类药物钠盐的水解 本类药物钠盐的水溶性比较大，在吸湿的情 况下也能水解。水解的速度与温度和pH值有关。 室温和pH10以下时水解较慢，pH 11以上随着碱 度的增加水解速度也随之加快。 3. 与金属离子的反应（丙二酰脲基团） (1)与Ag+的反应 可溶性一银盐 不溶性二银盐 白色 (2)与Cu2+的反应 巴比妥类 + 铜吡啶试液 吡啶 紫色或紫色 硫喷妥钠 + 铜吡啶试液 吡啶 绿色 S S (3)与Co2+的反应 在无水的条件下进行，无水甲醇或乙醇。钴盐为醋酸钴 、硝酸钴或氧化钴；碱以有机碱为好，一般采用异丙胺 。 紫堇色 (4)与Hg2+的反应 白色 氨试液中溶解 4. 与香草醛的反应 丙二酰脲基团中氢比较活泼，可与香草醛在浓 硫酸存在下发生缩合反应，生成棕红色产物。 加乙醇后，其反应产物可转变为紫色蓝色。 v A.H2SO4液 (0.05mol/L,未电离) v B.pH10碱液(一级电 离) v C.pH13NaOH液 (1mol/L,二级电离) 巴比妥类药物的紫外吸收光谱巴比妥类药物的紫外吸收光谱 (nm) 290270250230 0.5 1.0 1.5A A B C 1,5,5-三取代巴比妥类药 物不存在二级电离，最 大吸收波长不变。 5. 紫外吸收光谱特征 硫喷妥的紫外吸收光谱硫喷妥的紫外吸收光谱 HClHCl 溶液溶液 (0.1mol/L)(0.1mol/L) NaOHNaOH 溶液溶液 (0.1mol/L)(0.1mol/L) 5. 紫外吸收光谱特征 6. 薄层色谱行为特征 一般采用对照品比较法，要求供试品 主斑点应与对照品斑点一致。 7. 显微结晶 （1）药物本身的晶型 巴比妥类药物的酸性水 溶液可析出相应巴比妥类药物的特殊结晶。 巴比妥：长方形巴比妥：长方形 苯巴比妥：球形苯巴比妥：球形 花瓣状花瓣状 巴比妥 苯巴比妥 硫酸铜硫酸铜- -吡啶试液吡啶试液 十字形紫色结晶十字形紫色结晶 浅紫色细小不规浅紫色细小不规 则的或类似菱形则的或类似菱形 的结晶的结晶 （2）反应产物的晶型 二、鉴别试验 （一）丙二酰脲鉴别反应 （二）特征基团反应 （三）特征熔点行为 （四）吸收光谱特征 (一) 丙二酰脲鉴别反应 这一鉴别试验已经收载在中国药典附录中的 “一般鉴别试验”项下。 包括银盐反应和铜盐反应，分别生成沉淀和 呈色反应。 （二）特征基团反应 1.利用硫元素的鉴别试验 硫代巴比妥类与巴比妥类的区别 白色 黑色 （二）特征基团反应 2.利用不饱和取代基的鉴别试验 司可巴比妥钠 原理：含丙烯基，可发生加成 或 氧化反应 （碘、溴）（碘、溴） （高锰酸钾）（高锰酸钾） 与与碘试液碘试液反应反应 （二）特征基团反应 3.利用芳环取代基的鉴别试验 a.硝化反应 b.硫酸-亚硝酸钠反应 苯巴比妥与NaNO2-H2SO4反应生成橙黄色橙红色 c.甲醛-硫酸反应 苯巴比妥与甲醛-H2SO4反应生成玫瑰红色产物。 区分苯巴比妥与不含芳环取代的巴比妥类药物。 (三） 特征熔点行为 巴比妥类的钠盐酸 游离巴比妥类药物 过滤 洗涤 干燥 测熔点 （四）吸收光谱特征 一种有效而可靠的定性分析手段。 中国药典收载的巴比妥类药物几乎都 采用红外分光光度法（标准图谱对照法） 作为鉴别手段。 三、特殊杂质检查 特殊杂质：在特定药物的生产和贮存过程中 引入的杂质。 药物中特殊杂质的检查主要是根据药物和杂 质在物理、化学性质上的差异来进行的。 1. 苯巴比妥的特殊杂质检查 乙酰化 主要是控制副产物苯基丙二酰脲。 苯基丙二酰脲是由于中间体（）的乙基化反 应不完全，而与脲素缩合生成的。其酸性比苯 巴比妥强，能使甲基橙指示剂呈红色。 方法：在一定量苯巴比妥供试液中，加入甲基 橙指示剂不得显红色 （1）酸度（指示剂法） （2）乙醇溶液的澄清度 主要是控制苯巴比妥中乙醇不溶性杂质 中间体杂质在乙醇溶液中的溶解度比苯巴比 妥小的特性进行检查。 方法： （3）中性或碱性物质 中性或碱性物质是由中间体（）形 成的酰胺、酰脲或分解产物等杂质，不溶 于氢氧化钠试液但溶于乙醚；而苯巴比妥 具有酸性，溶于氢氧化钠试液，故采用提 取重量法测定其含量。 （杂质） 2. 司可巴比妥钠的特殊杂质检查 （1）溶液的澄清度 此项检查主要是控制水不溶性杂质，巴比妥类 药物的钠盐极易溶于水，因此本品的水溶液应澄 清，否则表明含有水不溶性杂质。 需注意的是，因本品的水溶液易与空气中的二 氧化碳作用，而析出司可巴比妥，故进行该项目 检查时，溶解样品的水应新沸放冷以消除水中二 氧化碳的干扰。 2. 司可巴比妥钠的特殊杂质检查 （2）中性或碱性物质 检查的杂质是合成过程中产生的中性或碱性副产 物以及司可巴比妥钠的分解产物，如酰脲（）、酰 胺（）类化合物。 ()() 2. 司可巴比妥钠的特殊杂质检查 四、含量测定 银量法 溴量法 巴比妥类药物的含 酸碱滴定法 量测定方法 紫外分光光度 提取重量法 HPLC法、GC法 电泳法 （一）银量法 优点优点：操作简便，专属性较强。：操作简便，专属性较强。 缺点缺点：受温度影响较大；以溶液出现浑浊来指：受温度影响较大；以溶液出现浑浊来指 示终点难以观察。示终点难以观察。 1.原理： 巴比妥类 一银盐 二银盐 Na2CO3AgNO3 终点：电位法（AgAg玻璃电极系统）玻璃电极系统） AgNO3 司可巴比妥钠含不饱和键，与溴定量地发生加成反应 （定量过量） Br2 + 2KI 2KBr + I2 （剩余） I2 + 2Na2S2O3 2NaI + Na2S4O6 （二）溴量法（二）溴量法 近终点时近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消 失，将滴定的结果用空白试验校正失，将滴定的结果用空白试验校正 呈弱酸性，可作为一元酸以标准碱液直接滴 定，或在非水溶液中用强碱溶液直接滴定。常 用的方法如下： 1. 在水乙醇混合溶剂中滴定 基于本类药物在水中的溶解度较小，滴定 时多在醇溶液或含水的醇溶液中进行，这样可 避免反应中产生的弱酸盐易于水解而影响滴定 终点。常以麝香草酚酞为指示剂，滴定至淡蓝 色为终点。 （三）酸碱滴定法（酸量法）（三）酸碱滴定法（酸量法） 2. 在胶束水溶液中滴定 表面活性剂是一种所谓“两亲”分子，即其分子是 由亲水基团和亲脂基团两部分组成。当表面活性剂在 水溶液中浓度很低时，基本上呈单分子状态存在，但 当超过某一浓度时（临界胶束浓度），多余的表面活 性剂分子在溶液中不再分散，而是聚集成有一定分子 组成数的聚集物，称为胶束或胶团。 胶束具有增溶作用，水溶液中胶束的存在能使不 溶或微溶于水的有机化合物的溶解度增加，并显著改 变弱酸、弱碱性物质的解离，使其酸碱性增强 本法是在有机表面活性剂的胶束水溶液中进 行滴定，用指示剂或电位法指示终点。常用 的有机表面活性剂有：溴化十六烷基三甲基 苄铵(CTMA)和氯化四癸基二甲基苄铵(TDBA) 。 采用本法测定巴比妥和苯巴比妥的结果 的相对标准差（RSD）均小于0.3%，并优于在 水-乙醇混合溶液中的滴定方法。 2. 在胶束水溶液中滴定 3. 非水溶液滴定法 巴比妥类药物在非水溶液中的酸性增强， 用碱性标准溶液滴定时，终点较为明显，可获 得比较满意的结果。 测定时常用的有机溶剂有二甲基甲酰胺、 甲醇、氯仿、丙酮、无水乙醇、苯、吡啶、甲 醇-苯（15、）58乙醇-氯仿（1 ） 01等；常 用的滴定剂有甲醇钾（钠）的甲醇（或乙醇） 溶液、氢氧化四丁基铵的氯苯溶液等；常用的 指示剂为麝香草酚蓝等，也可用玻璃-甘汞电极 系统，以电位法指示终点。 原理：巴比妥类药物在碱性介质中电离为具有紫 外吸收特征的结构，因而可采用紫外分光光度 法测定其含量。 适用：本法灵敏度高，专属性强，广泛应用于巴 比妥类药物的原料及其制剂的含量测定，以及 固体制剂的溶出度和含量均匀度检查，也常用 于体内巴比妥类药物的检测。 （四）紫外分光光度法 本法是将供试品溶解后，根据溶液的pH，在 最大吸收波长（max）处，直接测定对照品溶液 和供试品溶液的吸收度，再计算药物的含量。 中国药典对注射用硫喷妥钠的含量测定采用本法 1. 1. 直接测定的紫外分光光度法直接测定的紫外分光光度法 2. 2. 提取分离后的紫外分光光度法提取分离后的紫外分光光度法 适用于：含干扰物质的样品 原理：巴比妥类药物具有弱酸性，在氯仿等有 机溶剂中易溶，而其钠盐在水中易溶 （五）HPLC法 多用于制剂及体液中巴比妥类药物的含量测定 如：苯巴比妥、苯妥英、卡马西平的血药浓度监测 色谱条件：色谱柱Agilent ZORBAX SB-C18柱 （4.6mm250mm，5m） 预柱：Agilent ZORBAX SB-C18柱 （4mm4mm，5m） 流动相：水-甲醇-乙腈(45:45:10) 复习 巴比妥类镇静催眠药物的分析 第一节 巴比妥类药物的结构与性质 第二节 鉴别试验 第三节 特殊杂质检查 第四节 含量测定 第五节 巴比妥类药物的体内药物分析（自学） KEY WORDS barbital phenobarbital secobarbital