贝类中麻痹性贝类毒素的测定编制说明.doc

食品安全国家标准 贝类中麻痹性贝类毒素的测定(征求意见稿)编制说明一、 标准起草的基本情况（包括简要的起草过程、主要起草单位、起草人等） 根据国卫办食品函2014386号文件“国家卫生计生委办公厅关于印发食品安全国家标准整合工作方案的通知”中附件4食品安全国家标准整合项目计划，由辽宁出入境检验检疫局负责中华人民共和国国家标准贝类中麻痹性贝类毒素检验方法（即本标准）的起草工作。 被修订标准号：GB/T 5009.213-2008贝类中麻痹性贝类毒素的测定、GB/T 23215-2008贝类中多种麻痹性贝类毒素含量的测定 液相色谱-荧光检测法、SC3023-2004无公害食品麻痹性贝类毒素的测定生物法、SN/T 0352-95出口贝类麻痹性贝类毒素检验方法、SN/T 1735-2006进出口贝类产品中麻痹性贝类毒素检验方法高效液相色谱法。修订根据以被测指标为基础，对相同的被测指标有多个检测方法的，应进行整合的原则，建议整合制定食品安全国家标准 贝类中麻痹性贝类毒素的测定，其中包含四种检测方法：1.小鼠生物法；2.酶联免疫吸附法；3. 高效液相色谱法；4. 液相色谱-荧光检测法。标准的制定过程主要分为标准方法整合、标准编写、不同方法之间互相验证等阶段，形成了标准征求意见稿。标准根据GB/T1.1-2000标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写规则的要求进行编写。主要起草单位：辽宁出入境检验检疫局、深圳出入境检验检疫局、中国水产科学研究院东海水产研究所。二、 标准的重要内容及主要修改情况 本标准适用于贝类及其制品中麻痹性贝类毒素的测定。第一法适用于小鼠生物法测定麻痹性贝类毒素总量；第二法适用于采用酶联免疫吸附法进行麻痹性贝类毒素筛选检测；第三法为常规检测方法，适用于采用高效液相色谱法测定麻痹性贝类毒素总量(STXeq)，以及GTX4、GTX1、dcGTX3、B1、dcGTX2、GTX3、GTX2、neoSTX、dcSTX、STX等组分含量。第四法液相色谱-串联质谱法，作为麻痹性贝类毒素确证方法。本标准是按照GB/T1.1-2009标准化工作导则 第一部分：标准的结构和编写规则和GB/T20001.4-2001标准编写规则 第四部分：化学分析方法的要求进行编写的。标准的编制工作系统研究了国内外标准和相关文献，小鼠生物法等同采用了GB/T 5009.213-2008贝类中麻痹性贝类毒素的测定标准；高效液相色谱法修改采用了美国官方分析化学师学会（AOAC）的标准49.10.03 AOAC Official Method 2005.06 Paralytic Shellfish Poisoning Toxinsin Shellfish。标准第一法小鼠生物法，等同采用了GB/T 5009.213-2008贝类中麻痹性贝类毒素的测定标准。 标准第二法酶联免疫吸附法，修改采用了SN/T 1773-2006进出口贝类中麻痹性贝类毒素检验方法 酶联免疫吸附试验法标准。与SN/T 1773-2006标准相比，增加了“商业化试剂盒若评价技术参数达到本标准的要求则也适合于本标准”内容；在附录中，规定了商业化试剂盒评价技术参数要求。标准第三法高效液相色谱法，等同采用GB/T 23215-2008贝类中多种麻痹性贝类毒素含量的测定 液相色谱-荧光检测法。方法回收率和精密度实验，以不含PSP的元贝和扇贝的食用部分为添加基质，设定了125g/kg（STXeq）、250g/kg（STXeq）、750g/kg（STXeq）、1250g/kg（STXeq）四个添加浓度，每个浓度进行十次实验，测得各种麻痹性贝类毒素的平均回收率为80.9% 89.3 %，变异系数为1.1%13.3%，符合基本规定的要求。验证结果表明，方法平均回收率72.3%92.1%，实验室间变异系数为0.68%9.2 % ，完全满足基本规定的要求 标准第四法液相色谱-串联质谱法，运用液相色谱-三重四级杆串联质谱技术建立了贝类中10种PSP测定方法，能够提供准确的化合物结构信息，提高了定性和定量的准确性。室内和室间验证试验结果表明，方法加标回收率在79%-101%，实验室间相对标准偏差15%，方法样品前处理方法合理，可操作性强，重现性好，检出限、回收率、精密度方面均能满足分析检测的要求。三、 国际标准情况小鼠生物测定法被美国公职分析化学家协会AOAC（959.08）推广为PSP的标准检验方法，同时也是唯一国际大对数多数国家普遍接受的统一方法。在测定方法上，除荷兰采用高效液相色谱法以外的其他国家和组织均用小鼠生物测定法，其中日本、韩国和丹麦三国采用小鼠生物测定法和高效液相色谱法两种方法。现有的对PSP的仪器分析方法中，高效液相色谱（HPLC）法较为成熟，已经有一些国家将HPLC法作为检测PSP的标准方法，如荷兰；而丹麦、英国、日本和韩国则将HPLC法作为小鼠生物测定法的补充验证。 欧洲议会、理事会第2004/853/EC号法规及食品法典委员会CAC CODEX STAN 292法规均规定了麻痹性贝类毒素的限量800微克/千克。食品法典委员会CAC CODEX STAN 292法规中明确规定了麻痹性贝类毒素的官方检测方法为AOAC 49.10.03 Official Method 2005.06