课件：骨髓细胞学检查费鲜明.ppt

骨髓细胞学检查,2019,-,1,主要内容,概述 骨髓细胞形态学检查 血细胞生成发展规律形态特点 细胞化学染色 免疫分型、细胞遗传学分析 血液病的血液学特征(实例),2019,-,2,概 述,骨髓是人出生后的主要造血组织。 骨髓组织 造血微环境：基质细胞、微血管、神经和基质细胞分泌的细胞因子等。 血细胞：充满在微环境中的发育各阶段血细胞。,2019,-,3,骨髓细胞学 细胞形态学：主要检查骨髓中各系列血细胞数量的增减及其比例的改变，形态的异常，可以了解骨髓的造血功能和病理改变。 骨髓形态学检查是诊断、鉴别诊断造血系统疾病的最基本的方法。 细胞化学染色：形态学与化学的结合，采用化学反应原理来定性、半定量和定位细胞各种化学物质。 细胞化学染色是诊断和辅助诊断血液病的重要手段：,2019,-,4,细胞免疫学：采用单克隆抗体和免疫学技术检测细胞表面或内部特异性抗原。 对细胞免疫学分型、血液病的诊断、辅助诊断和鉴别诊断中有重要意义。 细胞遗传学：采用染色体分带技术，对染色体质和量进行分析。 其对遗传性血液病、血液肿瘤的诊断、分型、病因和发病机制研究均具有重要价值。,2019,-,5,骨髓细胞形态学检查的应用,1. 诊断（肯定、提示、符合、疑似、排除性诊断） 确诊疾病： 1.部分造血系统疾病，如各种白血病，再生障碍性贫血等 2.某些非造血系统疾病，如传染病或寄生虫病，如疟疾、黑热病及伤寒等；代谢性疾病，如Gauchers病等；转移性肿瘤等 辅助诊断：某些造血系统疾病，如ITP，溶血性贫血等 鉴别诊断：原因未明，如发热，肝脾淋巴结肿大，骨关节疼痛等 2. 观察疗效和病情变化,2019,-,6,血液科基本操作,骨髓穿刺（扁平骨、短骨和长管状骨近心端） bone marrow puncture 骨髓抽吸（成人：髂骨后上棘，婴幼儿：胫骨粗隆） Bone marrow aspiration 骨髓涂片 Bone marrow smear 骨髓活检 Bone marrow biopsy,2019,-,7,骨髓穿刺术,适应症： 1.外周血细胞数量及形态异常。 2.不明原因的发热、肝、脾、淋巴结肿大。 3.不明原因骨痛、骨质破坏、肾功能异常、黄疸、紫癜等 4. 血液系统疾病定期复查和疗效观察 5.其他诊治需要：活检、免疫学、遗传学、细胞和微生物培养、寄生虫检查等,2019,-,8,禁忌症： 凝血功能障碍：出血或出血倾向，如血友病，DIC等 晚期妊娠：慎重,2019,-,9,骨髓细胞形态学检查的方法,骨髓穿刺 骨髓液涂片 染色:Wright染色 取材好否？ 涂片好否？ 染色好否？ 低倍镜检查 (判断细胞增生程度,巨核细胞,异常细胞) 油镜检查 骨髓象分析与报告 (有核细胞分类计数,观察细胞形态),2019,-,10,标本采集,部位：髂后上棘、髂前上棘、胸骨 量：0.2ml（涂片） 3-5ml （免疫分型、培养等） 穿刺成功标志： 抽取骨髓一瞬间，病人有特殊的疼痛感 抽取的骨髓液内含有骨髓小粒，脂肪滴 显微镜下可见骨髓特有的细胞如幼稚细胞、巨核细胞、浆细胞、组织细胞等 杆状核分叶核，有核细胞多于外周血,2019,-,11,2019,-,12,骨髓标本的分类部位,2019,-,13,骨髓形态学检查的内容,低倍镜检查: 观察取材、涂片、染色情况 骨髓增生程度 巨核细胞 特殊细胞，如转移癌,2019,-,14,骨髓增生程度分级,极度减低 5/HP,增生减低 510/HP,增生活跃 2050/HP,明显活跃 50100/HP,极度活跃 100/HP,2019,-,15,2019,-,16,增生活跃,N:E 1:20 常见正常骨髓 （中年）， 增生性贫血,2019,-,17,增生明显活跃,N:E 1:10 常见增生性贫血， 急性白血病，脾亢， 骨髓增殖性疾病， ITP,2019,-,18,增生极度活跃,N:E 1:1 常见白血病, 尤其 慢性粒细胞性白血病,2019,-,19,增生减低,N:E 1:50 常见再生障碍性 贫血（慢性），粒 细胞减少/ 缺乏 症，骨髓纤维化,2019,-,20,增生明显减低,N:E 1:200 常见再生障碍性贫 血（急性），骨髓 坏死,2019,-,21,骨髓增生程度及常见原因,増生极度活跃: 白血病, 尤其慢性粒细胞性白血病 増生明显活跃: 增生性贫血，急性白血病，脾亢， 骨髓增殖性疾病，ITP 増生活跃: 正常骨髓（中年），增生性贫血 增生减低: 再生障碍性贫血（慢性），粒细胞减少/ 缺乏症，骨髓纤维化、骨髓稀释 增生明显减低: 再生障碍性贫血（急性），骨髓坏死,2019,-,22,巨核细胞计数,2019,-,23,巨核细胞计数,数量: 735只/1.53cm涂片 分类: 原始巨核05, 幼稚巨核010%, 颗粒巨1050%, 产板巨2070 %, 裸核030% 成熟程度：五型中成熟两型所占比例 颗粒巨+产板巨 2/3 产血小板功能：产板巨 1/3,2019,-,24,油镜检查,计数200个有核细胞，有核细胞分类计数 M:E ratio：粒/红比例 各系细胞形态有无异常及有无异常细胞、寄生虫,2019,-,25,骨髓象分析,2019,-,26,骨髓有核细胞的组成,2019,-,27,骨髓各系细胞及其各阶段的比例,粒细胞系: 5060% 随细胞成熟而比例增高 原粒1%,早幼粒5% 红细胞系: 2025% 原红1%, 以中晚幼红为主 淋巴细胞系: 20% 以成熟淋巴细胞为主 单核细胞系: 4% 以成熟为主 浆细胞系: 2% 以成熟为主 其他: 极少量的网状细胞, 内皮细胞, 组织细胞等,2019,-,28,正常骨髓象,1、骨髓增生活跃 2、粒/红比值正常（24：1） 3、粒系占有核细胞的50%60%，原粒1%，早幼粒5%，中、晚幼粒各15%，杆状核多于分叶核，嗜酸粒5%，嗜碱粒1%，细胞形态无明显异常 4、红系占有核细胞的20%左右，原红1%，早幼红5%，以中、晚幼红为主，各为10%，幼稚及成熟红细胞形态无异常,2019,-,29,正常骨髓象,5、淋巴细胞约占有核细胞的20%（小儿可达40%），单核细胞4%及浆细胞2%，以成熟细胞为主，形态无异常 6、巨核细胞735个/全片，以产血小板型为主 7、可见少量非造血细胞 8、无特殊细胞及寄生虫,2019,-,30,正常骨髓象（低倍镜）,2019,-,31,正常骨髓象（高倍镜）,2019,-,32,正常骨髓象（油镜）,2019,-,33,骨髓有核细胞增生程度 （见前述）,骨髓象改变的临床意义,2019,-,34,2.粒/红比例改变,正常比例: 24:1 正常骨髓象，ITP，MM； 粒红两系平行增多, 如红白血病； 粒红两系平行减少, 如再障； 比例增高: 5:1 粒细胞系增多，如急慢性白血病、 急性化脓菌感染； 红细胞系减少，如纯红再障； 比例减低 : 2:1 粒细胞系减少, 如粒缺； 红细胞系增多, 如各种增生性贫血；,2019,-,35,3. 粒细胞系统细胞数量改变,粒细胞增多 （1）原始粒细胞增多为主：急性粒细胞白血病（原粒30%）、慢粒急变期（原粒20% ）、急性粒单细胞白血病。 （2）早幼粒细胞增多为主：早幼粒细胞白血病，粒细胞缺乏恢复期 （3）中性中幼粒细胞增多为主：急粒M2b，慢粒，粒细胞型白血病反应 （4）中性晚幼粒、杆状粒增多为主：慢粒、药物中毒、烧伤、失血、创伤后 （5）嗜酸性粒细胞增多：过敏反应、寄生虫感染、嗜酸性粒细胞白血病、慢粒、淋巴瘤、皮肤病等 （6）嗜碱性粒细胞增多：慢粒、嗜碱性粒细胞白血病、射线照射反应等,2019,-,36,粒细胞系统细胞数量改变,粒细胞减少 粒细胞缺乏症、再障、急性造血停滞,2019,-,37,红细胞系统细胞数量改变,有核红细胞增多 （1）以原始和早幼红细胞增多为主： 急性红血病和红白血病。 （2）以中幼和晚幼红细胞增多为主： 各种贫血、ITP(急性)、真性红细胞增多症、铅中 毒、红白血病。 （3）巨幼红细胞或巨幼样变幼红细胞增多： 巨幼贫、急性红（红白）血病、MDS、白血病化疗后、铁粒幼红细胞性贫血 （4）铁粒幼红细胞增多： 铁粒幼红细胞性贫血、MDS,2019,-,38,红细胞系统细胞数量改变,有核红细胞减少 （1）纯红细胞再障 （2）急性粒细胞白血病未分化型 （3）急性单核细胞白血病未分化型 （4）急淋和慢粒 （5）化疗后,2019,-,39,巨核细胞系统细胞数量改变,巨核细胞增多 （1）骨髓增殖性疾病（PV、CML、原发性血小板增多症、骨纤） （2）急性巨核细胞白血病 （3）全髓白血病 （4）ITP （5）脾亢、急性失血、急性溶血 巨核细胞减少 再障、急性白血病、慢粒、化疗后,2019,-,40,单核细胞系统细胞数量改变,单核细胞增多 （1）以原始及幼稚单核细胞增多为主： 急性单核细胞白血病（原+幼30%）、慢粒急单变、急粒单白血病 （2）以成熟单核细胞增多为主： 慢单、慢性粒单、单核细胞型类白反应、感染,2019,-,41,淋巴细胞系统细胞数量改变,淋巴细胞增多 （1）以原始及幼稚淋巴细胞增多为主： ALL、CML急淋变、淋巴瘤白血病、CLL急变 （2）以成熟淋巴细胞增多为主： CLL、lymphoma、AA、淋巴细胞型类白反应、传染性单核/淋巴细胞增多症、病毒感染等,2019,-,42,其他血细胞数量改变,浆细胞增多、组织细胞增多等,2019,-,43,骨髓报告单,2019,-,44,骨髓细胞形态学检查结果分析 注意事项,有核细胞数量的变化大多数无特异性，相同的变化可能存在于不同的血液系统或其他疾病。 血液病的诊断应先排除其他继发疾病导致的血液细胞形态学的改变。 某一种血液病不可能只有一个血液细胞系统改变，往往是多系统协同变化。 血液病的诊断多基于某些骨髓异常血细胞比例超过某一界值（医学决定水平）。 骨髓细胞形态变化具有复杂性，若BM检查对疾病无确诊价值，应结合临床资料和其他相关检查进行综合分析。,2019,-,45,血细胞的生成、发育规律 及正常形态学特征,2019,-,46,（一）血细胞的生成,所有的血细胞均起源于共同的造血干细胞 具有高度自我更新的能力，以保持干细胞池数量的恒定，维持机体终身的稳定造血； 具有多向分化的能力，即可向各系列祖细胞分化，然后经过增殖、发育和成熟，成为各系细胞。 - 不对称有丝分裂。 造血干细胞：包括全能干细胞（TSC）及由其分化的髓系干细胞和淋巴系干细胞。 受造血微环境、造血细胞生长因子和白细胞介素以及神经和体液因子的调控。,2019,-,47,造血干细胞,数量少，约占骨髓的0.5% 主要在骨髓，少量在外周血（脐带血、动员血等） 具有自我复制和多向分化的能力，是维持正常造血的原因 易受到损害（异常增生或抑制）,导致多种疾病,2019,-,48,Stem cell,2019,-,49,造血干细胞的分化及增殖示意图,2019,-,50,（二）血细胞发育过程中形态演变规律,细胞大小及外形： 大小： 大小 （巨核细胞相反） 外形：圆形不规则性（红细胞始终呈圆形） 细胞核： 大小：大小（巨核细胞相反） 核膜：模糊显著 核仁：有无 染色质：细致稀疏粗糙致密，着色浅深 核形：圆形分叶或不规则形（成熟红细胞无核）,2019,-,51,细胞浆： 量：少多 颗粒：无有，非特异性特异性 染色：深蓝浅染（红细胞渐变红） 细胞核细胞浆：大小（巨核细胞相反）,2019,-,52,（三）血细胞的正常形态学特征,1、红细胞系统 erythrocytes 原红（normoblast） 早幼红（basophilic normoblast） 中幼红（polychromatic normoblast） 晚幼红（orthochromatic normoblast）,2019,-,53,2019,-,54,2019,-,55,2019,-,56,2019,-,57,2019,-,58,2、粒细胞系统 granulocytes 原粒（myeloblast） 早幼粒（ pro myelocyte） 中幼粒（myelocyte）：中性、嗜酸、嗜碱 晚幼粒（metamyelocyte） 杆状核粒（stab granulocyte,band granulocyte） 分叶核（Segmented granulocyte）,2019,-,59,2019,-,60,2019,-,61,2019,-,62,2019,-,63,2019,-,64,2019,-,65,2019,-,66,2019,-,67,2019,-,68,2019,-,69,3. 单核系统 monocytes,2019,-,70,2019,-,71,2019,-,72,2019,-,73,4. 淋巴系统 lymphocytes,2019,-,74,2019,-,75,2019,-,76,2019,-,77,2019,-,78,2019,-,79,5.浆细胞系统 plasmacytes,2019,-,80,2019,-,81,2019,-,82,2019,-,83,6.巨核细胞系统 magakarocytes,2019,-,84,2019,-,85,2019,-,86,2019,-,87,2019,-,88,细胞化学染色,2019,-,89,概述 细胞化学染色的基础是形态学； 不同血细胞内的各种化学成分含量及分布存在差异； 细胞化学成分在病理情况下会发生改变； 细胞化学染色主要检测酶类、糖类、脂类、铁含量及分布；,2019,-,90,（一）过氧化物酶染色 (POX),【原理】 粒细胞及分化较好的单核细胞胞浆内的POX能分解H2O2，产生新生态氧使无色的联苯胺氧化为蓝色联苯胺，后者再与亚硝基铁氰化钠结合形成蓝黑色的颗粒，沉淀于胞浆内。 中性粒细胞含有丰富的POX，主要为髓过氧化物酶（MPO），MPO是中性粒细胞内含量最多的蛋白质。,2019,-,91,正常血细胞POX染色结果,粒细胞系统：除嗜碱性粒细胞和分化差的原粒细胞外，均为强阳性，EOS粒最强；阳性程度随细胞成熟程度增加而增强。 淋巴细胞系统：阴性。 单核细胞系统：多为阴性，少数弱阳性。 红细胞和巨核细胞系统、浆细胞、组织细胞系统：均阴性。,2019,-,92,过氧化物酶,2019,-,93,过氧化物酶染色 (POX)临床意义,POX是鉴别急性白血病细胞类型的首选的、最重要的细胞化学染色方法。 急性粒细胞白血病： 强阳性（颗粒较粗大，呈局灶分布，M3阳性程度高于其余各型） 急性单核细胞白血病： 弱阳性（颗粒细小、稀少、 散在分布） 急性淋巴细胞白血病： 阴性，ALL骨髓中残留的原粒细胞POX可为（+），但比例小于3%。,2019,-,94,注意：POX染色测定MPO的敏感性低于流式细胞术，因此POX染色阴性的患者应以流式细胞术确认。,2019,-,95,（二）苏丹黑染色,【原理】SBB是一种脂溶性重氮染料，可溶于细胞质内的含脂物质，使之呈棕黑色或深黑色颗粒。 【正常细胞反应】脂类物质（中性脂肪、磷脂、糖脂、类固醇）在粒细胞含量丰富，单核少量。SBB与POX基本一致。 【临床意义】同POX染色反应。 【注意事项】 1. SBB特异性POX：POX阴性，SBB可阳性。 3. 细胞化学染色特异性更重要，SBB与POX染色意义基本一致，故临床多选择POX染色。,2019,-,96,（三）中性粒细胞碱性磷酸酶 染色（NAP）,【原理】碱性磷酸酶主要存在于成熟中性粒细胞（分叶核及杆状核）内，在碱性条件下能水解基质液中的-磷酸萘酚，产生-萘酚，其与重氮盐偶联，形成不溶性棕黑色偶氮染料沉淀。阳性反应为胞质中出现灰色到棕褐色颗粒。 成熟中性粒细胞胞浆为阳性，其余细胞为阴性。计数100个成熟中性粒细胞，报告阳性细胞百分率或用，1，2，3，4进行积分值（04分）计算。 【参考范围】成人阳性率1040 ，积分30130分。,2019,-,97,碱性磷酸酶,2019,-,98,NAP临床意义,NAP积分增高: 细菌感染，类白血病反应，慢粒急变，急淋，淋巴瘤，再障，骨髓增殖性疾病（慢性中性粒细胞白血病、骨纤、PV、CML急变，原发性血小板增多症等） NAP积分减低： 慢粒，急非淋，PNH及恶组等 NAP用于鉴别： 慢粒与类白血病反应：（外周血中晚幼粒细胞增多） PNH与再障：（全血细胞减少） 急非淋与急淋：（白血病分类） 细菌感染与病毒感染：（感染症状相似）,2019,-,99,NAP应用的评价 NAP活性受很多生理因素影响，其参考范围因不同实验室而有差别。 NAP可用于相关疾病的诊断和鉴别诊断，但只有积分明显增高或降低时才有重要意义。 NAP在诊断与鉴别诊断价值不是绝对的，应用时应与其他相关指标相结合进行综合分析。,2019,-,100,（四）酯酶染色,不同血细胞所含酯酶不同。 不同酯酶特异性有差异，可分为特异性和非特异性酯酶。 特异性酯酶主要是氯乙酸AS-D萘酚酯酶，其仅存在于粒细胞内，也称为粒细胞酶。 非特异性酯酶（粒、单、淋），根据PH值不同分为： -酸性酯酶：酸性-醋酸萘酚酯酶 -中性酯酶：-醋酸萘酚酯酶 和醋酸AS-D萘酚酯酶 -碱性酯酶： -丁酸萘酚酯酶,2019,-,101,氯乙酸AS-D萘酚酯酶,【原理】血细胞中的氯乙酸AS-D萘酚酯酶（NAS-DCE）水解基质液中的氯乙酸AS-D萘酚，产生AS-D萘酚，进而与基质液中的重氮盐GBC耦联形成不溶性的红色沉淀，定位于细胞质内酶所在部位。 【正常结果】 1.粒细胞系统：原始粒细胞呈阴性（分化差）/阳性（分化好），早幼粒到成熟中性粒、嗜碱粒均为阳性，嗜酸粒部分阳性，其活性均不随成熟度而增强。 2. 单核细胞系统：阴性，个别阳性。 3.其他细胞：均阴性（肥大细胞阳性）。,2019,-,102,主要用于鉴别急性白血病类型，是急性白血病诊断的常规化学染色，区分粒系和非粒系。 （1）急性粒细胞白血病：原始和早幼粒强阳性（少数原粒阴性） （2）急性单核细胞白血病：原始和幼稚单核细胞阴性，个别阳性。 （3）急性粒-单性白血病：部分阳性，部分阴性。 （4）急性淋巴细胞/巨核细胞性白血病：阴性。,NAS-DCE的临床意义,2019,-,103,【应用评价】 NAS-DCE是粒细胞特异酯酶，如有一定数量细胞染色呈阳性，提示白血病细胞存在粒系成分，有助于POX阳性的急粒和急单的鉴别，但均阴性则不能排除粒系(Why?)。 因该检查易存在假阴性和假阳性，在排除的基础上， NAS-DCE染色阳性对诊断粒系很可靠。,2019,-,104,-醋酸萘酚酯酶和氟化钠抑制试验,【原理】 -醋酸萘酚酯酶（ -NAE）又称非特异性酯酶（NSE），能将基质内的醋酸萘酚水解，与重氮染料偶联，形成不溶性的灰黑色或棕黑色沉淀。但在单核细胞内此酶的活性可被氟化钠抑制。故这两个试验常同时进行。 【临床意义】主要用于急粒和急单的鉴别 急单：强阳性（原单可阴性），被NaF抑制（抑 制率大于50%） 急粒：阴性或阳性，不被NaF抑制 急淋：阴性，少数弱阳性，不被NaF抑制,2019,-,105,2019,-,106,（五）糖原染色（PAS）,【原理】 PAS即过碘酸- Schiff（雪夫）反应，过碘酸可将血细胞内的糖原氧化，生成醛基，与Schiff液中的无色品红结合，形成紫红色化合物， 定位于胞质内。,2019,-,107,【正常细胞PAS染色结果】,粒细胞系统：原粒（分化差除外）到成熟粒均阳性，阳性程度随细胞成熟而增强（弥散、细颗粒状）。嗜酸性粒细胞颗粒不着色，胞质为红色；嗜碱粒颗粒红色，胞质不着色。 红细胞系统：均呈阴性。 单核细胞系统：除分化差的原单外，均呈阳性（细颗粒状）。 淋巴细胞系统：大多为阴性，少数阳性（20%）（粗颗粒状或块状）。 巨核细胞系统：巨核和血小板均阳性，成熟度与阳性程度成正比。,2019,-,108,糖原染色(PAS反应）临床意义,1、协助红血病，红白血病的诊断以及与其它类型良性贫血的鉴别： 恶性：红血病，红白血病、MDS有核红细胞PAS强阳性（均匀红色、块状，阳性率和反应强度高） 良性：巨幼贫，IDA、再障、溶贫等呈阴性反应（偶阳性，阳性率和反应强度低） 2、对急性白血病的辅助鉴别：（颗粒大小和分布） -急性粒细胞白血病：阳性反应呈细颗粒状或均匀淡红色 -急性淋巴细胞白血病：原始和幼稚阳性反应物呈粗颗粒状或块状 -急性单核细胞白血病：阳性反应物呈均匀红色或细颗粒状,2019,-,109,【应用评价】 PAS染色最大价值在于诊断红细胞系统恶性疾病，强阳性意义更大。 良性红细胞疾病PAS染色基本为阴性，少数阳性者其阳性率和反应强度均显著低于恶性者。 在急性白血病中，如果PAS染色结果典型，可辅助判断细胞系列，但实际上PAS结果常常不典型。,2019,-,110,（六）铁染色,【原理】 铁（Fe3+）在酸化的亚铁氰化钾溶液中反应，可生成蓝色的亚铁氰化铁沉淀（普鲁士蓝），定位于含铁部位。又称普鲁士蓝反应。,2019,-,111,铁染色,细胞内铁：储存于幼红细胞和红细胞内的铁颗粒，一般油镜计数100个幼红细胞中铁粒幼细胞的阳性率。 铁粒幼红细胞（中、晚幼红细胞）： I 型(12) II (23) III(34)，IV（45） 环形铁粒幼细胞 ：( 5, 绕核1/3以上） 铁粒红细胞 细胞外铁：即储存铁，是储存于骨髓小粒巨噬细胞中的铁， 一般以含铁血黄素的形式存在。（铁蛋白也为储存铁） 报告方式： -、+、+、+、+,2019,-,112,【参考范围】 外铁+，2/3为（+），1/3为（+）； 铁粒幼细胞 1444，以I型为主； 无环形铁粒幼细胞和铁粒红细胞。 实验室不同，参考范围差异较大。,2019,-,113,1 铁粒幼红细胞(细小，1-5个铁颗粒） 2 环形铁粒幼红细胞（粗大、深染，5个以上，绕核1/3以上）,2019,-,114,细胞外铁染色,- 骨髓小粒无蓝色显现 + 有少量铁颗粒，或偶见少量铁小珠 + 有较多的铁颗粒和铁小珠 + 有很多铁颗粒、小珠和少数蓝黑色小块 +有极多的铁颗粒和小珠，并有很多密集成堆的小块,2019,-,115,2019,-,116,铁染色的临床意义,血红蛋白由血红素和珠蛋白组成，而铁是 合成血红素的主要成分。 铁蛋白和含铁血黄素是铁的主要储存形式。 主要用于IDA和SA 、以及其他类型贫血的 诊断和鉴别诊断。,2019,-,117,铁染色的临床意义,2019,-,118,铁染色临床意义,1、缺铁性贫血的诊断及治疗指导 IDA诊断：细胞外铁（-），铁粒幼细胞15% -MDS：难治性贫血伴环状铁粒幼细胞增多者， 环铁粒幼细胞15%,2019,-,119,【应用评价】 1.铁染色是临床应用最广泛的细胞化学染色 之一。 2. 铁染色结果可信度高，尤其是细胞外铁：虽然敏感度不如铁蛋白，但其不受病理因素影响。 3.铁染色是反映机体储存铁的金标准。 4.如果玻璃片受铁剂污染，可导致假阳性；假阴性罕见。,2019,-,120,细胞化学染色小结,细胞化学染色是以形态学为基础，不同细胞系列的化学染色结果既可不同也可相同。 不明原因贫血，应将铁染色作为作为常规检查，必要时加做NAP和PAS。 急性白血病分为急淋（ALL）和急性髓性白血病（AML，M0M7型），骨髓多以原始和幼稚细胞增生为主，细胞染色形态识别容易误判，因此，急性白血病均应做细胞化学染色。 建议急性白血病至少做：POX、特异性酯酶、非特异性酯酶和PAS。 常见急性白血病细胞化学染色结果如下。,2019,-,121,常见急性白血病细胞化学染色结果 组化 急淋 急粒 急单 POX - + + - + AS-D NCE - + -+ NSE - + 不被NaF抑制 + 能被 NaF 抑制 NAP 增加 减少 正常或增加 PAS + 成块或颗粒状 - 或 +，弥漫 - 或 + 呈弥漫性 性淡红色 或颗粒状,2019,-,122,细胞化学染色及急性白血病亚型诊断思路,2019,-,123,细胞免疫分型,细胞免疫分型即细胞免疫标记检测，是利用单克隆抗体和免疫学技术，对细胞表面或细胞质内特异性抗原进行检测，从而分析细胞所属类型、分化程度和功能状态的一种方法。,2019,-,124,细胞免疫分型方法,免疫荧光法: 荧光素+单克隆抗体-标记细胞表面的分化抗原，通过流式细胞仪，观察特异性抗原-分析细胞（所属系列，分化程度） 荧光素：FITC（异硫氰酸荧光素）和PE（藻红蛋白） 免疫酶染色法：APAAP法，PAP法，ABC法,2019,-,125,细胞免疫分型的临床应用,识别细胞系列及细胞亚群cluster differentiation 髓系： CD13（粒细胞和单核细胞强表达）， CD15（粒细胞强表达） CD14和CD33（单核强表达） CD68单核特异表达 其他： CD32，CD65,CD91, CD156,CD166. 淋巴系： T淋巴：CD3（所有T细胞）, CD4（Th细胞） CD8（Tc细胞）， Th/Tc比值：免疫功能评价、疾病诊断、疗效、预后 其他CD1,CD2,CD5,CD7,CD9 B淋巴：CD19和SmIg(特异抗原)， 其他CD10,CD20,CD52,CD77.,2019,-,126,巨核系： CD41/CD61（GpIIb/IIIa，血小板表达）. CD42 红系：血型糖蛋白A/B,H,2019,-,127,识别不同分化阶段的细胞 （1） 造血干细胞：CD34+,CD90+,Lin- （2） 造血干细胞髓系定向：CD34+,CD33+. （3） T淋巴细胞系祖细胞：CD34+、TDT+、 CD10+ （4） B淋巴细胞系祖细胞：CD34+、CD19+,2019,-,128,识别不同功能状态的细胞 记忆T细胞-CD45RO+、CD45RA- 活化T细胞-CD25+、CD2+、 CD54+、 CD58+、CD45RO+、CD45RA-,2019,-,129