课件：第章球菌.ppt

第八章 球菌(coccus) 种类多，分布广，少数为病原性球菌。 化脓性球菌常见种类：葡萄球菌、链球菌 肺炎链球菌、肠球菌 脑膜炎奈瑟菌 淋病奈瑟菌,-,葡萄球菌,链球菌,肺炎链球菌,脑膜炎 奈瑟菌,淋病 奈瑟菌,G+,G+,G+,G-,G-,化脓性感染 食物中毒 烫伤综合征 毒性休克综合征,化脓性感染 猩红热 风湿热 亚急性细菌性心内膜炎,大叶性肺炎 中耳炎,流行性脑 脊髓膜炎,淋病,-,第一节 葡萄球菌属 葡萄球菌属(Staphylococcus)是最常见的化脓性球菌，分布广、大多为腐物寄生菌及属于正常菌群的表皮葡萄球菌，致病的主要是金黄色葡萄球菌。,coccus,2019,-,3,一、金黄色葡萄球菌 （一）生物学性状 1形态：约1m，葡萄串状排列的G+球菌。（阴性、L型）,coccus,-,金黄色葡萄球菌(伤口感染的脓液直接涂片),coccus,-,coccus,-,2.培养： 营养要求不高，直径约2mm，圆形隆起、光滑、有脂溶性色素菌落； 血平板上形成透明溶血环。,coccus,-,金葡菌在血平板上的菌落特征,coccus,-,腐生葡萄球菌在血平板上的菌落特征 （白色或柠檬色，不溶血）,coccus,-,白色葡萄球菌（色素）,coccus,-,3生化反应 致病性菌株分解甘露醇，产酸； 触酶（过氧化氢酶）阳性（链阴性）。,coccus,-,4重要的抗原结构 （1）葡萄球菌A蛋白(SPA) 菌体表面蛋白 ，与人IgG1、IgG2、IgG4的Fc段非特异结合，而Fab仍能与特异抗原结合。利用此原理建立了协同凝集试验，广泛用于微生物抗原检测。 在体内这种SPA与IgG复合物还有抗吞噬作用(封闭了IgG的Fc段）及促细胞分裂等活性。,coccus,-,协同凝集试验的临床应用： 将特异性抗体结合在 富含SPA的金葡菌表面 作为诊断试剂 用于流脑、菌痢 等的诊断。,coccus,-,coccus,-,（2）荚膜多糖：群特异性 促进细菌对细胞及医用导管、生物瓣膜等 的粘附，形成生物被膜(biofilm),是引起医院感 染的重要因素。 金黄色葡萄球菌A群多糖抗原（核糖醇） 表皮葡萄球菌B群多糖抗原（甘油残基）,coccus,-,5分类 按色素、生化反应等表型分类： 金黄色、表皮和腐生葡萄球菌三个种；,coccus,-,金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌 腐生葡萄球菌 菌落色素 金黄色 白色 白色或柠檬色 血浆凝固酶 + 溶血素 + 耐热核酸酶 + SPA + 分解甘露醇 + 噬菌体分型 多数能 不能 不能 致病力 强 弱 无,-,（2）按有无凝固酶分两类：凝固酶阳性的葡萄 球菌可被相应噬菌体裂解，而分4群23型。 在流行病学调查方面等有重要意义。 （3）按核酸的遗传性分型,coccus,-,6抵抗力较强 耐热、耐干燥、耐盐； 对龙胆紫、多种抗生素敏感，但易产生耐药性， 尤其是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）， 已成为医院感染最常见的致病菌。,coccus,-,（二）致病性 1致病物质 （1）凝固酶（coagulase)：能使人或兔血浆发生凝固，是致病性的重要标志。 游离凝固酶：被血浆中凝血酶反应因子（协同因子）激活，形成凝血酶样物质。 试管法检测（血浆凝固）,coccus,-,结合凝固酶（纤维蛋白原受体）， 玻片法检测（细菌凝聚）。,coccus,两种凝固酶呈相平行关系。 保护细菌，抵抗吞噬和杀菌物质的作用； 感染局限化和血栓形成。,2019,-,21,其他酶类 纤维蛋白溶酶（葡激酶）血浆纤维蛋白溶解，利于细菌扩散； 耐热核酸酶：临床上作为测定葡萄球菌有无致病性的重要指标。 透明质酸酶 脂酶,coccus,-,（2）葡萄球菌溶素（staphylolysin) 有、四种。 溶素外毒素、抗原性强 破坏细胞膜的完整性。 （3）杀白细胞素(leukocidin) 破坏中性粒细胞和巨噬细胞，最终导致细胞死亡。 死亡的细胞形成脓栓，加重坏死。,coccus,-,（4）肠毒素(enterotoxin) 有9个血清型，是一组热稳定的蛋白质。 抵抗蛋白酶的水解作用。 食入后引起以呕吐为主的食物中毒。 是一种超抗原 也与生物武器有关，气雾剂的方式，吸入后 使各器官功能受损及休克，持续2周左右， 足以使队伍丧失战斗能力。,coccus,-,（5）表皮剥脱毒素（exfoliatin) 金葡菌质粒编码的蛋白质，两个生物型。 具有丝氨酸蛋白酶功能，使皮肤发生弥漫性 红斑和水疱、表皮脱落（烫伤样皮肤综合征）。 （6）毒性休克综合征毒素-1 （toxic shock syndrome toxin-1,TSST-1）： TSST-1引起毒性休克综合征：发热、皮疹、休克。 发生多器官功能紊乱,coccus,-,2所致疾病：侵袭性疾病和毒素性疾病 （1）侵袭性疾病：导致多部位化脓感染。 局部感染： 疖、痈、毛囊炎、麦粒肿、 伤口化脓等； 各器官感染：气管炎、脓胸、心包炎； 全身感染：败血症、脓毒血症。,coccus,-,coccus,-,coccus,-,（2）毒素性疾病：由外毒素引起 食物中毒：产毒株污染食物，繁殖产毒， 食后16h发生急性胃肠炎，12d可恢复。 烫伤样皮肤综合征：由产生表皮剥脱毒素 菌株引起的感染。 毒性休克综合征：主要由TSST-1引起， 高热，低血压，皮疹、 严重时出现休克。,coccus,-,（三）免疫性 天然免疫起重要作用。 感染后建立的特异性免疫力不强， 不足以预防再次感染。,coccus,-,（四）微生物检查法,标本,脓汁、血液,分离培养,凝固酶 甘露醇,直接涂片镜检,革兰阳性葡萄串状排列,生长现象,脂溶性色素,生化反应,溶血现象,耐热核酸酶,coccus,-,2分离培养与鉴定 标本接种血平板（血标本需先经增菌），37 24h培养，观察菌落特征。 致病性鉴定：金黄色色素（+） 透明溶血环（+） 凝固酶 （+） 耐热核酸酶（+） 甘露醇分解（+） 3. 药敏试验：必须做,Coccus,-,4、 肠毒素检测 标本：呕吐物，粪便、剩余食物等。 方法： ELISA方法：查Ag，敏感、快速。 分子生物学技术：16S rRNA核糖体分型、 PCR分析细菌质粒和产毒菌株DNA。,coccus,-,（五）防治原则 1、一般性预防： 2、治疗-抗生素 （必须做药敏） 3、自身菌苗或 类毒素治疗疗法,Coccus,-,防治原则,防,注意 消毒隔离,防止 医源性感染,防止 耐药性产生,治,抗菌素 药敏试验,耐药性转移,Coccus,-,二、凝固酶阴性葡萄球菌（coagulase- negative staphylococci,CNS） 过去认为只有金葡菌才具有致病性，而CNS是 人类无害的共栖菌，但近年来临床和实验室检测 结果证实：CNS已成为hospital infection常见病 原菌。而且耐药菌株比金葡菌更多见。 种类：表皮、腐生、溶血、人葡萄球等30余种。,Coccus,-,致病性 条件致病：以表皮葡萄球菌常见，抵抗力低下 或进入非正常寄居部位时引起感染。 常见的有： 1、泌尿系感染青年女性急性膀胱炎的主要病菌。 2、细菌性心内膜炎安装人工心脏瓣膜者。 3. 败血症特别是新生儿。 仅次于大肠埃希菌和金葡菌,Coccus,-,4、术后及植入医用器械引起的感染 股骨头、心脏起搏器安装所致的感染多数是由CNS引起。已成为主要医学问题。 CNS产生的粘质物，牢固附着于植入性医用器械，并保护细菌免受抗生素和免疫因素的作用。,Coccus,-,据美国CDC统计，CNS在各类感染中 比例（10.02%）仅次于大肠埃希菌(19.2%), 居第二位。 致病机制-细胞壁外的粘质物 粘附定植,Coccus,-,微生物学检查 表皮和腐生葡萄球菌是最常见的两种CNS，它们与金葡菌的鉴别及它们两者的鉴别应从色素、凝固酶产生、甘露醇发酵等方面。,Coccus,-,第二节 链球菌属（Streptococcus) 广泛分布于自然界、人及动物粪便和健康人鼻咽部，少数致病（对人致病的主要是A群链球菌和肺炎链球菌）。,-,链球菌分类（常用以下三种方法） 1、按溶血现象分： 甲型溶血性链球菌，草绿溶血环、条件致病。 乙型溶血性链球菌，透明溶血环，致病性强。 引起人和动物多种疾病。 丙型链球菌， （-）， （-）。,-,-溶血,-溶血,不溶血,甲型溶血性链球菌,乙型溶血性链球菌,丙型链球菌,-,2019,-,44,2、按抗原结构分类 按细胞壁中多糖抗原不同分群：A、B、C、 20个群。 表面蛋白抗原（M）分型：A群100个型 B群4型 C群13型,-,抗原分类,分20个群， （A群） (溶血性链球菌或化脓性链球菌）,根据蛋白抗原（M） 进一步分型,荚膜,细胞壁,蛋白质,多糖,肽聚糖,细胞膜,细胞质,-,3. 按生化反应分类 链球菌不分解菊糖，不被胆汁溶解 如：根据对氧的需要分三类， 其中的厌氧菌一般为口腔、消化道、 泌尿生殖道部位的正常菌群。特定条 件下才致病。,-,一、A群链球菌(group A streptococcus) 是链球菌中致病力最强的细菌。 占链球菌感染的90%。 （一）生物学性状 1.形态染色：为链状排列的球形或卵圆形，G+ ，幼龄菌有荚膜,-,-,肉汤培养基中的镜下形态 （革兰染色）,-,2. 培养特征 营养要求较高，菌落小（0.50.75mm），灰白、光滑型，有宽而透明溶血环。 3. 生化反应 不分解菊糖、不被胆汁溶解特性用于鉴别甲链和肺炎链球菌。,-,肺炎链球菌胆汁溶解试验阳性（澄清、透明） 链球菌胆汁溶解试验阴性（混浊）,-,4. 抗原构造复杂,荚膜,蛋白质,多糖,肽聚糖,细胞膜,细胞质,菌毛样结构 脂磷壁酸 F蛋白,细胞壁,多 糖：（C抗原） 蛋白质：（M、T、R、S抗原）,-,（二）致病性 1、致病物质 （1）胞壁成分 1）粘附素：LTA与M蛋白共同组成菌毛样 结构，粘附组织细胞；F蛋白能与上皮细胞 表面纤维粘连蛋白结合。利于定植和繁殖。,-,2）M蛋白：主要毒力因子，抗吞噬作用 与某些超敏反应疾病发生有关。 3）肽聚糖：具有致热、溶解血小板 等作用。,-,（2）外毒素类 1）致热外毒素（pyrogenic exotoxin), 又称红疹毒素或猩红热毒素。 有A、B、C三个血清型 抗原性强，有超抗原作用 可直接作用于下丘脑引起发热反应,-,2）链球菌溶素（streptolysin) 溶解红细胞，破坏白细胞和血小板。 SLO： 对O2敏感,SH- -SS-失活； 对中性粒细胞、心肌有毒性； 抗原性强 SLS： 对O2稳定（菌落周围溶血环）； 对白细胞(损伤溶酶体）和 对多种组织细胞有破坏作用； 无抗原性。,-,（3）侵袭性酶类：均为扩散因子 透明质酸酶 链激酶（streptokinase;SK）：亦称溶 纤维蛋白酶，溶解血块或阻止血浆凝固，有利 于病菌扩散。 （r-sk治疗急性心梗）,-,链道酶（streptodornase;SD） 亦称DNA酶，降解脓液中高粘性的DNA， 脓液稀化，病菌扩散。 （SK、SD酶制剂可提高抗菌药物疗效）,-,2所致疾病 A群可经多途径感染，致三类疾病： 化脓性感染：淋巴管炎,淋巴结炎，蜂窝织炎、坏死性筋膜炎（广泛性肌肉和脂肪坏死）、产褥热、扁桃体炎，咽峡炎，鼻窦炎等。,-,下肢蜂窝织炎,-,自80年代以来，欧美及亚洲一些国家相继报道由A群链球菌变异株感染引起的重症猩红热、急性风湿热、菌血症、肌炎、坏死性筋膜炎（NF）等病例明显增加，尤其是由于A群链球菌变异株能迅速破坏组织，引起NF和肌炎而被称为“食肉菌”。 其中一部分病人往往伴有中毒性休克症状，被称为链球菌中毒素休克综合征，本病病情严重，病死率很高。,-,A群链球菌变异株引起的坏死性筋膜炎（NF）和肌炎,-,中毒性疾病：猩红热（发热、咽峡炎、 全身弥漫性皮疹）、 链球菌毒素休克综合征。 超敏反应性疾病 急性肾小球肾炎（M12、M4、M2、M49型）； 风湿热（M18、M3、M5）。,-,（三）免疫性 A群感染后，不同型的M蛋白均可诱导产生免 疫干扰素，可大大增强吞噬细胞活性。 猩红热病后可建立牢固的同型抗毒素免疫。 由于A群型别多，故可反复感染。,-,（四）微生物学检查法 1.标本：脓汁、鼻咽拭子、血液等。 2直接涂片镜检：根据菌体特征作初步诊断。 3分离培养与鉴定 注意观察菌落特征 透明溶血应与金葡菌鉴别：触酶试验（-）； 草绿色溶血应与肺炎链球菌鉴别：胆汁溶菌试验（-）,-,4. 氨基肽酶检测（PYR试验） A群（化脓性链球菌）阳性 咽峡炎链球菌阴性,-,5.血清学试验：抗链球菌溶素O试验 （antistreptolysin O test，ASO tast):抗O试验 测患者血清中抗O抗体 250单位左右：辅助诊断风湿热。 400单位：活动性风湿热。,-,（五）防治原则 一般预防 1、对急性咽峡炎和扁桃腺炎患者，应彻底治疗, 以防止肾小球肾炎、亚急性细菌性心内膜炎等的 发生; 2、建立无菌观念，进行无菌操作等。 治疗：青霉素G作为首选药物。,-,肺炎链球菌电镜图,二、肺炎链球菌,2019,-,70,肺炎链球菌,2019,-,71,三、其他 1、B群链 2、D群链 3、甲型溶血链球菌，对人致病的 主要有： 变异链球菌-与龋齿的发生关系密切。 可引起亚急性细菌性心内膜炎,-,脑膜炎奈瑟菌N.meningitidis,是流行性脑脊髓膜炎(流脑）的病原体。,-,（一）生物学性状 1、形态与染色 肾形、成双排列、凹面相对、G-。 新分离出的菌株有荚膜和菌毛。 2、培养：专性需氧 要求高，巧克力色培养基 透明、露滴状菌落，不溶血 有自溶现象,2019,-,74,脑膜炎奈瑟菌电镜图,2019,-,75,3、抵抗力很弱 体外难存活,室温3h死亡 怕冷怕干燥，送检标本保温、保湿、迅速、易自溶。,2019,-,76,（二）致病性与免疫性 1、致病物质 菌毛(粘附) 荚膜多糖(抗吞噬，群特异性抗原) 内毒素（endotoxin）,2019,-,77,荚膜多糖的性质,抗吞噬 是抗原，引起体液免疫 在脑膜炎病人的脊髓液中可检测 作为抗原制作成疫苗,2019,-,78,2、所致疾病,传播方式飞沫（airborne droplets） 传染源病人或带菌者（carrier） 普通型 占90左右 临床表现 暴发性 少见 慢性败血症型 少见,2019,-,79,脑膜刺激症,颈项强直,2019,-,80,3、免疫性,儿童(6个月-2岁半)，发病率高 体液免疫为主,2019,-,81,（三）微生物学检查,标本,分离培养与鉴定,脑脊液、血液、出血点渗出液、鼻咽拭子 保暖、保湿、立即送检，培养基预温,直接涂片镜检,中性粒细胞内、外有革兰阴性双球菌，可作出初步诊断。,巧克力（色）培养基,快速诊断,对流免疫电泳，SPA协同凝集试验,-,脑脊液、瘀血点,血液,分离培养 （卵黄双抗平板）,增菌培养,直接涂片染色,分离培养 （巧克力色平板）,可疑菌落、盐水自凝,无自凝,报告阴性,涂片染色,生化反应,自凝、色素,初步报告,鼻咽拭子,生长特性,血清学分群,2019,-,83,（四）防治原则 荚膜多糖疫苗，保护率90%以上。,2019,-,84,淋病奈瑟菌,俗称淋球菌，引起的