课件：第十一章革兰氏阴性需氧杆菌.ppt

第十一章,革兰氏阴性需氧杆菌,2019,-,1,重要的革兰氏阴性需氧杆菌 布氏杆菌属 伯克氏菌属 假单胞菌属 波氏菌属 弗朗西斯菌属,2019,-,2,第一节 布氏杆菌属（Brucella）,布氏杆菌是多种动物和人布氏杆菌病的病原。该菌不仅危害畜牧生产，而且严重损害人类健康，因此在医学或兽医学领域都极为重视。,2019,-,3,一、主要生物学特性 （一）形态及染色 球杆状或短杆状，长0.61.5m，多单在。不形成芽孢和荚膜，无鞭毛不运动。革兰氏染色阴性。 柯氏染色法 布氏杆菌呈红色，其他菌呈绿色或蓝色。,2019,-,4,布氏杆菌,2019,-,5,（二）生长要求与培养特性 生长要求 初代分离营养要求较高，培养基中常需加入血清、血液、肝汤、葡萄糖或泛酸钙和赤藓醇等。 需氧，适温37，最适pH6.67.4。 流产布氏杆菌和绵羊布氏杆菌初代分离时尚需510CO2环境。,2019,-,6,培养特性 初次分离时生长缓慢，需510d甚至2030d才能长出菌落，但实验室传代保存的菌株，培养4872h即可生长良好。 肝汤肉汤 呈轻微浑浊生长，无菌膜。但培养日久，可形成菌环。 血清肝汤琼脂 形成无色透明、隆起、光滑、湿润、有光泽、边缘整齐的圆形小菌落。直径0.51.0mm。,2019,-,7,（三）生化反应 本菌能分解尿素，能产生硫化氢。根据不同生物型产生硫化氢的情况、脲酶作用时间和对碱性染料抑制作用的敏感性不同，可鉴别不同种型的布氏杆菌。,2019,-,8,（四）种和生物型,2019,-,9,（五）抗原性 布氏杆菌具有A和M两种表面抗原，两者的含量在不同的种型间有差异。流产布氏杆菌以A抗原为主，马尔他布氏杆菌以M抗原为主，而猪布氏杆菌两种抗原含量相近。 A抗原和M抗原分别能与相应的单相抗血清发生凝集反应。可用凝集试验鉴别两种不同的抗原。,2019,-,10,二、致病性 本菌致布氏杆菌病，可感染60多种动物，包括人类、各种家畜、野生哺乳动物、啮齿动物、鸟类、爬虫类、两栖类和鱼类。 细菌通过皮肤、口腔、眼结膜、阴道粘膜等部位侵入体内。 多数动物为隐性感染。 实验动物中，豚鼠最易感，小鼠和家兔也可感染。,2019,-,11,本病特征 母畜 生殖器官和胎盘发炎，引起流产、不孕和多种组织的慢性炎症（如慢性子宫内膜炎、乳房炎、关节炎等）。 公畜 睾丸炎、副睾炎 幼畜 关节炎,2019,-,12,流产母牛从阴道排出污灰色或棕红色有恶臭的分泌物,2019,-,13,病母牛流产，产出发育较为完全的死胎,2019,-,14,病牛流产，产出发育不全的胎儿，全身肿胀，有出血斑,2019,-,15,流产的胎儿及胎衣,2019,-,16,胎衣水肿增厚，呈胶样浸润，子叶上有出血,2019,-,17,感染羊阴囊胀大、水肿,2019,-,18,病公猪睾丸肿大,2019,-,19,病猪睾丸萎缩,2019,-,20,2019,-,21,2019,-,22,2019,-,23,病猪关节肿胀,2019,-,24,三、微生物学诊断 布氏杆菌病常表现为慢性或隐性感染，其诊断和检疫主要依靠血清学检查及变态反应检查。 细菌学检查仅用于发生流产的动物和其他特殊情况。,2019,-,25,（一）细菌学检查 1、病料 流产胎儿的胃内容物、胎盘、羊水、阴道分泌物、乳汁和尿液等。 2、诊断方法,病料,柯氏染色,涂片,镜检,分离培养,纯培养,鉴定,豚鼠,血清抗体,2019,-,26,（二）血清学检查 1、用已知抗体检测抗原 用已知抗体检查病料中的布氏杆菌，或鉴定分离菌是否为布氏杆菌可用： 荧光抗体技术 反向间接血凝试验 间接炭凝集试验 免疫酶组化法,2019,-,27,2、用已知抗原检测抗体 动物感染该菌715d出现抗体，检测抗体是布病诊断和检疫的主要手段。 方法： 玻板凝集试验 虎红平板凝集试验 乳汁环状试验 试管凝集试验 补体结合试验,2019,-,28,试管凝集试验 操作按检疫规程进行。 牛、马、骆驼血清凝集价1:100时判为阳性，1:50为可疑。 羊、猪、狗等血清凝集价1:50为阳性，1:25为可疑。 可疑病畜于34周后采血重检，如仍为可疑反应，牛、羊即可按阳性处理；猪、马则须视情况而定。,2019,-,29,虎红平板凝集试验 取被检血清和虎红平板抗原各0.03ml，滴加于玻板上，混匀，在410min内出现任何程度凝集者即为阳性反应。 乳汁环状试验 为检查新鲜乳汁中抗体的方法，操作简便，准确性较高，常被用于畜群布氏杆菌病的监测。,2019,-,30,补体结合试验 特异性和敏感性均较凝集试验高，是慢性布氏杆菌病一种可靠的诊断方法，已作为世界各国清除病畜的必要手段。 规定1:10被检血清阻止溶血在50以上，即为阳性反应。因补体结合反应的操作方法复杂，只在特殊情况下才应用。,2019,-,31,（三）变态反应检查 变态反应现象一般在感染后的2025d出现，因此不宜作早期诊断。本法适合于动物的大群检疫，主要用于绵羊和山羊，其次为猪。 检测时，将布氏杆菌水解素0.2ml注射于羊尾根皱襞部或猪耳根部皮内，24及48h后各观察反应一次。若注射部发生红肿，即判为阳性反应。此法对慢性病例的检出率较高。,2019,-,32,四、免疫防治 我国目前用的疫苗： M5弱毒活菌苗 可用于牛、羊和鹿布病的预防。皮下注射或气雾免疫。免疫期羊1年半，牛、鹿各为1年。 M90弱毒活菌苗 同M5弱毒活菌苗 。 S2弱毒活菌苗 可用于猪、羊、牛等动物，甚至可以接种怀孕动物而不引起流产。免疫方法采用饮水、气雾和皮下注射3种。免疫期猪为1年，牛和羊均为2年。,2019,-,33,第二节 伯克氏菌属（Burkholderia）,是新建立的一个属，该属成员来自假单胞菌属群，现有30多种细菌，对人畜致病的主要有鼻疽伯克氏菌及伪鼻疽伯克氏菌。,2019,-,34,一、鼻疽伯克氏菌（B.mallei） 鼻疽伯克氏菌，原名鼻疽假单胞菌，惯称鼻疽杆菌，为马、骡、驴等单蹄兽鼻疽病的病原体，也能感染人及其他家畜和多种野生动物。此病可呈急性或慢性经过，病变特征为皮肤、鼻腔粘膜、肺脏及其他实质器官形成典型的鼻疽结节和溃疡。,2019,-,35,（一）形态及染色 G中等大小杆菌，无芽孢、无荚膜、不运动。单独散在。美蓝染色可见异染颗粒，是本菌的形态特征。,2019,-,36,（二）生长要求及培养特性 生长要求 专性需氧，普通培养基中生长缓慢，加入适量甘油、血红蛋白、血液、血清或葡萄糖可促进生长，适温37，最适pH为6.46.8。,2019,-,37,培养特性 甘油肉汤 均匀浑浊生长，并逐渐形成灰白色粘稠沉淀，1015d后液面形成灰白色菌环或菌膜。 甘油琼脂 2448h后，形成灰白色至灰黄色中等大小菌落，直径2-3mm。 马铃薯琼脂斜面：48h后，可出现棕黄色蜂蜜样的粘稠菌苔，随着时间的延长色泽逐渐变深。,2019,-,38,（三）致病性 本菌在自然条件下主要感染马、骡、驴等单蹄兽，引起鼻疽病。 骆驼、犬、猫等家畜以及狮、虎、豹、狼、狐、貂等野兽也可感染。牛、猪、绵羊、山羊及禽类不感染。 人类偶尔也可经创伤或吸入含菌材料而受感染，并引起致死性疾病。,2019,-,39,实验动物猫和仓鼠最易感，豚鼠次之。 接种细菌于雄性豚鼠腹腔后可引起典型的睾丸炎，睾丸肿胀化脓而后破溃，此反应称为：Strauss反应，具有一定诊断价值。,Strauss反应,2019,-,40,（四）微生物学诊断 包括细菌学检查、血清学检查和变态反应检查。 在进行大规模检疫时主要采用临床检查、变态反应和补反相配合的检查方法，其中任何一种呈阳性，都定为鼻疽病马。 而细菌学检查只有在特殊病例才被应用。,2019,-,41,1、变态反应检查 是鼻疽诊断和检疫最常用的方法，所用诊断试剂为鼻疽菌素（mallein）。 马感染鼻疽菌后23周,对鼻疽菌素呈现阳性反应，以后随着病程的发展反应逐渐增强。病马保持变态反的时间有的可达810年，甚至终生。因此，该方法在鼻疽诊断、检疫和流行病学调查上是一种必不可少的手段。,2019,-,42,变态反应诊断 点眼反应 眼睑试验 皮下试验 皮肤试验 喷雾诊断 其中以点眼法最为常用。为我国检疫规程主要采用方法。,2019,-,43,点眼法 是将鼻疽菌素34滴滴入马匹一则眼结膜囊内，分别于点眼后3、6、9及24h观察反应。如眼结膜红肿并排出脓性分泌物，即为阳性反应；结膜无反应或轻度潮红、流泪或有少量的粘性分泌物判为阴性。,2019,-,44,点眼法操作简便，特异性和检出率都很高，无论是对急性、慢性以及开放型和隐性感染的马匹均可检出。故此法最适合于畜群大批检疫，尤其是以56d的间隔反复点眼，检出率更高。所以点眼一般连续3次，每次间隔56天。 点眼法对骡子的检出率较低。驴的眼结膜对鼻疽菌素不敏感，一般检不出。此外，12的幼马驹眼结膜对鼻疽菌素也不敏感。,2019,-,45,马、骡三次点眼检出率,2019,-,46,2、血清学检查 常用补体结合反应。此法特异性很高，凡补反呈阳性的马，剖检时9599都有鼻疽病变。但本反应检出率较低，只能检出大多数活动型鼻疽马；而对于点眼阳性但无临床症状的马只能检出1025左右。因此，补反只能作为鼻疽菌素点眼的一种辅助诊断方法，用来检出其中的活动型病马，而不能代替鼻疽菌素点眼试验。,2019,-,47,五、免疫防治 对于鼻疽免疫，迄今为止还没有研制出可供实用的有效菌苗。一般防制措施是采用全面检疫，然后将检出的开放性鼻疽病马予以扑杀或隔离治疗后划地使役，将检出的非开放性阳性病马划地隔离使役，并培养健康幼驹以更新畜群。,2019,-,48,第三节 假单胞菌属(Pseudomonas),假单胞菌为专性需氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。本属细菌种类繁多，广泛存在于土壤、水、植物及腐物中，多为条件致病菌，与多种食物的腐败有关。与动物疾病有关的主要有铜绿假单胞菌。,2019,-,49,一、铜绿假单胞菌 铜绿假单胞菌（P.aeruginosa），惯称绿脓杆菌，因能产生绿色水溶性色素，感染创口时可形成绿色脓汁而得名。 本菌分布广泛，土壤和水中、人畜肠道及皮肤亦有存在是化脓性感染及烧伤感染的常见菌。,2019,-,50,（一）主要生物学特性 革兰氏阴性杆菌1.5-3.0m，无芽孢，一端单鞭毛 专性需氧，营养要求不高 最适温度30-37，42生长，37不生长。 产生荧光素和蓝绿色水溶性绿脓素，培养物呈蓝绿色。 培养物有生姜气味。,2019,-,51,（二）致病性 本菌能感染多种动物能，包括哺乳类、禽类、爬行类和鱼类。 马 流产、化脓性肺炎 猪 坏死性肺炎、坏死性肠炎 绵羊 “绿毛病” 牛 创伤性心包炎、犊白痢、牛乳腺炎 兔、豚鼠、小白鼠 等实验动物易感， 局部脓肿，败血症 人类 感染多继发于烧伤、外伤等,2019,-,52,（三）微生物学诊断 1、细菌学诊断 2、PCR技术诊断,2019,-,53,第四节 泰勒菌属（Taylorella),本属细菌为革兰氏阴性球杆状细菌，包括2个种： 马生殖道泰勒菌(Tequigenitalis) 驴生殖道泰勒菌（Tasinigenitalis） 前者过去归于嗜血杆菌属，旧名为马生殖道嗜血杆菌，致马化脓性子宫炎。后者新近在美国报道，未发现有致病性。,2019,-,54,一、主要生物学特性 菌体常为球杆状，大小为0.8m0.5m。 革兰染色阴性，两级着色。 兼性厌氧，无运动力。 不溶血。 对营养要求苛刻，培养困难，生长缓慢。 用马血巧克力琼脂置CO2中培养，48h可见直径小于1mm的细小、灰白色菌落，继续培养，菌落直径可增至2-3mm。 麦康凯培养基不生长。,2019,-,55,二、致病性 马生殖道泰勒菌自然条件下只感染马。引致马化脓性子宫内膜炎、宫颈炎和阴道炎。主要通过交配和人工授精传染。 母马感染后数日内即发生化脓性子宫炎，排出大量脓性分泌物，当子宫内膜康复后数周至一年，仍可从阴道内分离到本菌。母马表现为暂时性不育，怀孕母马偶尔在怀孕60d内流产，也可产下活的带菌马驹。 公马的包皮带菌，但无症状。,2019,-,56,后面内容直接删除就行 资料可以编辑修改使用 资料可以编辑修改使用 资料仅供参考，实际情况实际分析,感谢您的观看和下载,The user can demonstrate on a projector or computer, or print the presentation and make it into a film to be used in a wi