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文档简介

细胞工程精选大题例:(2018全国卷III)2018年细胞期刊报道,中国科学家率先成功地应用体细胞对非人灵长类动物进行克隆,获得两只克隆猴“中中”和“华华”。回答下列问题:(1)“中中”和“华华”的获得涉及核移植过程,核移植是指_。通过核移植方法获得的克隆猴,与核供体相比,克隆猴体细胞的染色体数目_(填“减半”“加倍”或“不变”)(2)哺乳动物的核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植,胚胎细胞核移植获得克隆动物的难度_(填“大于”或“小于”)体细胞核移植,其原因是_。(3)在哺乳动物核移植的过程中,若分别以雌性个体和雄性个体的体细胞作为核供体,通常,所得到的两个克隆动物体细胞的常染色体数目_(填“相同”或“不相同”),性染色体组合_(填“相同”或“不相同”)。【答案】(1)将动物的一个细胞核,移入一个已去掉细胞核的卵母细胞不变(2)小于胚胎细胞分化程度低,恢复全能性相对容易(3)相同不同【解析】(1)核移植是指将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎,这个胚胎最后发育成为动物个体;通过核移植方法获得的克隆猴的细胞核来自供体,因此克隆猴体細胞的染色体数目和供体一致;(2)胚胎细胞核移植的难度小于体细胞核移植,其原因是动物胚胎细胞分化程度低,恢复其全能性相对容易;(3)哺乳动物雌性个体和雄性个体的体细胞染色体常染色体相同,性染色体前者是XX,后者是XY,因此分别以雌性个体和雄性个体的体细胞作为核供体,通常所得到的两个克隆动物体细胞的常染色体数目相同,性染色体组合不同。模拟精做1(2019届宁夏吴忠市高三上学期期末考试(一轮联考))Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图:(1)Rag2基因表达的场所最可能在_(填写器官)(2)步骤中,重组胚胎培养到_期时,可从_分离出ES细胞。(3)步骤中,需要构建含有基因Rag2的表达载体。可以利用_扩增Rag2基因片段。用 HindIII和PstI限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段。为将该片段直接连接到表达载体,所选择的表达载体上应具有_和_的酶切位点。(4)为检测Rag2基因的表达情况,可提取治疗后小鼠骨髓细胞的_,用_进行杂交实验。【答案】(1)骨髓或胸腺(2)囊胚内细胞团(3)pcr 技术 Hind Pst(4)蛋白质 Rag2蛋白的抗体【解析】(1)Rag2基因表达的场所最可能在骨髓或胸腺。(2)内细胞团位于囊胚中,所以步骤中,重组胚胎培养到囊胚期时,可从其内细胞团分离出ES细胞。(3)步骤中,利用pcr技术扩增Rag2基因片段。基因工程中构建基因表达载体时,应用同种限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体,若用HindIII和PstI限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段,则为将该片段直接连接到表达载体,所选择的表达载体上应具有Hind和Pst酶的酶切位点。(4)为检测Rag2基因的表达情况,可采用抗原-抗体杂交法,即提取治疗后的小鼠骨髓细胞的蛋白质(抗原),用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验。2(2019届甘肃省陇南市陇南第一中学高三第二学期模拟考试)利用现代生物工程技术可以改变传统育种方式,培育出新品种。如图表示绿色荧光蛋白转基因克隆猪的具体培育过程。请回答下列问题:(1)上述过程涉及的现代生物工程技术中属于分子水平的技术是_。(2)图中B过程常用_法将绿色荧光蛋白基因导入到成纤维细胞中。(3)C过程要获得单个的成纤维细胞进行培养,需用_处理猪胚胎的部分组织;E过程中若要获得大量的卵母细胞需用_激素处理成年母猪;在进行H过程之前,需要对代孕母猪进行_处理。(4)G过程中,当胚胎发育到囊胚时期时,聚集在胚胎一端,个体较大的细胞是_,将来可发育成胎儿各种组织;滋养层细胞_(填“能”或“不能”)用于性别鉴定,该处细胞将来会发育成_。【答案】(1)基因工程(2)显微注射(3)胰蛋白酶(或胶原蛋白酶) 促性腺同期发情(4)内细胞团能胎膜和胎盘【解析】(1)由图分析可知,该绿色荧光蛋白转基因克隆猪的形成涉及了多项生物工程技术,首先导入目的基因的猪的成纤维细胞,要经过动物细胞培养筛选出转基因体细胞,然后该细胞与成年母猪的卵细胞进行细胞核移植获得重组细胞,重组细胞经过早期胚胎培养到桑椹胚或囊胚阶段,最后经过胚胎移植技术将早期胚胎移植到代孕母猪子宫内,最后生下绿色荧光蛋白转基因克隆猪,综上分析,该过程涉及到的生物工程技术有基因工程、核移植、动物细胞培养、胚胎移植等,其中基因工程技术属于分子水平。(2)将目的基因导入动物细胞常用显微注射技术,故图中B过程常用显微注射法将绿色荧光蛋白基因导入到成纤维细胞中。(3)动物细胞培养前,要先用胰蛋白酶处理组织,使组织中的细胞分散开来,以获得单个细胞。用促性腺激素处理母猪可使其超数产卵,以便获得大量的卵母细胞。H为胚胎移植,在进行H过程之前,需要对代孕母猪进行同期发情处理,以便为供体的胚胎植入受体提供相同的生理环境。(4)囊胚时期可发育成胎儿各种组织,个体较大的细胞是内细胞团细胞,而滋养层细胞可以用于性别鉴定,该处细胞将来会发育成胎膜和胎盘。3(2019届西藏自治区拉萨中学高三第五次月考)已知细胞合成DNA有D和S两条途径,其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径,但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径,但能不断分裂增殖。将这两种细胞在培养皿中混合,加促融剂促进细胞融合,获得杂种细胞,并生产单克隆抗体。请回答下列有关问题:(1)生产单克隆抗体时,一般不直接利用B淋巴细胞,主要原因是_。(2)过程中,常用的与植物细胞融合相同的诱导剂是_。(3)过程为_培养,培养液中还需通入气体物质,其中通入CO2的目的是_。(4)表示杂交瘤细胞的扩大培养,其既可在体外培养,也可注射到小鼠_内培养,体内培养与体外培养相比,其优点是_。(5)为了从培养液中分离出杂交瘤细胞,需要过程向培养液中加入_,理由是杂交瘤细胞可利用_途径合成DNA,从而才能在该培养液中增殖。【答案】(1)B淋巴细胞不能无限增殖(2)聚乙二醇(3)细胞维持培养液的pH (4)腹腔无需再提供营养物质以及无菌环境,操作简便(5)氨基嘌呤淋巴细胞中的S 【解析】(1)生产单克隆抗体时,一般不直接利用B淋巴细胞,主要原因是B淋巴细胞属于高度分化的细胞,不能无限增殖。(2)植物细胞常采用电刺激、聚乙二醇等手段进行融合,而动物细胞采用电刺激、聚乙二醇、仙台病毒等手段进行融合。因此,过程中常用的与植物细胞融合相同的诱导剂是聚乙二醇。(3)过程为细胞培养,培养液中还需通入气体物质,其中通入氧气维持细胞呼吸,通入CO2维持培养液的pH。(4)杂交瘤细胞既可在体外培养,也可注射到小鼠腹腔内培养。体内培养与体外培养相比,其优点是无需再提供营养物质以及无菌环境,操作简便。(5)人淋巴细胞、鼠骨髓瘤细胞在培养皿中混合,加聚乙二醇促进细胞融合,培养液中的细胞有以下5种:人淋巴细胞、鼠骨髓瘤细胞、人淋巴细胞与人淋巴细胞融合细胞、鼠骨髓瘤细胞与鼠骨髓瘤细胞融合细胞以及杂交瘤细胞。其中,人淋巴细胞、人淋巴细胞与人淋巴细胞融合细胞不能无限繁殖,不久会衰老、死亡。向培养液中加入氨基嘌呤,氨基嘌呤可阻断D途径,只有D途径的鼠骨髓瘤细胞、鼠骨髓瘤细胞与鼠骨髓瘤细胞融合细胞无法增殖,而杂交瘤细胞可利用S途径合成DNA,继续繁殖,从而分离出杂交瘤细胞。4(2019届吉林省长春外国语学校高三上学期期末考试)科研工作者欲根据如图所示的流程图生产治疗H7N9型禽流感的抗体,请据图回答相关问题:(1)给小鼠注射的抗原是_,将过程获得的B细胞直接和骨髓瘤细胞融合,将获得_(填“一种”或“多种”)杂交细胞,这些细胞需在具有_作用的特定培养基上培养。(2)过程代表将经选择性培养的杂交瘤细胞,在进行_和_后,获得足够数量的能够产生所需抗体的细胞。(3)过程代表将杂交瘤细胞在_(填“体内”或“体外”)条件下大规模培养,提取大量的单克隆抗体,单克隆抗体最主要的优点是_。(4)单克隆抗体的主要用途有_。【答案】(1)减毒或灭活的H7N9型禽流感病毒多种筛选(2)克隆化培养抗体检测(3)体外特异性强、灵敏度高、可大量制备(4)作为诊断试剂;用于治疗疾病和运载药物【解析】(1)该实验的目的是制备治疗H7N9型禽流感的抗体,因此给小鼠注射的抗原是减毒或灭活的H7

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