生物技术专业基因工程.doc

生物技术专业基因工程复习题一、选择题001 下列有关基因工程定义的论述，错误的是【 E 】A 基因工程涉及DNA的体外拼接，因此又称为重组DNA技术B 基因工程主要是在基因水平上进行定位突变和遗传操作C 基因工程包括上游技术和下游技术两个组成部分D 基因工程涉及外源DNA片段的无性繁殖，因此也称为分子克隆技术E 基因工程也包括动植物转基因技术002 基因工程操作过程中所涉及到的供体通常是指【 D 】A 细胞 B 蛋白质 C RNA D DNA E 多糖003 基因工程操作的下游技术通常是指【C 】 发酵技术 酶固相技术 分离纯化技术A B + C + D + E + + 004 第二代基因工程是指【A 】A 蛋白质工程B 基因组工程C 染色体工程D 细胞工程E 途径工程005 基因工程的基本用途包括【 E 】 基因的分离克隆 规模化产生蛋白质 生物物种改良A B + C + D + E + + 006 启动子的生物学功能是【 A 】A DNA复制的起点B 基因转录的开关C 蛋白质合成的场所D 蛋白质分泌的元件E 蛋白质修饰的位点007 原核细菌蛋白质生物合成的调控元件是【 C 】A SD序列 B 增强子 C 操纵子 D 内含子 E 终止子008 核酸凝胶电泳技术的主要用途是【 C 】A 序列特异性切割核酸链B 序列特异性修饰核酸分子C 测定核酸分子的大小D 将蛋白质与核酸分开E 将DNA与RNA分开009 很多在大肠杆菌中表达的人蛋白质编码基因都采用人工合成的方法获得，其原因是【A 】A 人工合成外源基因工作量更小B 人工合成外源基因获得的样品纯度更高C 人工合成外源基因准确性更大D 人工合成外源基因获得的样品量更多E 人工合成外源基因便于纠正密码子的偏爱性010 在基因工程中，控制质粒拷贝数的意义在于【 C 】A 使重组质粒更加稳定B 使外源基因表达量更高C 使外源蛋白在细胞内更稳定D 使外源基因表达产物更易被修饰E 使细胞生长速度更快011 大肠杆菌基因工程菌中包涵体的主要成分是【 B 】A 脂类 B 蛋白质 C RNA D DNA E 多糖012 需要进行蛋白质变复性处理的外源基因表达法是【 】A 包涵体表达法B 融合型表达法C 分泌型表达法D 寡聚型表达法E 整合型表达法013 一般而言，蛋白质分泌所需的基本条件是【 D 】A SD序列B 操作子序列C 启动子序列D 信号肽序列E 限制性核酸内切酶识别序列014 以融合形式表达外源蛋白的主要优点包括【 E 】 纯化方便 稳定性好 溶解性好 无突变A + B + C + + D + + E + + + 015 CNBr化学裂解多肽链的断裂位点是【 C 】A Arg B Lys C Met D Pro E Ser016 利用寡聚型表达法表达小分子肽段的主要优势在于【E 】A 重组操作简便B 表达产物易于纯化C 表达产物不易对受体细胞产生毒性D 表达产物无需重折叠E 表达产物相对稳定017 外源基因整合型表达的主要重组操作环节是【D 】A 将目的基因与一已知基因进行有效拼接B 将目的基因与一信号肽编码序列进行拼接C 将目的基因与一启动子序列进行拼接D 将目的基因插在载体标记基因的下游E 将目的基因插在受体染色体DNA的合适区域018 美国Ely LiLI公司目前用于大规模生产人胰岛素的重组表达技术是【 B 】A AB链分别融合表达B ACB链融合表达C AB链分别分泌表达D ACB链分泌表达E AB链串联表达019 提高重组率的方法包括【E 】 加大外源DNA与载体的分子之比载体分子除磷连接酶过量延长连接反应时间A + B + + C + + D + + E + + + 020 下列各组用于外源基因表达的受体细胞及其特点的对应关系中，错误的是【 C 】A 大肠杆菌繁殖迅速B 枯草杆菌分泌机制健全C 链霉菌遗传稳定D 酵母菌表达产物具有真核性E 动物细胞具有完善的蛋白质糖基化功能021 若某质粒带有lacZ标记基因，那么与之相匹配的筛选方法是在筛选培养基中加入【 D 】A 半乳糖B 葡萄糖C 蔗糖D 5-溴-4-氯-3-吲哚基-b-D-半乳糖苷（X-gal）E 异丙基巯基-b-半乳糖苷（IPTG）022 从dam型大肠杆菌受体细胞中分离出的质粒DNA能被BamHI、BglII、Sau3AI降解（如果上述酶切位点存在），但对BclI和MboI不敏感（尽管上述酶切位点存在），其原因是【 B 】A Dam甲基化酶使BclI和MboI识别序列甲基化，但对BamHI、BglII、Sau3AI不起作用B Dam甲基化酶既可使5-GATC-3序列中的腺嘌呤N6甲基化，也可使胞嘧啶C5甲基化，这两种甲基化作用对限制性内切酶活性的影响不同C Dam甲基化酶能使所有5-GATC-3序列中的腺嘌呤N6甲基化，但不同的限制性内切酶对这种甲基化作用的敏感性不同D Dam甲基化酶的作用位点在5-GATC-3序列内部，但该酶与DNA靶序列的结合还依赖于5-GATC-3序列左右两端的其它碱基组成E Dam甲基化酶既能使5-GATC-3序列中的腺嘌呤N6单甲基化，也能使其双甲基化，只有后者才能抵御相应限制性内切酶的切割作用023 带有多个不同种复制起始区的质粒是【B 】A 穿梭质粒B 表达质粒C 探针质粒D 整合质粒E 多拷贝质粒024 某一重组转化系统的重组率为10%，转化率为10 7 / mg DNA，经切接单元操作后的载体转化率为原来的1%。若欲获得10,000个重组克隆，需在重组实验中投入载体【 】A 0.1 mg B 0.5 mg C 1.0 mg D 2.0 mg E 10 mg025 天然PstI限制性内切酶的来源是【 】A Bacillus amyloliquefaciensB Escherichia coliC Haemophilus influenzaeD Providencia stuartiiE Streptomyces lividans026 下列载体常用选择性标记中属于营养缺陷型的是【C 】A tsr B Apr C lacZ D Tcr E Trp-027 基因工程的受体细胞必须具备【 B 】 限制性缺陷 营养缺陷 感染寄生缺陷A B + C + D + E + + 028 载体质粒pBR325共有三个选择性标记：Apr、Tcr、Cmr。它们分别含有一个单一酶切位点：PstI、SphI和EcoRI。若将一外源基因取代此载体上不含Cmr 标记基因的PstI-SphI限制性DNA片段，那么用于转化子和重组子筛选的试剂应是【 】A Ap B Tc C Cm D Ap + Tc E Ap + Cm029 某一质粒的多克隆位点上含有下列单一限制性内切酶识别序列：AluI、BglII、ClaI、DpnI、EcoRV， 若将含有EcoRI粘性末端的外源基因克隆在这个质粒上，并保留EcoRI酶切位点，则合适的插入位点是【 】A AluI B BglII C ClaI D DpnI E EcoRV030 mRNA分离纯化技术的关键是【 】A 细胞的温和破碎B 分离系统中不得含有痕量的SDSC 高离子强度缓冲液的使用D 密度梯度超离心E 严防核酸酶的降解031 l-DNA体外包装系统通常分成分离的两部分，其原因是【 】A 安全B 包装蛋白含量太大难于溶解C 便于操作D 提高转染率E 包装蛋白组份的冷冻保藏条件不同032 基因文库的构建方法包括【 】 合成法 cDNA法 鸟枪法 PCR法A + B + C + D + E + 033 Taq DNA聚合酶的发现使得PCR技术的广泛运用成为可能，这是因为【 】A Taq DNA聚合酶能有效地变性基因扩增产物B Taq DNA聚合酶催化的聚和反应不需要引物C Taq DNA聚合酶具有极强的聚和活性D Taq DNA聚合酶能使多轮扩增反应连续化E Taq DNA聚合酶能使扩增反应在DNA变性条件下进行034 cDNA合成中所涉及的三种工具酶是【 】 T4-DNA连接酶 Klenow酶 S1核酸酶 Bal31核酸酶 逆转录酶A + + B + + C + + D + + E + + 035 构建基因文库一般使用的载体是【 】 质粒 l-DNA CosmidA B C D + E + + 036 考斯质粒（cosmid）是一种【 】A 天然质粒载体B 由l-DNA的cos区与一质粒重组而成的载体C 能裂解受体细胞的烈性载体D 具有溶原性质的载体E 能在受体细胞内复制并包装的载体037 鸟枪法克隆目的基因的战略适用于【 】A 原核细菌B 酵母菌C 丝状真菌D 植物E 人类038 限制性核酸内切酶是由细菌产生的，其生理意义是【 】A 修复自身的遗传缺陷B 促进自身的基因重组C 强化自身的核酸代谢D 提高自身的防御能力E 补充自身的核苷酸消耗039 下列设计的探针中，最佳的是【 】A ACATTAAATTATTB GGGCAC ACCTTGATAAGGTD CGGACTTGACCATCE TTTAGG040 下列各常用载体的装载量排列顺序，正确的是【 】A Cosmid l-DNA PlasmidB l-DNA Cosmid PlasmidC Plasmid l-DNA CosmidD Cosmid Plasmid l-DNAE l-DNA Plasmid Cosmid041 影响启动子功能的因素包括【 】 本身长度 与基因之间的距离 本身碱基排列顺序A B C D + E + 042 经抗药性遗传标记法筛选出的转化体中，往往会出现无载体或无重组DNA分子的菌落，其原因很可能是【 】A 标记基因发生突变B 载体或重组分子不稳定C 载体或重组分子整合入受体染色体中D 载体空载E 筛选药物诱导受体细胞产生抗性043 下列亮氨酸密码子在大肠杆菌蛋白质结构基因中出现频率最低的是【 】A CUA B CUC C CUG D UUA E UUG044 某一表达质粒上含有一个能在大肠杆菌中高效表达的基因A，若将外源基因B插入基因A的3 末端，并维持基因B的阅读框架不变，使两者在受体细胞中产生融合蛋白，则正确的重组策略是【 】A A基因用BamHI切开，B基因用BamHI切开，连接B A基因用BglII切开，B基因用BamHI切开，连接C A基因用EcoRV切开，B基因用SmaI切开，连接D A基因用PvuII切开，B基因用SmaI切开，连接E A基因用SmaI切开，B基因用SmaI切开，连接045 根据酶切活性对盐浓度的要求，限制性核酸内切酶可分成【 】A 2大类 B 3大类 C 4大类 D 5大类 E 6大类046 构建基因文库极为重要的原则是防止外源DNA片段之间的连接，其方法是【 】 DNA片段分级分离 除去DNA片段末端的磷酸基团 用TdT酶增补人工粘性末端A B + C + D + E + + 047 双脱氧末端终止法测定DNA序列是基于【 】A DNA的聚合反应B DNA的连接反应C DNA的降解反应D 特殊的DNA连接酶E 聚合单体2 和5 位的脱氧048 若载体DNA用M酶切开，则下列五种带有N酶粘性末端的外源DNA片段中，能直接与载体拼接的是【 】 M NA A/AGCTTT/TCGAAB C/CATGGACATG/TC CCC/GGGG/GGCCCD G/GATCCA/GATCTE GAGCT/CG/AGCTC049 放射免疫原位杂交法所使用的菌体破碎方法是【 】 氯仿蒸汽 碱溶液 烈性噬菌体A B + C + D + E + + 050 下列五个DNA片段中含有回文结构的是【 】A GAAACTGCTTTGACB GAAACTGGAAACTGC GAAACTGGTCAAAGD GAAACTGCAGTTTCE GAAACTGCAGAAAG051 下列三种探针同位素标记法中，必须使用a-32P-dNTP的是【 】 T4-PNP标记 缺口前移标记 反转录标记A B + C + D + E + + 052 下列DNA片段中，通过加热并用S1核酸酶处理即可使DNA断裂的是【 】ACCGATCAAGCTGTTCCCGGAGGTGCCCGCCCTAAGGAGACTCGGTGGCTAGTTCGACAAGGGCCTCCACGGGCGGGATTCCTCTGAGCCAB AAGGTCGGCGGGTTCCCACCCGTGAGCATCGGGCCTTGCCGTTATTTCCAGCCGCCCAAGGGTGGGCACTCGTAGCCCGGAACGGCAATACTATGATCATCCGCCGGGTGTCACTGATCCATGGCCCAAGGGTTTCATACTAGTAGGCGGCCCACAGTGACTAGGTACCGGGTTCCCAAAGDGAGGATCCCTTTGCGATTCACCTAGGGTATCTCTGTAGGGCCTAGCTCCTAGGGAAACGCTAAGTGGATCCCATAGAGACATCCCGGATCE GCATCGGCCCCCGGTAAATATTCTCGGGGCGGGTAGCCGCCTAGTCGTAGCCGGGGGCCATTTATAAGAGCCCCGCCCATCGGCGGATCA053 从凝胶上回收DNA片段有多种方法，其中无需将凝胶切下来的是【 】A 冻融法B 滤纸法C 吸附法D 溶解法E 低融点凝胶法054 在菌落原位杂交法中使用的0.4N NaOH溶液的作用是【 】 破细胞壁 蛋白质变性 DNA变性 RNA降解A + + B + + C + + D + + E + + + 055 下列有关连接反应的叙述，错误的是【 】A 连接反应的最佳温度为37B 连接反应缓冲体系的甘油浓度应低于10%C 连接反应缓冲体系的ATP浓度不能高于1mMD 连接酶通常应过量2-5倍E DTT可以维持连接酶的结构056 某一重组DNA（6.2 kb）的载体部分有两个SmaI酶切位点。用SmaI酶切后凝胶电泳上出现四条长度不同的带子，其长度总和与已知数据吻合，该重组分子插入片段上的SmaI酶切位点共有【 】A 5个 B 4个 C 3个 D 2个 E 至少2个057 重组分子的不稳定性表现在【 】 DNA片段缺失或重排 外源基因整合入受体细胞染色体DNA上 重组质粒丢失A B + C + D + E + + 058 T4 DNA连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段DNA片段连接在一起，其底物的关键基团是【 】A 2 -OH 和 5 -PB 2 -OH 和 3 -PC 3 -OH 和 2 -PD 3 -OH 和 5 -PE 5 -OH 和 3 P059 载体的功能是【 】 运送外源基因高效进入受体细胞 为外源基因提供复制能力为外源基因提供整合能力A B + C + D + E + + 060 基因工程的单元操作顺序是【 切，接，转，增，检】A 增，转，检，切，接B 切，接，转，增，检C 接，转，增，检，切D 检，切，接，增，转E 切，接，增，转，检061 鸟枪法克隆目的基因的第一步是随机或非随机切割外源DNA，其方法有【 】 超声波处理 酶解 机械搅拌A B + C + D + E + + 062 下列各组分别用两种不同的限制性内切酶切开的DNA片段经补平并连接后，其重组分子内能产生ClaI限制性内切酶酶切位点的是【 】A BglII / BamHIB HindIII / BamHIC MluI / BamHID SpeI / BamHIE XbaI / BamHI063 质粒DNA和外源DNA各用两种限制性内切酶切开，经连接转化后获得重组子。下列各组重组子中有可能含有两种相反基因极性的是【 】A ApaI / ClaIB BamHI / BglIIC BclI / SmaID HindIII / KpnIE SphI / PstI064 多项研究结果表明，苍蝇体内存在一种新型高效广谱抗菌蛋白。为克隆其基因，最快速有效的筛选方法是【 】A 噬菌斑模型B 透明圈模型C 颜色反应模型D 免疫杂交模型E 凝胶电泳模型065 下列三种方法中，能有效区分重组子与非重组子的是【 】 限制性酶切 PCR扩增 抗药性筛选A B + C + D + E + + 066 为了使人类有经济价值的基因在大肠杆菌中高效表达，有时可以采用同步克隆表达受体菌tRNA基因的方法，其机理是【 】A 增强基因的转录B 纠正受体菌密码子的偏爱性C 促进氨酰基tRNA合成酶的表达D 稳定mRNA在核糖体上的定位E 启动mRNA的翻译067 为了利用PCR技术扩增下列染色体DNA片段上的方框部分，应选用的引物顺序是【 】A + B + C + D + E + 068 能有效降低菌落原位杂交本底的方法是【 】 延长嚗光时间 高离子强度溶液清洗薄膜 高温杂交A B + C + D + E + + 069 多聚接头（Polylinker）指的是【 】A 含有多种限制性内切酶识别及切割顺序的人工DNA片段B 含有多种复制起始区的人工DNA片段C 含有多种SD顺序的人工DNA片段D 含有多种启动基因的人工DNA片段E 含有多种特定密码子的人工DNA片段070 评估基因文库完备性的数学公式是【 】A N = ln（P-1）/ ln（f-1）B N = lg（P+1）/ lg（f+1）C N = ln（1-P）/ ln（1-f）D N = lg（1-P）/ ln（1-f）E N = lg（1-f）/ ln（1-P）071 下列五个DNA片段，最可能含有SstI酶切位点的是【 】A GGAGAGCTCTB GAGCACATCTC CCCTGTGGGAD ATCCTACATGE AACCTTGGAA072 l-DNA体外包装的上下限是天然l-DNA长度的【 】A 25 - 50 %B 50 - 100 %C 75 - 100 %D 75 - 105 %E 100 - 125 %073 建立人的基因文库所需的技术是【 】A 分子克隆技术B 体外转录技术C 体外翻译技术D 产物分泌技术E 基因诱导表达技术074 高等哺乳类动物基因在大肠杆菌中高效表达时，其产物往往失去水溶性，原因是【 】A 表达产物浓度过高B 表达产物不能正确折叠C 表达产物不含糖基侧链D 表达产物难以形成二硫键E 表达产物中极性氨基酸残基比例下降075 pIJ486是链霉菌的启动子探针质粒（如下图所示），其中neo和tsr分别为新霉素和硫链丝菌素的抗性基因。为了准确克隆和筛选具有启动子活性的外源DNA片段，最为理想的插入位点应是【 】A ApaIB BclIC EcoRVD KpnIE PstI076 琥珀突变是指【 】A 起始密码的突变B 终止密码子的突变C 精氨酸密码子的突变D 谷酰胺密码子的突变E 丙氨酸密码子的突变077 cDNA第一链合成所需的引物是【 】A Poly AB Poly CC Poly GD Poly TE 发夹结构078 原生质体转化方法不大适用于【 】A 大肠杆菌B 枯草杆菌C 酵母菌D 链霉菌E 植物细胞079 下列五种重组DNA分子中，目的基因有可能获得高效表达的是【 】启动子 SD序列 目的基因 终止子A B C D E 080 下列各组专业术语中，含义最为接近的是【 】A 终止子与终止密码子B 基因表达与基因转译C DNA退火与DNA复性D 转化与转染E 重组子与转化子081 分子杂交的化学原理是形成【 】A 共价键 B 离子键 C 疏水键 D 配位键 E 氢键082 下列能区分期望重组子的筛选方法是【 】A 抗药性筛选法B 营养缺陷筛选法C 显色筛选法D 次级克隆法E 菌落原位杂交法083 cDNA法获得目的基因的优点是【 】A 成功率高B 不含内含子C 操作简便D 表达产物可以分泌E 能纠正密码子的偏爱性084 一般而言，分子量小的蛋白质更不稳定，其原因是【 】A 分子量越小，形成良好空间构象的可能性越低B 分子量越小，表达效率越高C 分子量越小，分泌效果越佳D 分子量越小，形成多聚体的概率越大E 分子量越小，越容易被加工修饰085 基因工程菌中重组质粒的丢失机制是【 】A 重组质粒渗透至细胞外B 重组质粒被细胞内核酸酶降解C 重组质粒在细胞分裂时不均匀分配D 重组质粒杀死受体细胞E 重组质粒刺激受体细胞提高其通透性086 下列有关基因的叙述，错误的是【 】A 蛋白质是基因表达的唯一产物B 基因是DNA链上具有编码功能的片段C 基因也可以是RNAD 基因突变不一定导致其表达产物改变结构E 基因具有方向性087 克隆菌扩增的目的是【 】 增殖外源基因拷贝 表达标记基因 表达外源基因A B + C + D + E + + 088 一段经NarI切开的DNA片段用Klenow补平，另一段经HgiAI切开的DNA片段用T4 DNA聚合酶处理，这两段DNA连接后，连接位点处的DNA序列是【 】A GGCCCGB GGCGCCCGCGC GTGCACACGTD GGCGCCCCGCGGE GGCGTGCACCCGCACGTG089 克隆PCR扩增产物的载体一般使用【 】A pBR322 B pUC18 C pGEM D l DNA E T载体090 质粒的不相容性是指【 】A 两个携带相同标记基因的质粒不能共处在一个细胞中B 两个携带相同外源基因的质粒不能共处在一个细胞中C 两个携带相同酶切图谱的质粒不能共处在一个细胞中D 两个携带相同复制位点的质粒不能共处在一个细胞中E 两个携带相同表达元件的质粒不能共处在一个细胞中091 l DNA一般不用于表达目的基因，其原因是【 】A l DNA上没有合适的表达元件B l DNA上没有合适的插入位点